前列地爾對急性腦梗死患者血小板活性的影響

李青山 李惠娟

【摘 要】通過觀察前列地爾對急性腦梗死患者血小板a顆粒膜蛋白（GMP-140）、P-選擇素（CD62p）和溶酶體蛋白（CD63）水平的影響，探討了前列地爾對血小板活化功能的抑制作用。從而證實前列地爾能夠降低急性腦梗死患者血漿中的GMP-140、CD62p和CD63水平，具有抑制血小板活化作用和促進腦神經(jīng)功能恢復的作用。

【關(guān)鍵詞】前列地爾；腦梗死；血小板a顆粒膜蛋白；P-選擇素；溶酶體蛋白

【中圖分類號】R743.34 【文獻標識碼】B 【文章編號】1004-7484（2014）04-2381-02

近年來，中國老年人口正迅速增加，伴隨著的腦血管疾病也愈來愈多，且不斷年輕化。在我國卒中年發(fā)病率為150/10萬，死亡率為120/10萬。前列地爾（PGE4）是一種具有廣泛生物活性的內(nèi)源性物質(zhì)，是多不飽和脂肪酸二高r-亞油脂肪酸的氧化產(chǎn)物。PGE4具有抑制血小板聚集，減少血栓素A2（TXA2）合成的作用，能改善PGI2/TXA2的比值。臨床試驗已證實，在腦梗死的治療上，有著非常積極的療效。本文旨在觀察PGE4對急性腦梗死患者血漿血小板a顆粒膜蛋白（GMP-140）、P-選擇素（CD62p）和溶酶體蛋白（CD63）水平的影響，以探討PGE4對血小板活化功能的影響。

1 對象和方法

1.1對象

2012年1月-2013年10月發(fā)病6～72h內(nèi)的急性腦梗死住院患者66例，其中男性46例，女性20例，年齡45～83歲，中位年齡64歲。所有患者均符合中華醫(yī)學會第四次全國腦血管病學術(shù)會議修訂的急性腦梗死診斷標準，并經(jīng)頭顱CT或MRI掃描證實。每例患者均進行頸動脈超聲、經(jīng)顱多普勒（TCD）、心電圖、心臟超聲、血脂、血小板計數(shù)等檢查。記錄心血管病家族史、高血壓、高脂血癥、糖尿病、冠心病、頸動脈狹窄、心房顫動、心臟瓣膜病、周圍血管病、吸煙和飲酒等情況。所有患者入組時進行美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表評分（NIHSS）。入院后隨機分為前列地爾組和常規(guī)治療組。選擇40例健康體檢者作為正常對照組，其中男性25例，女性15例，年齡43～72歲。治療組與對照組之間的性別、年齡、血管危險因素（家族史、冠心病、糖尿病等）、血壓、血脂、血小板計數(shù)和NIHSS評分均無顯著差異（P﹥0.05）、具有可比性。

1.2治療方法

常規(guī)治療組均給予脫水、他汀類降脂藥、營養(yǎng)腦細胞等基礎(chǔ)治療；前列地爾組在此基礎(chǔ)上應用前列地爾注射液（本溪恒康制藥有限公司生產(chǎn)的脂微球載體制劑）20ūg加入0.9%生理鹽水100ml，靜脈滴注，治療2周。

1.3觀察指標

所有患者在住院后第2天和治療2周后，清晨抽取空腹靜脈血2ml，用5%EDTA-Na2抗凝（1：9）備檢。GMP-140的檢測采用免疲吸附雙抗體夾心法，用酶標儀進行檢測。CD62p和CD63的檢測：取EDTA抗凝血100ūl，用多聚甲醛固定10min，PBS洗滌后加入20ūl CD62p或CD63熒光標記單抗，室溫溫育15min，加Optilyse-C 500ūl溶血10min，加PBS 1000ūl混勻，放置10min，2000r/min離心、沉淀，再用500ūl PBS重懸后用流式細胞儀進行檢測。

腦梗死患者入院時和治療后2周分別進行NIHSS評分。

1.4統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學分析，所有資料均進行正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗，組間比較采用方差分析及協(xié)方差分析，兩兩比較采用SNKq檢驗；組內(nèi)比較采用配對t檢驗。其他相關(guān)的統(tǒng)計學方法包括相關(guān)分析。檢驗水準a=0.05。

