DC—CIK細胞治療148例老年惡性腫瘤的療效觀察

耿奇 李秀萍 張平

【摘 要】目的：探討DC-CIK聯(lián)合培養(yǎng)治療不能手術(shù)、不能化療的老年晚期惡性腫瘤患者的臨床療效觀察。方法：觀察148例臨床確診為惡性腫瘤的老年患者的腫瘤標記物、免疫指標和KPS評分的變化。 結(jié)果：DC-CIK治療后，腫瘤標記物CEA和CA125 降低，CD3+、 CD4+、CD8+的指標都有顯著提高（P<0.05），KPS評分不同程度的提高。結(jié)論：DC-CIK細胞治療不能手術(shù)、化療的老年晚期惡性腫瘤患者臨床療效好，改善患者的生活質(zhì)量，提高患者的生存期。

【關(guān)鍵字】免疫治療；樹突狀細胞；CIK；老年人；惡性腫瘤；療效

【中圖分類號】R73 【文獻標識碼】B 【文章編號】1004-7484（2014）02-0565-01

隨著我國人口的老年化，老年惡性腫瘤的發(fā)病率和死亡率逐年上升。大部分老年患者由于年紀、身體狀況和合并各種基礎(chǔ)病等原因而不能化療、手術(shù)等治療。隨著分子生物學(xué)和細胞免疫學(xué)的發(fā)展，生物免疫療法已成為腫瘤治療的重要方法[1]，其中，CIK細胞聯(lián)合DC細胞治療惡性腫瘤，提高患者免疫功能的同時，有協(xié)同抗腫瘤的作用[2]。2011年12月～2012年10月148例晚期惡性腫瘤老年患者在我院接受DC-CIK治療，報告如下：

1 材料與方法

1.1臨床材料

經(jīng)病理學(xué)或細胞學(xué)確診的癌癥患者148例，男性92例，女性56例。肺癌60例，乳腺癌20例，結(jié)腸癌15例，膀胱癌10例，前列腺癌8例，胃癌6例，肝癌5例，食道癌5例，胰腺癌5例，宮頸癌5例，卵巢癌3例，腎癌3例，黑色素瘤3例?；颊呷脒x標準：年齡大于60歲； 病理組織學(xué)、影像學(xué)或細胞學(xué)等檢查確診為腫瘤患者；生活自理，KPS評分標準50分以上；預(yù)計生存期至少大于3個月；簽署知情同意書。

1.2 方法

采外周血：采血前對患者進行血常規(guī)檢查，淋巴細胞與單核細胞的總數(shù)≥1×109/L。如不符合此標準，需采用GM-CSF進行刺激造血系統(tǒng)后，采血量為50-60ml，采血前晚患者進食清淡飲食。

DC-CIK分離與體外誘導(dǎo)：將采集的外周血加入葡聚糖梯度離心進行單個核細胞分離，采用虹吸的方式吸出單個核細胞細胞，用含有自體血清、細胞因子和硫酸慶大霉素的1640培養(yǎng)基懸浮，并轉(zhuǎn)移至75ml的培養(yǎng)瓶內(nèi)，置于37℃的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每2天半量換培養(yǎng)液和觀察生長情況，并取培養(yǎng)液送到檢驗科微生物是進行微生物檢測，若發(fā)現(xiàn)污染立即停止細胞培養(yǎng)，檢測細胞的CD3+、CD4+、CD8+、分子標記表達水平，要求CD3陽性率大于90% ，CD3/CD8大于 60%，臺盼藍染色計算細胞活力大于85% ； 收集DC-CIK 細胞，注入100ml生理鹽水輸液袋中。

DC-CIK回輸：一般采血后的8～14天開始首次回輸，間隔一天，分4次靜脈回輸完畢?；剌斶^程如有不適，及時處理癥狀。

觀察指標：由于部分患者因個人原因致無法了解腫瘤體積變化，主要通過觀察患者的腫瘤標志物、免疫指標、生存質(zhì)量、不良反應(yīng)、臨床癥狀、食欲、體重等判斷療效。其中臨床癥狀、生存質(zhì)量、不良反應(yīng)以患者主訴為依據(jù)。

1.3 免疫學(xué)相關(guān)指標及腫瘤標記物檢測

抽取患者治療前1周和治療結(jié)束3天后的外周血，用流式細胞儀檢測T細胞亞群（包括CD3+、CD4+、CD8+、 CD4+/CD8+），治療前1周、治療后1月檢測腫瘤標記物。

1.4 療效判定

生活質(zhì)量：采用Karnofsky評分標準，提高20分以上為顯效；提高10-20 分為有效；提高10分以下至下降10分以內(nèi)為穩(wěn)定；下降10分以上為惡化。

療效評價：病灶完全緩解（CR），病灶部分緩解（PR），病灶穩(wěn)定（SD），病灶進展（PD）

毒副作用：根據(jù)《急性和亞急性毒性反應(yīng)的表現(xiàn)和分度標（ WHO標準） 評價化療毒副反應(yīng)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)以均值±方差表示，采用SPSS17.0 統(tǒng)計軟件進行均值比較的方差分析，兩兩比較采用t檢驗，概率的比較采用 x2檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)上意義。

