那如八味丸質(zhì)量控制研究

喜 杰，白翠蘭，海銀梅

(內(nèi)蒙古民族大學(xué) 蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

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那如八味丸質(zhì)量控制研究

喜 杰，白翠蘭*，海銀梅

(內(nèi)蒙古民族大學(xué) 蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

目的：研究那如八味丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用TLC法、理化鑒別和顯微鑒別法對(duì)蒙藥那如八味丸中蓽茇、草烏、訶子、蓮子、白豆蔻五味藥材進(jìn)行定性鑒別。結(jié)果：訶子、蓽茇、制草烏的薄層色譜特征顯著，具有專屬性，重現(xiàn)性好；理化鑒別中蓽茇、蓮子、訶子特征顯著，具有專屬性，重現(xiàn)性好；顯微鑒別中訶子、蓽茇、蓮子、白豆蔻特征顯著，具有專屬性，重現(xiàn)性好。結(jié)論：那如八味丸中五味藥材的鑒別結(jié)果穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，其它藥材尚未發(fā)現(xiàn)質(zhì)量控制指標(biāo)。

那如八味丸；TLC；理化鑒別；顯微鑒別

那如八味丸是《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中收錄的蒙醫(yī)臨床常用蒙成藥，由蓽茇、制草烏、訶子、大托葉云石、芒果核、蓮子、石決明、白豆蔻八味藥材組成[1]，具有殺粘、祛巴達(dá)干寒之功效，主要用于胃火下衰、巴達(dá)干寒導(dǎo)致的腎氣虛、腎寒等[2]。為了有效控制該制劑質(zhì)量，保證其臨床藥效，本文采用TLC、理化鑒別和顯微鑒別法對(duì)那如八味丸進(jìn)行定性鑒別研究，為其質(zhì)量控制方法和評(píng)價(jià)指標(biāo)選擇提供有效依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器與設(shè)備

AUY120型電子天平、HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋、DL-360A型超聲波清洗器、Nikon生物顯微鏡(南京江南永新光學(xué)有限公司)、DHG-9240A 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、WS70-1型紅外線快速干燥器、ZF-1型三用紫外分析儀、98-1-B型電子調(diào)溫電熱套、玻璃干燥器。

1.2 藥品與試劑

蒙成藥那如八味丸分別由內(nèi)蒙古庫倫蒙藥廠(批號(hào)：090418)、內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院(100615)及內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院蒙藥制劑實(shí)驗(yàn)室提供(100512)；蓽茇、制草烏、訶子、大托葉云石、芒果核、蓮子、石決明、白豆蔻八味藥材分別由內(nèi)蒙古庫倫蒙藥廠、內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院、內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院蒙藥制劑實(shí)驗(yàn)室提供；制草烏對(duì)照藥材、訶子對(duì)照藥材和蓽茇對(duì)照藥材由中國食品藥品鑒定研究院提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 那如八味丸粉末顯微鑒別

取本品2g，研細(xì)，過篩，置于顯微鏡下觀察[3]。白豆蔻的顯微特征：內(nèi)種皮杯狀細(xì)胞成片，紅棕色，表面觀多角形，直徑7～23μm，壁厚非木化，胞腔內(nèi)含硅質(zhì)塊，直徑5～16μm(見圖1)。訶子的顯微特征：石細(xì)胞成群、淡黃色，呈類圓形、長卵形、長方形，孔溝細(xì)密而清晰，不規(guī)則(見圖2)。蓽茇的顯微特征：外胚乳細(xì)胞充滿由細(xì)小淀粉集成的淀粉團(tuán)，直徑約13～22μm，長25～47μm，淀粉粒為多角形，直徑約2～6μm，顯微淡黃色，粗細(xì)長短不一(見圖3～圖4)。蓮子的顯微特征：氣孔存在于種皮碎片中，圓形或長圓形，直徑36～68μm，保衛(wèi)細(xì)胞新月形，氣孔口甚大，直徑14～43μm，副衛(wèi)細(xì)胞4～7個(gè),色素層細(xì)胞黃棕色或紅棕色，表面觀呈類方形、長方形、類多角形，垂周壁略呈齒輪狀，腔內(nèi)含黃棕色物，偶含草酸鈣簇晶(見圖5)。

2.2 那如八味丸中三味藥材理化鑒別

2.2.1 訶子理化鑒別 分別取內(nèi)蒙古庫倫蒙藥廠、內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院蒙藥制劑室和內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院蒙藥制劑實(shí)驗(yàn)室提供的訶子粉末及那如八味丸成藥粉末1.0g，置于不同蒸發(fā)皿中，各加蒸餾水10mL，放置3h。在三家訶子粉末水溶液中分別加入1滴FeCl3，即刻出現(xiàn)藍(lán)色沉淀；在三家那如八味丸粉末水溶液中加入1滴FeCl3，同樣即刻出現(xiàn)藍(lán)色沉淀。此實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象說明三家提供的那如八味丸粉末中均含有訶子成分。