2 結(jié)果

2.1 急性腦梗死患者與正常對照組血漿GMP-140、CD62p和CD63水平比較

急性腦梗死患者血漿GMP-140、CD62p和CD63水平顯著高于正常對照組（P<0.001、表1）。校正性別、年齡、血管危險因素（家族史、冠心病、糖尿病等）、血壓、血脂、血小板計數(shù)后行協(xié)方差分析，差異仍有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.001）。NIHSS評分與血漿GMP-140、CD62p和CD63呈直線相關(guān)（r分別為0.898、0.886和0.824、P<0.01）。

2.2 PGE4治療組與常規(guī)治療組治療前后血漿GMP-140、CD62p和CD63含量變化比較

PGE4組血漿GMP-140、CD62p和CD63水平均較治療前顯著下降（P<0.05），而常規(guī)治療組前后無顯著變化；PGE4組合常規(guī)治療組治療后NIHSS評分明顯高于治療前（P<0.05），且PGE4組優(yōu)于常規(guī)治療組（P<0.05）（表2）。

兩組均無任何嚴重不良反應發(fā)生。

3 討論

腦動脈粥樣硬化斑塊的破裂以及隨后的血小板活性和血栓形成在腦梗死的發(fā)生過程中起著重要作用，而GMP-140、CD62p和CD63是血小板活化因子，是迄今所知反映血小板活化和釋放反應最特異的標志物，在血栓塞事件中起中心環(huán)節(jié)作用。這些指標在一定程度上能夠反映腦梗死患者的血小板活化狀態(tài)。本研究同時檢測這3種特異性血小板活化標志物，結(jié)果顯示腦梗死患者的血漿GMP-140、CD62p和CD63均顯著高于正常對照組（P<0.001）、而且其水平與神經(jīng)功能缺損程度（ESS評分）呈線性相關(guān)，說明血小板活化在腦梗死的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。

本研究還發(fā)現(xiàn)，腦梗死患者經(jīng)PGE4治療半月后，其血漿GMP-140、CD62p和CD63水平均較治療前顯著下降（P<0.05）。血漿GMP-140含量能夠特異性地反映血小板活化和破壞的程度。PGE4組在治療后的血漿GMP-140水平顯著低于常規(guī)治療組，說明PGE4具有較好的降低血漿GMP-140的作用、其抗血小板激活作用對于急性缺血性卒中有較好的治療效果，并且可以減少復發(fā)風險。CD62p具有介導血小板活化或內(nèi)皮細胞與中性粒細胞和單核細胞黏附的功能，CD63為血小板溶酶體膜糖蛋白，其生物學功能與信號傳遞和血小板活化有關(guān)。在正常情況下，CD62p和CD63處于靜息狀態(tài)，當出現(xiàn)血小板活化因子等刺激因素時，a顆粒膜糖蛋白和溶酶體膜糖蛋白與血小板膜融合，從而在血小板表面表達CD62p和CD63。本研究證實，在急性腦梗死患者早期積極應用PGE4治療能夠使患者的血漿CD62p和CD63水平顯著下降，證實PGE4能激活血小板膜內(nèi)腺苷酸環(huán)化酶，使血小板CAMP含量升高，從而抑制TXA2的釋放；通過抑制血管平滑肌細胞的游離Ca2+，抑制血管交感神經(jīng)釋放去甲腎上腺素，使血管平滑肌細胞舒張，可擴張顱內(nèi)血管；通過保護動脈內(nèi)膜屏障，抑制血管平滑肌細胞增生降低炎性反應，提高動脈內(nèi)CAMP水平，從而達到抑制動脈粥樣硬化斑塊形成和血栓形成的目的。

在治療半月后，PGE4組合常規(guī)治療組NIHSS評分均顯著高于治療前（P<0.05）、且PGE4組要高于常規(guī)治療組（P<0.05），提示PGE4能夠更好地促進腦梗死患者的神經(jīng)功能恢復。

綜上所述，PGE4能夠抑制血小板活化作用，是其治療腦梗死的作用機制之一，起到保護腦梗死組織和促進神經(jīng)功能恢復的作用，應用PGE4治療急性腦梗死有較好的應用前景。