中藥組分配伍研究方法及應(yīng)用實(shí)踐

李楊，張梅

·綜述進(jìn)展·

中藥組分配伍研究方法及應(yīng)用實(shí)踐

李楊，張梅

中藥有效組分配伍是中藥配伍的新模式，包括單味藥組分配伍、經(jīng)典藥對(duì)組分配伍、方劑組分配伍、功能相似組分配伍等，其研究方法主要涉及有效組分的提取、活性組分篩選、配伍方案設(shè)計(jì)等。本文對(duì)中藥組分配伍研究方法及應(yīng)用進(jìn)行綜述。

組分配伍；研究方法；應(yīng)用實(shí)踐

復(fù)方是中醫(yī)臨床治療的主要形式和手段，配伍是中醫(yī)辨證用藥的特色，“藥有個(gè)性之特長(zhǎng)，方有合群之妙用”，通過(guò)配伍可以減少藥物毒副作用，增強(qiáng)藥物療效，使其適用于各種復(fù)雜疾病的治療。傳統(tǒng)配伍研究模式是以藥物（飲片）為研究對(duì)象，以整體效果為主導(dǎo)，進(jìn)行拆方、組方及研究藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，由于中藥復(fù)方化學(xué)成分和作用機(jī)制的復(fù)雜性，在研究試圖闡明其組效、量效、時(shí)效關(guān)系，尤其是中藥多組分、多靶點(diǎn)、多途徑作用機(jī)制時(shí)困難重重。

中藥有效組分配伍是中藥配伍的新模式，組分配伍研究是在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，有效成分研究的基礎(chǔ)上，以組分為研究對(duì)象，運(yùn)用現(xiàn)代技術(shù)手段研究藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、相互作用和劑量關(guān)系的新研究模式，是中醫(yī)藥理論現(xiàn)代化研究的突破點(diǎn)。由于藥物作用的多功能性，藥效物質(zhì)的復(fù)雜性，以及藥理過(guò)程的不可測(cè)性等，因此從具體成分、組分以及組分配伍關(guān)系、劑量關(guān)系進(jìn)行研究，能更精確地把握中藥復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為臨床應(yīng)用提供更明確的理論基礎(chǔ)。本文從方法及應(yīng)用方面對(duì)中藥組分配伍研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。

1 組分配伍研究應(yīng)用實(shí)踐

組分配伍代替中藥配伍，不僅能明確藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，控制組分質(zhì)量，便于藥效機(jī)制研究，更能夠剔除無(wú)效成分、毒性成分和無(wú)功能性成分，很大程度上減少用藥劑量，增加治療療效。

1.1 單味藥中有效組分配伍

以單味藥中有效成分為研究對(duì)象進(jìn)行配伍是最簡(jiǎn)單的研究方式之一。如能將提取的有效組分進(jìn)行合理配伍，則能發(fā)揮最佳治療療效。

酸棗仁具有補(bǔ)心益肝、斂汗、安神的功效。張啟鐸等采用均勻設(shè)計(jì)法將總脂肪油、總黃酮和總皂苷最佳配比時(shí)，發(fā)現(xiàn)以1∶10∶10配伍能使抗抑郁的療效達(dá)到最佳[1]。趙任杰等[2]研究表明，丹酚酸A、B以1∶1配伍時(shí)對(duì)腎纖維化過(guò)程中CTGF及Par-3的干預(yù)作用最強(qiáng)。單味藥中有效成分配比不同達(dá)到的療效亦有所不同。黃芩具有清熱燥濕、瀉火解毒等功效，經(jīng)研究表明：黃芩功效取決于藥效組分間的比例，漢黃芩素∶黃芩素∶漢黃芩苷∶黃芩苷配比為1∶2.60∶4.96∶26.38時(shí)清熱解毒療效最佳，1∶1.89∶5.42∶28.83時(shí)瀉火解毒的功效尤為突出[3]。紅管藥具有祛痰止咳作用，總皂苷祛痰、總黃酮止咳。通過(guò)基線等比增減設(shè)計(jì)法得出：當(dāng)兩個(gè)以1∶1配伍時(shí)止咳作用強(qiáng)[4]。

