8種殺菌劑對(duì)芝麻尖孢鐮刀菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

李夢(mèng)姣 王振軍 劉紅彥

摘要 [目的]篩選出防治芝麻枯萎病的有效化學(xué)藥劑。[方法]采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定8種殺菌劑對(duì)芝麻尖孢鐮刀菌的抑制作用。[結(jié)果]室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，8種殺菌劑在試驗(yàn)濃度下對(duì)芝麻尖孢鐮刀菌的生長(zhǎng)均有一定的抑制作用。氟硅唑?qū)Σ【囊种谱饔米顝?qiáng)，EC50僅為0.232 mg/L；其次是吡唑醚菌酯，EC50為0.759 mg/L，此外多菌靈和苯醚甲環(huán)唑?qū)χヂ榧怄哏牭毒灿泻軓?qiáng)的抑制作用。[結(jié)論]為藥劑混配和防治芝麻枯萎病提供藥劑篩選的理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞 殺菌劑；尖孢鐮刀菌；芝麻枯萎病；室內(nèi)毒力測(cè)定

中圖分類號(hào) S482.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2014）16-05010-02

芝麻屬胡麻科胡麻屬，是世界上最古老的優(yōu)質(zhì)油料作物，也是我國(guó)重要的優(yōu)勢(shì)農(nóng)產(chǎn)品[1-2]。芝麻枯萎病又稱半邊黃或黃化，是由尖孢鐮刀菌引起的一種維管束病害，一般發(fā)病率5%～10%，嚴(yán)重時(shí)達(dá)到30%以上，是芝麻生產(chǎn)中的重要病害[3-4]。病菌多從苗的根尖、傷口侵入，根部往往半邊根系變成褐色，進(jìn)而進(jìn)入導(dǎo)管，沿導(dǎo)管蔓延到莖、葉、蒴果和種子，使莖部變?yōu)榧t褐色，葉片萎縮變黃，從而致使全株發(fā)病枯死[4]。病原菌以菌絲或厚垣孢子在土壤中越冬，并可在土壤中存活6年以上，致使枯萎病發(fā)病率連年增加[5]。為了篩選出防治該病的高效藥劑，筆者研究了多種殺菌劑對(duì)芝麻尖孢鐮刀菌進(jìn)行室內(nèi)毒力試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株。芝麻尖孢鐮刀菌種，由河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物防治研究室提供。

1.1.2 供試藥劑。70%代森錳鋅可濕性粉劑，利民化工股份有限公司；70%甲基硫菌靈水分散粒劑，上海禾本藥業(yè)有限公司；50%福美雙可濕性粉劑，廣東中迅農(nóng)科股份有限公司；250 g/L嘧菌酯懸浮劑，上海禾本藥業(yè)有限公司； 250 g/L吡唑醚菌酯乳油，德國(guó)巴斯夫；400 g/L氟硅唑乳油，深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司；10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑，深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司；90%多菌靈水分散粒劑，上海禾本藥業(yè)有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 培養(yǎng)基的制作。所用培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基，將去皮馬鈴薯200 g切成薄片，加蒸餾水1 000 ml，煮沸30 min，用紗布濾去馬鈴薯，加入葡萄糖20 g和瓊脂粉6.5 g，加熱至瓊膠完全融化，加蒸餾水補(bǔ)足至1 000 ml，然后分裝在三角瓶中，121 ℃滅菌20 min。

1.2.2 含藥培養(yǎng)基的配制。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)篩選的藥劑濃度梯度，用無(wú)菌蒸餾水將藥劑稀釋成所需系列質(zhì)量濃度的10倍，以1∶9的比例與融化的PDA培養(yǎng)基混合均勻，即為配制所需質(zhì)量濃度的含藥培養(yǎng)基。

