喉鱗癌患者血漿MMP— 9及VEGF—C 檢測的臨床意義

許大巍

【摘 要】目的：探討喉鱗癌病人血清中基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）和血管內(nèi)皮生長因子一C （VEGF-C）的檢測的價值。方法：選取經(jīng)病理切片證實的喉鱗癌病人82例， 良性喉部病變組70例， 健康人血清45例， 空腹抽取靜脈血3ml檢測MMP-9和VEGF-C， 并探討兩者與喉鱗癌生物學(xué)特性的關(guān)系。結(jié)果：MMP- 9水平對照組、良性組和惡性組相比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（ P< 0. 05），VEGF-C水平對照組、良性組和惡性組比較均有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義（ P< 0. 05），MMP-9 表達與VEGF 表達之間存在正相關(guān)，（r=0.512，P< 0. 05）。結(jié)論：MMP- 9及VEGF均在喉鱗癌的表達有較高的敏感性， 兩者對喉癌的分期， 轉(zhuǎn)移及預(yù)后有較密切的聯(lián)系。有可能成為喉癌診斷治療的生物學(xué)指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】喉腫瘤；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；血管內(nèi)皮生長因子-C

【中圖分類號】R739.65 【文獻標(biāo)識碼】B 【文章編號】1004-7484（2014）04-2138-02

喉癌是一種惡性腫瘤，喉癌發(fā)病率約占全身腫瘤的1～5%，最常見的喉癌為喉鱗狀細(xì)胞癌， 約占95%～98%， 喉癌發(fā)生的確切機理、侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機制還不十分清楚。目前普遍認(rèn)為細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜是惡性腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移的重要組織屏障?；|(zhì)金屬蛋白酶- 9 （matrix metalloprote inase- 9，MMP- 9）是基質(zhì)金屬蛋白酶中的一員， 能降解基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)的大部分成分， 而參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性的肝素結(jié)合生長因子（heparin-binding growth factor），可在體內(nèi)誘導(dǎo)血管新生，對腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移起重要作用，可作為腫瘤代謝及轉(zhuǎn)移的標(biāo)志物。

1 對象和方法

1.1 對象： 2011年11月至2013年10月在山西省人民醫(yī)院耳鼻喉科住院治療的喉鱗癌病人82例，年齡35～78歲，平均年齡57.1歲；良性喉部病變患者組70例， 年齡為31～75歲，平均年齡55.2歲。對照組：45例，為同期健康體檢者，年齡30～82歲，平均年齡56.2歲。三組在年齡性別等方面均無統(tǒng)計學(xué)差異（ P> 0. 05）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本收集： 空腹采集靜脈血3ml， 于3000 r/min 離心15min，取血清置放于- 80℃低溫冰箱中保存。采用ELISA 法檢測血漿標(biāo)本中MMP-9 和VEGF-C。ELISA方法檢測，試劑盒為美國R &B 公司原裝進口試劑， 嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明進行操作。

1.2.2 統(tǒng)計學(xué)處理： 采用SPSS12. 0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理， 參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x ±s） 表示， 采用t 檢驗進行統(tǒng)計學(xué)處理， P< 0. 05為有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 各組MMP- 9和VEGF-C的表達

MMP- 9水平：惡性組（123.15±51.76）ng /ml， 良性組（75.81±18.21）對照組（74.13±14.84）ng/ml，良性組、對照組和惡性組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0. 05）。VEGF-C水平： 惡性組（324.5±71.76） pg /ml， 良性組（110.2±21.56） pg /ml， 對照組（108.4±19.77） pg /ml；良性組、對照組和惡性組比較均有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義（ P< 0. 05）

2.2 喉鱗癌患者血清MMP-9和VEGF-C水平進行相關(guān)性分析 結(jié)果顯示呈正相關(guān)（ r = 0. 522、P < 0. 05） ，說明隨喉鱗癌患者血清MMP-9水平的升高，VEGF-C水平也隨之增高。