1.2 經(jīng)典藥對(duì)配伍

藥對(duì)是經(jīng)過(guò)臨床長(zhǎng)期實(shí)踐得出的具有明確療效的藥物配伍，也是中藥有效成分配伍研究思想的直接來(lái)源。人參配伍附子為經(jīng)典藥對(duì)，古有記載：補(bǔ)先天之氣無(wú)如附子，補(bǔ)后天之氣無(wú)如人參。研究表明：二者配伍的減毒作用在一定范圍內(nèi)，隨著人參劑量的增加而增加，比例為1∶1或大于1∶1時(shí)，效果更為明顯[5]。黃芪丹參為常用藥對(duì)，黃芪總皂苷與丹參總酚酸配比為1∶1時(shí)，能緩解UUO大鼠腎纖維化模型，并使α-SMA在腎間質(zhì)表達(dá)的陽(yáng)性率顯著降低、使E-cadherin的表達(dá)明顯上調(diào)[6]。丹參與人參配伍時(shí)，使丹參總酚酸 人參總皂苷∶人參多糖配比為2∶2∶1能夠明顯抑制肝癌細(xì)胞SMMC-7721的增殖[7]。

1.3 有效復(fù)方中有效組分配伍

復(fù)方中藥藥效成分復(fù)雜，其不同的成分之間作用不同，如協(xié)同作用、增效作用或減毒作用等。潘從澤等研究表明：當(dāng)復(fù)方丹參方中丹參提取物、三七總皂苷、冰片與穿山龍總皂苷配伍比例達(dá)到30∶10∶1∶10時(shí)，可使機(jī)體內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)的活性提高，缺血過(guò)程中自由基的生成得到抑制，心肌梗死范圍、心臟凋亡指數(shù)均明顯降低，達(dá)到保護(hù)心肌缺血再灌注損傷的作用[8]。通脈復(fù)方中通過(guò)提取復(fù)方多糖和復(fù)方皂苷并加以配伍得出：當(dāng)兩者比例為4∶1時(shí)抑制GMC的作用最強(qiáng)[9]。復(fù)方別敏中抑制細(xì)胞增殖最明顯的配伍比例為黃芩苷、淫羊藿苷、黃芪甲苷為1∶2.14∶2.65[10]。四物湯中川芎嗪、芍藥苷、阿魏酸、多糖的比例達(dá)到2.275∶4.285∶5.298∶1.472時(shí)，促進(jìn)造血功能最強(qiáng)[11]。

1.4 功效相似有效組分配伍

將提取的有效組分進(jìn)行合理的配伍使用，可以大大增加療效。清熱解毒中藥有效組分配伍注射液中黃芩苷能夠保護(hù)感染性腦水腫，梔子苷具有明顯的抗炎、解熱活性，將黃芩苷和梔子苷配伍能夠很好地保護(hù)LPS致大鼠感染性腦損傷。芍藥甘草湯中多種成分之間具有協(xié)同增效的作用，芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷等和甘草中的甘草酸、甘草苷、異甘草素等均有抗炎、鎮(zhèn)痛的作用，故將醋白芍與炙甘草按質(zhì)量1∶1配伍能大大提高療效[12]。決明子、丹參、苦丁茶、絞股藍(lán)均為經(jīng)典的降脂藥物，將其提取物進(jìn)行配伍可得：決明子、丹參、苦丁茶按3∶1∶1配伍相比決明子、丹參、絞股藍(lán)提取物按3∶1∶1配伍的效果強(qiáng)[13]。丹參和黃芪常單獨(dú)用于減緩腎纖維化，如將黃芪總皂苷3.75mg．mL-1與丹參總酚酸4mg．mL-1進(jìn)行配伍可明顯提高療效[14]。