1.2.3 測(cè)定方法。采用菌絲生長(zhǎng)速率法[6]測(cè)定8種殺菌劑對(duì)芝麻尖孢鐮刀菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用。將芝麻尖孢鐮刀菌在PDA平板上培養(yǎng)7 d后，自菌落邊緣打取菌餅（直徑5 mm），將菌餅接至含藥平板中央，菌絲接觸培養(yǎng)基，每處理重復(fù)3次，28～30 ℃培養(yǎng)，7 d后用十字交叉法測(cè)量各處理的菌落直徑，再減去菌柄直徑0.5 cm，得到最終菌落生長(zhǎng)直徑。計(jì)算抑制率。

抑制率=對(duì)照組菌落平均直徑-處理組菌落平均直徑對(duì)照組菌落平均直徑×100

以藥劑質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，抑菌率幾率值為縱坐標(biāo)，用DPS軟件繪制毒力曲線，求得毒力回歸方程和相關(guān)系數(shù)，計(jì)算EC50，用EC50對(duì)不同殺菌劑的毒力大小進(jìn)行比較[7]。

2 結(jié)果與分析

殺菌劑對(duì)芝麻尖孢鐮刀菌菌絲生長(zhǎng)的室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，供試8種藥劑對(duì)芝麻尖孢鐮刀菌均表現(xiàn)出一定的毒力，但毒力差異較大（表1）。氟硅唑?qū)Σ【囊种谱饔米顝?qiáng)，EC50最小，僅為0.232 mg/L；其次是吡唑醚菌酯，EC50為0.759 mg/L，多菌靈和苯醚甲環(huán)唑?qū)χヂ榧怄哏牭毒灿泻軓?qiáng)的抑制作用。另外，嘧菌酯和甲基硫菌靈也有較好的抑制效果。相比之下福美雙和代森錳鋅的抑制效果較差，EC50分別為30.537和46.594 5 mg/L。

3 討論

芝麻枯萎病是一種頑固性病害，在芝麻整個(gè)生育期均可感染發(fā)病，從根部危害植株，可造成大面積減產(chǎn)，嚴(yán)重時(shí)甚至絕收。植株染病后病原菌在土壤中可存活6年以上，致病力強(qiáng)，寄生范圍廣，是一種較難治理的病害[5]，對(duì)該病最主要的防治措施仍是化學(xué)防治。該試驗(yàn)測(cè)定了8種殺菌劑對(duì)芝麻尖孢鐮刀菌的抑制活性，結(jié)果表明，氟硅唑?qū)χヂ榧怄哏牭毒囊种菩Ч詈?，EC50為0.232 mg/L，吡唑醚菌酯、多菌靈和苯醚甲環(huán)唑也有較好的抑制效果，EC50分別為0.759、1.263 7和 1.779 6 mg/L。但在大田生產(chǎn)中，由于病原物、寄主和環(huán)境之間存在復(fù)雜的關(guān)系，且施藥量較大，因此篩選出的藥劑直接應(yīng)用于芝麻枯萎病的大田防治是否有明顯的防治效果，尚需進(jìn)一步驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)

[1] 黎冬華，王林海，張艷欣，等.芝麻高純度線粒體DNA提取技術(shù)研究[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2011，26（3）：90-94.

[2] 蘇銀玲，苗紅梅，魏利斌，等.芝麻枯萎病病原菌分離和純化方法研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，41（1）：92-95.

[3] 高新國(guó)，孟祥鋒，張春生，等.淮北芝麻枯萎病的發(fā)病規(guī)律及防治對(duì)策[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003（6）：24-25.

[4] 黎冬華，王林海，張艷欣，等.中國(guó)芝麻主產(chǎn)區(qū)枯萎病病原菌生物學(xué)特性分析[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28（3）：245-252.

[5] 王俊芳，王淼，張穎，等.芝麻枯萎病生防細(xì)菌的篩選[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013（19）：72-74.

[6] 孫廣宇，宗兆峰，王建明，等.植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002：142-143.

[7] 張帥，劉穎超，楊太新.不同殺菌劑對(duì)祁山藥炭疽病菌室內(nèi)毒力及田間藥效[J].農(nóng)藥，2013，52（2）：142-144.