3 討論

喉鱗癌的發(fā)生發(fā)展是多因素、多階段的復(fù)雜過程， 涉及多個基因和多種分子水平變化。喉癌發(fā)病率有明顯的增長趨勢，其原因可能與空氣污染的加重、吸煙、某些職業(yè)的長期接觸致癌物質(zhì)有關(guān)，這與喉癌的發(fā)病率城市高于農(nóng)村，空氣污染重的重工業(yè)城市高于污染輕的輕工業(yè)城市相符合。喉部惡性腫瘤中最常見的是鱗狀細(xì)胞癌。腫瘤細(xì)胞的浸入與轉(zhuǎn)移首先發(fā)生基膜的降解，在這個過程中MMP-9發(fā)揮了重要作用。近年來一些研究表明許多惡性腫瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生MMP-9，通過旁分泌作用于癌基質(zhì)，破壞腫瘤細(xì)胞侵襲的組織學(xué)屏障，在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的一系列過程中，基質(zhì)金屬蛋白酶起到了重要的作用。惡性腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移是一個復(fù)雜的病理生理過程，MMP-9 在頭頸部腫瘤中呈現(xiàn)過度表達，MMP-9 過度表達是喉鱗癌中最有意義的腫瘤標(biāo)志物[1]。本研究發(fā)現(xiàn)，MMP-9水平分別在惡性組的表達均高于良性組及正常對照組， 比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（ P< 0. 05）。與已往研究相類似， MMP-9的表達與喉癌的生存密切相關(guān)， 表明MMP-9有可能成為喉癌預(yù)后的新的生物學(xué)指標(biāo)。

腫瘤生長必須依賴血管生成，若沒有新生血管長入，一個腫瘤克隆灶不會超過2mm。VEGF-C是最重要的血管生成因子，可作為腫瘤代謝及轉(zhuǎn)移的標(biāo)志物[2]。VEGF一C于1996年被分離純化，是一種特異的血管、淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)因子。VEGF能直接刺激腫瘤血管的增生，并可增加血管的通透性， 促進腫瘤細(xì)胞的滲出和轉(zhuǎn)移灶的形成[3]。人類VEGF一C基因定位于染色體4q34，分子量21 KD，近年來的研究表明，VEGF一C在人類多種腫瘤中表達。本文研究顯示， 喉鱗癌患者血清VEGF-C水平顯著高于喉部良性腫瘤組和對照組，比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（ P< 0. 05）。Kim 等[4]利用抗VEGF抗體成功抑制了裸鼠的一些腫瘤細(xì)胞系生長的實驗成果進一步證實VEGF-C在惡性腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移中的作用。

本實驗還發(fā)現(xiàn)， 在喉鱗癌組織中MMP-9與VEGF-C含量呈正相關(guān)。與Riedel 等[5]研究的喉癌與肺癌中VEGF-C與MMP-9的水平相一致，推測VEGF能促進喉癌浸潤轉(zhuǎn)移的機制之一可能是VEGF 上調(diào)喉癌細(xì)胞MMP-9 的表達；MMP-9可通過釋放VEGF以參與血管生成。說明MMP- 9及VEFG-C在喉鱗癌組織中表達上調(diào)，作為喉鱗癌發(fā)生發(fā)展諸多因素中的敏感指標(biāo)，兩者對喉癌的分期， 臨床生物學(xué)特征的判斷， 轉(zhuǎn)移及預(yù)后有較密切的聯(lián)系， 聯(lián)合檢測MMP-9和VEFG-C可能對判斷喉鱗癌的分期、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有重要價值。

參考文獻：

[1] 葛明華，谷志遠(yuǎn)， 徐曉紅等. 頭頸部粘膜鱗狀細(xì)胞癌患者血清血管內(nèi)皮生長因子[J]. 現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志，2003，17（6）：507-508.

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[4] Kim KJ， Winer J， Armanini M， et al. Inhibit ion of vascular -endothelial - growth - fact or - induced angiogenesis suppresses tumour growth in vivo. Nature（ Lond ） ， 1993， 362 （ 6423 ） ： 841 -844.

[5] Riedel F， Gotte K， Schwald J， et al. Expression of 92-kDa type Ⅳ collagenase correlates with angiogenic markers and poor survival in head and neck squamous cell carcinoma [J]. Int J Oncol，2000，17：1099-1105.