2 結(jié)果

2.1 DC-CIK細胞治療前后腫瘤標記物的檢測

檢測148例患者的DC-CIK細胞治療前后的腫瘤標記物癌胚抗原（CEA）和CA125的改變情況：148例中96例下降；39例無變化；13例升高。下降率64.9%

2.2 DC-CIK細胞治療前后免疫系統(tǒng)的影響

148例患者平均接受了細胞回輸，治療后均表現(xiàn)精神狀態(tài)良好，治療前后前后患者免疫系統(tǒng)相關(guān)指標如表2所示，治療前后患者的外周血中CD3 +、CD4+、 CD8+細胞均有明顯的上升（P<0.05）

2.3 治療前后患者療效評估

對148例患者進行回訪，治療后有110例卡式評分提高10-30分，有29例無變化，有9例下降。92例體重增加，占62.2%。說明治療后患者的生活質(zhì)量得以提高和改善，其中，病情部分緩解的有（PR）82例，影像學(xué)檢驗發(fā)現(xiàn)病灶縮小明顯，情況，病情平穩(wěn)（SD）的有42例，沒有新的病灶轉(zhuǎn)移，病情進展（PD）有24例。

2.4生存期： 例患者DC-CIK細胞治療后1年生存期為，2年為。隨訪2年的生存期見表3.

2.5 不良反應(yīng)：148例患者中有18例出現(xiàn)發(fā)熱均在輸后1小時內(nèi)出現(xiàn)，持續(xù)不超過3小時，除有3例體溫達38℃，退熱處理后緩解。其余患者回輸后無不良反應(yīng)。

3 討論

老年腫瘤患者身體機能差、器官功能退化、免疫功能下降，常常同事合并多個系統(tǒng)基礎(chǔ)疾病，導(dǎo)致對手術(shù)、化療等的耐受性差。CIK細胞是細胞因子誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的T淋巴細胞，具有在體外快速增殖、非MHC限制的殺瘤活性，廣泛用于各種抗腫瘤治療[3]。DC細胞是人體功能強大的抗原遞呈細胞，在機體預(yù)防外來病原均感染和腫瘤發(fā)生起重要作用。腫瘤患者體內(nèi)的DC細胞未能發(fā)育成熟能識別抗原但不具有遞呈能力的細胞，所以在體外誘導(dǎo)成熟后回輸給患者，從而啟動抗原遞呈而發(fā)揮免疫效應(yīng)，以防腫瘤細胞的逃逸。

有文獻報道[4] DC細胞和CIK細胞共同培養(yǎng)比CIK單獨培養(yǎng)殺瘤活性更強，且大大縮短培養(yǎng)時間。本研究采用DC細胞和CIK細胞聯(lián)合細胞治療148例老年晚期惡性腫瘤患者，并觀察患者治療前后的腫瘤標記物和免疫系統(tǒng)的變化規(guī)律，分析治療效果，評估期安全性。

從 DC-CIK細胞治療對患者的腫瘤標記物和免疫系統(tǒng)的影響來看，治療前后腫瘤標志物下降64.9%，免疫細胞數(shù)量提高明顯（P<0.05）。免疫球蛋白和相關(guān)細胞因子在免疫系統(tǒng)中也起著重要作用，在免功能變化評估中，本研究沒有進行免疫球蛋白和相關(guān)細胞因子的檢測，在以后的工作中會逐步開展。

通過療效觀察，回訪時患者治療后精神狀態(tài)佳，自我感覺良好。DC-CIK細胞治療后KPS評分提高的患者達到84.3%。綜上所述，DC-CIK細胞聯(lián)合治療惡性腫瘤具有廣泛的應(yīng)用前景，目前，DC-CIK細胞治療已經(jīng)取得較好的臨床治療效果，毒副作用低，安全性好，預(yù)防和減少惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，為一些對手術(shù)、放療、化療已無適應(yīng)癥的患者提供了一種提高免疫功能，緩解和減輕臨床癥狀，改善生活質(zhì)量和延長患者生命的新途徑 [5]。

參考文獻：

[1] DeVita VT. Rosenberg SA. Two hundred years of cancer research[J].N Engl J Med.2012.366（23）：2207-2214

[2] Sangiolo D， Mesiano G， Carneval E-Schianca F， et al . Cytokine induced killer cells as adoptive immunotherapy strategy to augment graft versus tumor after hematopoietic cell transplantation. Expert Opin Biol Ther， 2009， 9： 831–840.

[3] Olioso P， GiancolA R， Di Riti M， et al . Immunotherapy with cytokine induced killer cells in solid and hematopoietic tumours： a pilot clinical trial. Hematol Oncol， 2009， 27： 130–139.

[4] Tao Yang， Ying Xiang， Yucheng Li，et al. Clinical study of co-treatment with DC-CIK cells for advanced solid carcinomas*. J Clinical Oncology（Chinese-German）2011， 10：354–359

[5] Zhong GC， Zhang XY， SunY，et al.Autologous tumor antibody-pulsed dendritic cells combined with cytokine -induced killer cells in the clini-cal treatment of lung adenocarcinoma. Tumor （Chinese）， 2010， 5： 395–400.