2 組分配伍的研究方法

為全面、快速、高效、重復(fù)獲得中藥或方劑中有效成分，張伯禮教授[15]提出建立中藥標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)。標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)是一種標(biāo)準(zhǔn)化、大規(guī)模、共享性的物質(zhì)資源庫(kù)，是在標(biāo)準(zhǔn)的、規(guī)范的工藝流程下，綜合利用多種現(xiàn)代分離技術(shù)，獲取大規(guī)模中藥有效成分，進(jìn)行化學(xué)表征、生物學(xué)表征及活性評(píng)價(jià)。標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)能有效積累微量物質(zhì)，避免研究過(guò)程的重復(fù)，使組分研究的化學(xué)物質(zhì)明確、質(zhì)量可控。

目前中藥標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)已初步建立，豐加濤等[16]已從50味中藥和8個(gè)復(fù)方中提取分離出1166個(gè)中藥標(biāo)準(zhǔn)組分。徐青等[17]提取葛根正丁醇部位的18個(gè)標(biāo)準(zhǔn)組分并進(jìn)行初步的化學(xué)表征。王慧等[18]將新疆赤芍的乙酸乙酯部位進(jìn)行活性篩選和化學(xué)表征分離出4種化合物，已達(dá)到初步建立新疆赤芍標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)的目的。

中藥標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)研究中的關(guān)鍵技術(shù)包含：組分提取分離技術(shù)、活性組分篩選、最優(yōu)配比設(shè)計(jì)技術(shù)等。

2.1 組分提取分離

有效組分提取是從中藥材或中藥飲片中提取有效物質(zhì)，通過(guò)四大平臺(tái)（中藥提取標(biāo)準(zhǔn)化平臺(tái)、溶劑分配分離標(biāo)準(zhǔn)化平臺(tái)、大孔樹脂分離標(biāo)準(zhǔn)化平臺(tái)及工業(yè)色譜分離標(biāo)準(zhǔn)化平臺(tái)）提取分離標(biāo)準(zhǔn)組分進(jìn)入標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)并進(jìn)行生物學(xué)表征和藥效學(xué)評(píng)價(jià)[16]，用以標(biāo)準(zhǔn)組分配伍研究。

2.2 組分篩選

基于藥物作用性質(zhì)與功效，將組方拆成單組分藥組、陰性藥物組，或拆成組分相同相近的復(fù)方組，從而對(duì)其功效及配伍規(guī)律進(jìn)行研究，能夠明確知道單組分是否起效，篩選出中藥活性組分。目前組分篩選是利用一定的技術(shù)方法發(fā)現(xiàn)和保留中藥活性成分，剔除無(wú)效組分。具體方法是將配伍后的組分運(yùn)用到具有特定病癥的整體、器官、細(xì)胞和分子水平的模型中，通過(guò)對(duì)特定病癥及其指標(biāo)的觀察檢測(cè)，對(duì)活性配伍組分進(jìn)行篩選和優(yōu)化。如蛇膽陳皮口服液采用雙活性評(píng)價(jià)譜效捕獲方法，運(yùn)用微量色譜分離法快速篩選和鑒定平喘抗炎活性成分[19]。劉慶山等[20]從蒙藥復(fù)方白脈散的乙酸乙酯部位中得到29個(gè)標(biāo)準(zhǔn)組分，利用高通量篩選法獲得大復(fù)方的活性成分，利用快速色譜技術(shù)建立少數(shù)民族復(fù)方藥標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)。

2.3 最優(yōu)配比設(shè)計(jì)

無(wú)論是中藥使用和配伍，還是中藥有效組分使用和配伍都應(yīng)在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，遵循配伍原則和配伍禁忌等，根據(jù)對(duì)特定病癥的控制、改善，挑選出最優(yōu)配伍比例。篩選配伍比例需要一定的設(shè)計(jì)方法，目前采用配伍比例確定的方法多種多樣，最常用的有定量物理學(xué)實(shí)驗(yàn)法、正交設(shè)計(jì)法、藥對(duì)協(xié)同效應(yīng)設(shè)計(jì)法、均勻設(shè)計(jì)法等[21]。

