藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體和代謝酶聯(lián)合突變對(duì)那格列奈藥效學(xué)的影響

榮麗紅

【摘 要】 目的： 研究藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體SLO1B1 521T>C和藥物代謝酶CYP3A4*18的聯(lián)合突變對(duì)口服降糖藥那格列奈藥效學(xué)的影響。方法 ：對(duì)21名健康志愿者（6位SLCO1B1 521TT/CYP3A4基因型，7位SLCO1B1 521TT / CYP3A4*18基因型，3位SLCO1B1 521TC/CC/CYP3A4基因型，5位SLCO1B1 521TC/ CYP3A4*18基因型）單次口服120mg那格列奈，分別在給藥前和給藥后0.25，0.5，0.75，1，1.5，2，3，4，6，8h采血，用自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行血糖濃度分析。結(jié)果：?jiǎn)我坏腟LO1B1 521T>C多態(tài)和CYP3A4*18多態(tài)對(duì)于那格列奈的降血糖效果與野生型對(duì)照組沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。聯(lián)合突變組在最大血糖升高值，0-4h和0-8h的血糖濃度平均變化值與野生型組不存在顯著差異，但是在最大血糖降低值與野生型對(duì)照組和SLO1B1 521T>C突變組存在顯著差異（P=0.034 P= 0.041）。 結(jié)論：在健康受試者， SLO1B1和CYP3A4聯(lián)合突變對(duì)那格列奈降血糖效果產(chǎn)生顯著影響；但是在2型糖尿病病人中，有關(guān)影響需要進(jìn)一步的研究。

【關(guān)鍵詞】 那格列奈 SLO1B1 CYP3A4，多態(tài)性 血糖濃度

【中圖分類號(hào)】 R917 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A 【文章編號(hào)】 1671-8801（2014）03-0308-02

那格列奈是一種新型的快速胰島素促泌劑[1]，在肝臟可被CYP3A4和CYP2D6.所代謝，但其中CYP3A4的作用較突出[2]。研究表明，CYP3A4具有遺傳多態(tài)性，CYP3A4*18是一種新的突變單倍型，文獻(xiàn)報(bào)道CYP3A4*18基因型者口服那格列奈后，藥物清除率等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)較之于野生型個(gè)體顯著降低；但在一項(xiàng)藥效學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)，服用那格列奈后，雖然CYP3A4*18個(gè)體AUC等藥動(dòng)學(xué)指標(biāo)與野生型存在差異，但血中葡萄糖，胰高血糖素，胰島素水平在CYP3A4不同基因型之間卻沒有顯著差異[3]。有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1B1（OATP1B1， 也稱 OATP-C、OATP2），是攝入型轉(zhuǎn)運(yùn)體中的一大類，可吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)多種內(nèi)源性物質(zhì)和藥物進(jìn)入肝細(xì)胞進(jìn)而代謝和清除之，OATP1B1擁有非常廣泛的底物，包括降糖藥和降脂藥[4]； 該基因具有高度多態(tài)性，其中SLCO1B1 521T>C，也就是 *5， *15 或 *17單倍型，有研究發(fā)現(xiàn)此突變引起那格列奈的血漿濃度顯著升高，這個(gè)結(jié)果揭示OATP1B1介導(dǎo)的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)可能在肝臟對(duì)那格列奈的攝取中發(fā)揮重要作用。

那格列奈最為顯著的效應(yīng)是降低餐后血糖，SLCO1B1是轉(zhuǎn)運(yùn)藥物進(jìn)入肝細(xì)胞的主要載體而CYP3A4是那格列奈的主要代謝酶，藥動(dòng)學(xué)的差異在一定程度上既與這個(gè)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的多態(tài)性表達(dá)有關(guān)也與藥物代謝酶的多態(tài)性有關(guān)[5]，前已述 SLCO1B1 和 CYP3A4多態(tài)性都可以影響那格列奈的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，但是SLCO1B1 521T>C以及SLCO1B1 521T>C與CYP3A4*18的聯(lián)合突變對(duì)那格列奈的療效是否產(chǎn)生影響國內(nèi)目前尚無系統(tǒng)的相關(guān)研究。我們的研究旨在查明SLCO1B1 521T>C ，CYP3A4*18突變以及二者的聯(lián)合突變對(duì)那格列奈的引起的血糖降低在不同基因型個(gè)體是否存在差異。