2.2.2 蓽茇理化鑒別[4]分別取內(nèi)蒙古庫倫蒙藥廠、內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院蒙藥制劑室和內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院蒙藥制劑實(shí)驗(yàn)室的蓽茇粉末少量，置于3個(gè)不同蒸發(fā)皿中，各加硫酸1滴，初顯鮮紅色，漸漸變?yōu)榧t棕色，后轉(zhuǎn)為棕褐色。再取上述3個(gè)不同廠家的那如八味丸粉末，加硫酸1滴，顯紅棕色，漸漸變?yōu)樽睾稚?，?shí)驗(yàn)現(xiàn)象說明那如八味丸粉末均含有蓽茇成分。

2.2.3 蓮子理化鑒別 取內(nèi)蒙古庫倫蒙藥廠那如八味丸粉末少許，加水適量，混勻，加碘試液數(shù)滴，顯藍(lán)紫色，放于水浴鍋上加熱，在溫度達(dá)到83℃時(shí)，逐漸褪色，放冷，藍(lán)紫色復(fù)現(xiàn)但顏色較淺。同法分別取內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院蒙藥制劑室和內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院蒙藥制劑實(shí)驗(yàn)室提供的那如八味丸粉末少許，加水適量，混勻，再加碘試液數(shù)滴，均顯藍(lán)紫色，放水浴鍋上加熱，均在溫度達(dá)到94℃時(shí)，逐漸褪色，放冷，藍(lán)紫色復(fù)現(xiàn)但顏色較淺，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象表明三家提供的那如八味丸粉末中含有少量蓮子成分。

2.3 那如八味丸中四味藥材薄層層析結(jié)果

2.3.1 訶子薄層鑒別 供試品溶液制備：取訶子粉末0.5g，加無水乙醇30mL，加熱回流30min，得提取液，作為訶子供試品溶液。

對(duì)照品溶液制備：另取訶子對(duì)照藥材粉末0.5g，同法制備對(duì)照藥材溶液，薄層條件及結(jié)果見圖6。

2.3.2 制草烏薄層鑒別[5]供試品溶液制備：取制草烏粉末0.5g，加氨試液0.5mL潤濕，加入乙醚5mL，超聲處理30min，濾過，低溫回收溶劑至干，殘?jiān)佣燃淄?mL溶解，作為供試品溶液。

對(duì)照品溶液制備：另取苯甲酰次烏頭原堿對(duì)照品適量，加異丙醇-三氯甲烷(1∶1)溶液溶解并制成每1mL含1mg樣品的溶液，作為對(duì)照品溶液。薄層條件及結(jié)果見圖7。

2.3.3 蓽茇薄層鑒別[6]供試品溶液制備：取蓽茇粉末0.8g，加無水乙醇5mL，超聲處理30min，濾過，濾液作為供試品溶液。

對(duì)照品溶液制備：另取胡椒堿對(duì)照品適量，置于棕色量瓶中，加無水乙醇制成每1mL含4mg樣品的溶液，作為對(duì)照品溶液。薄層條件及結(jié)果見圖8。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)成功建立了那如八味丸中訶子、蓽茇、制草烏、蓮子四味藥材的薄層鑒別方法，蓽茇、訶子、蓮子三味藥材的理化鑒別方法，蓮子、白豆蔻、蓽茇、訶子四味藥材的顯微鏡鑒別方法。那如八味丸的組成藥材中，以白豆蔻、訶子、蓽茇、蓮子四味藥材的顯微特征較明顯，鏡檢率較高，可作為顯微定性特征；對(duì)其三種組成藥材進(jìn)行薄層鑒別，將單味藥材、成藥與生物標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)藥材的圖譜進(jìn)行比較，若與標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)準(zhǔn)藥材在同一位置出現(xiàn)同樣的斑點(diǎn)即可確定為同種物質(zhì)，從而為該制劑的質(zhì)量控制提供有效依據(jù)。

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[M].一部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:59.

[2] 巴根那.蒙醫(yī)方劑學(xué)[M]. 呼和浩特:內(nèi)蒙古人民出版社,2007:360.

[3] 辛楊,王淑敏,劉志強(qiáng),等.蒙藥那如三味丸中胡椒堿的含量測(cè)定[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2009,20(8):1881-1882.

[4] 聶超,張蕾,柯世懷.畢茇化學(xué)成分與提取方法及主要作用研究[J].實(shí)用中醫(yī)藥雜志,2008(12):809-810.

[5] 李路娥,羅群,王躍華,等.烏頭堿檢測(cè)方法綜述[J].成都大學(xué)學(xué)報(bào),2005(3):15-17.

[6] 李方,曹陽,張清波.高效液相色譜法測(cè)定畢茇中胡椒堿的含量[J].中醫(yī)藥信息,2010,27(2):21-22.

(責(zé)任編輯：尹晨茹)

2013-12-24

喜杰(1981-)，女，內(nèi)蒙古民族大學(xué)講師，研究方向?yàn)橹形麽t(yī)結(jié)合基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)。

R284.1

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1673-2197(2014)08-0014-02