2.4 整合效應(yīng)研究

整合效應(yīng)研究一般基于生物網(wǎng)絡(luò)調(diào)控理論、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、組合藥靶和藥代動(dòng)力學(xué)[21]，通過(guò)組分間“七情配伍”、“君臣佐使”和“四氣五味”等關(guān)系發(fā)揮協(xié)同、相加、競(jìng)爭(zhēng)和拮抗的作用。通過(guò)多途徑、多靶點(diǎn)相互協(xié)同發(fā)揮作用，達(dá)到放大或優(yōu)勢(shì)選擇作用，也是中藥與西醫(yī)單藥物治療的不同之處。如丹參各組分通過(guò)整合作用改善微循環(huán)和損傷的靶器官[22]。由人參總皂苷和丹參總酚酸組成的新雙龍方，通過(guò)多途徑調(diào)節(jié)心梗大鼠整體機(jī)能[23]。

3 思考與展望

標(biāo)準(zhǔn)組分研究關(guān)鍵技術(shù)的建立，為標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)的建立提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，但仍存在確定活性成分的難度系數(shù)大，把握組分整合效應(yīng)的難度大等問(wèn)題，使得活性篩選的工作量和方法選擇的隨意性和把握藥物進(jìn)入體內(nèi)后變化的難度加大，因此要加大對(duì)整合作用的研究和建立方法的研究，將眾多的方法進(jìn)行分類，確定使用范圍及描述具體的使用方法等進(jìn)行較為細(xì)致的分類是非常有必要的。

中藥有效組分的配伍研究，并不是簡(jiǎn)單地將有效組分進(jìn)行合并，而是研究合并后的成分是否發(fā)生變化，作用機(jī)理是否發(fā)生改變等等。如夏桑菊三味藥共煎時(shí)產(chǎn)生了較高含量的新未知化學(xué)成分[24]。因此在中藥有效組分配伍的研究中要從不同層次、不同角度、不同水平上深入研究組分間的配伍比例和劑量關(guān)系以及成分之間是協(xié)同還是拮抗等作用。建立中藥標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)為組分配伍研究提供了物質(zhì)基礎(chǔ)，使得組分質(zhì)量得到很好的控制，但隨著技術(shù)的改進(jìn)、中藥組分配伍的深入研究，中藥標(biāo)準(zhǔn)組分庫(kù)的信息資源有限，因此需要不斷豐富和完善，為研究提供更為精確、可靠的組分信息。中藥有效組分配伍是基于中藥配伍的更高層次，但仍然要以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，結(jié)合中醫(yī)辨證論治、整體觀念，遵循方劑的配伍原則和配伍禁忌等，體現(xiàn)中醫(yī)的特色特點(diǎn)，發(fā)揮中醫(yī)的特長(zhǎng)。

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（責(zé)任編輯：蔣淼）

The methods and application of compatibility of component in traditional Chinese medicine

/LI Yang, ZHANG Mei//( Pharmacy College, Chengdu university of Traditional Chinese Medicine , The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicines of Ministry , State Key Laboratory Breeding Base of Systematic research, development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

Compatibility of effective component is a new model of compatibility of traditional Chinese medicine (TCM). Many forms are included, such as components compatibility of single herbs, classical medicine pair, prescription and the medicine which has similar function. The major research methods involve extraction of effective components, selection of active component, and design of compatibility etc. The methods of compatibility and application of compatibility of component in traditional Chinese medicine are reviewed in this paper,.

Compatibility of component; research method; application

R 284

A

1674-926X(2016)05-015-03

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81473735）

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 四川省中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室——省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 611137

李楊(1991-)，女，藥物分析專業(yè)碩士在讀

Tel：18215529216 Email： 1016053702@qq.com

張梅，博士，教授，從事中藥及其復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究工作

Tel：028-61800231 Email：zhangmei63@126.com

2015-12-30