1 方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

我們對(duì)322名健康志愿者進(jìn)行了SLCO1B1 521T>C ，CYP3A4*18突變基因型的篩查，所有受試者無心、肝、腎、消化道、代謝異常、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等病史，無藥物過敏史，經(jīng)生化和實(shí)驗(yàn)室檢查未發(fā)現(xiàn)異常且在參與臨床試驗(yàn)前均簽署了知情同意書，告知實(shí)驗(yàn)前兩周及實(shí)驗(yàn)期間不能服用其它任何藥物，實(shí)驗(yàn)期間禁煙、酒及含咖啡等飲料。最終21人入選進(jìn)入臨床藥效學(xué)研究?；蚪MDNA提取采用標(biāo)準(zhǔn)酚-氯仿法，SLCO1B1 521T>C ，CYP3A4*18多態(tài)性的基因分型采用ARMS-PCR和PCR-RFLP（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性）方法。SLCO1B1 521TT/CYP3A46人， SLCO1B1 521TT/ CYP3A4*18 7人， SLCO1B1 521TC/CC/CYP3A4 （521TC， 521CC）3人， SLCO1B1 521TC/CYP3A4*18 5人?？崭?2小時(shí)后，單次給與120mg那格列奈，100ml溫水送服，15分鐘后，所有受試者統(tǒng)一給標(biāo)準(zhǔn)餐，10分鐘后進(jìn)餐完畢，告知靜坐3小時(shí)45分鐘，之后再給標(biāo)準(zhǔn)餐；分別在給藥即刻、0.25、0.75、 1、 1.5、 2、3、 4、 6、 8小時(shí)抽取5 mL血樣，用自動(dòng)生化分析儀（東京日立公司7170S）進(jìn)行血糖濃度分析。

1.2 藥效學(xué)分析

那格列奈的藥效學(xué)以血糖平均值，最大血糖升高值和最大血糖降低值表示，均值改變由時(shí)間濃度曲線中按照相應(yīng)的間隔劃分曲線下凈面積獲得。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

表中所列數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。所有數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS11.0軟件進(jìn)行分析。不同基因型者藥效學(xué)差異采用兩兩比較單因素方差分析。P < 0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

入選受試者基本情況 .每個(gè)基因型組間在年齡，身高，體重，肥胖指數(shù)等方面無差異，我們發(fā)現(xiàn)，SLCO1B1，CYP3A4單個(gè)突變對(duì)那格列奈引起的血糖降低值無顯著影響，（表1）.聯(lián)合突變可以引起血糖的明顯改變（表2）在四種聯(lián)合突變基因型個(gè)體中，最大血糖升高值和均值改變未發(fā)現(xiàn)明顯差異。

3 討論

2型糖尿病的發(fā)病機(jī)制被認(rèn)為與胰島素抵抗，胰島素分泌機(jī)制損傷以及肝糖輸出量增加有關(guān)。2型糖尿病的進(jìn)展和餐后糖代謝調(diào)節(jié)失靈密切相關(guān)，新型的胰島B細(xì)胞分泌激動(dòng)劑，包括那格列奈，近年來已經(jīng)逐漸成為治療2型糖尿病的有效藥物，無論是餐中還是餐后服用都可有效增加胰島素的分泌，從而降低餐后血糖。SLCO1B1多態(tài)性與那格列奈的藥動(dòng)學(xué)密切相關(guān)，那么SLCO1B1 和 CYP3A4突變就可能共同成為那格列奈體內(nèi)血藥濃度的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子[6]，所以在本研究中，我們把視角轉(zhuǎn)向SLCO1B1 和 CYP3A4的聯(lián)合突變，探討這些變異是否會(huì)影響那格列奈的藥效學(xué)如血糖降低等作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，口服那格列奈后，單一的SLCO1B1 521T>C和CYP3A4*18突變都不能改變血糖降低水平，最大血糖升高值和均值改變?cè)谒姆N聯(lián)合突變的不同基因型個(gè)體間沒有差異，但是聯(lián)合突變組的最大血糖降低值與野生型對(duì)照組和SLO1B1 521T>C突變組存在顯著差異（P=0.034 ，P=0.041）。本研究提示在臨床用藥過程中，聯(lián)合突變基因型個(gè)體服用那格列奈后，最大血糖降低值偏高，尤其是SLCO1B1 521TC/CYP3A4*18 基因型個(gè)體血糖降低幅值較大，因此發(fā)生低血糖反應(yīng)的機(jī)會(huì)可能與其他基因型者存在差異，應(yīng)該給與足夠重視。

參考文獻(xiàn)

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[3]Niemi M， Backman JT， Kajosaari LI， et al. Polymorphic organic anion transporting polypeptide 1B1 is a major determinant of repaglinide pharmacokinetics. Clin Pharmacol Ther， 2008， 77（6）：468-478.

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