薄層掃描法測定瘟清顆粒劑中黃芩苷含量

孔 翔，孔徐生，歐荔枝，雷江凌

(深圳市嘉軒醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司，廣東 深圳 518057)

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薄層掃描法測定瘟清顆粒劑中黃芩苷含量

孔 翔，孔徐生，歐荔枝，雷江凌

(深圳市嘉軒醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司，廣東 深圳 518057)

目的：測定瘟清顆粒劑中黃芩苷含量，建立瘟清顆粒劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用雙波長薄層掃描法，以36%醋酸作展開劑，檢測波長 S=280nm；參比波長 R=250nm。結(jié)果：黃芩苷點(diǎn)樣量(X)在0.75～2.60μg范圍內(nèi)與峰面積積分值(Y)呈良好的線性關(guān)系，r=0.998 5，平均回收率為99.05%，RSD=0.95% (n=5)。結(jié)論：該方法準(zhǔn)確、簡便，可用于瘟清顆粒劑中黃芩苷含量的測定。

瘟清顆粒劑；黃芩苷；雙波長掃描法

瘟清顆粒劑系由黃芩、黃連、黃柏、梔子、川芎等八味中藥制成的復(fù)方制劑，對(duì)抑郁癥等有較好的療效[1],其中黃芩為君藥，有效成分為黃芩苷。為了有效控制該制劑質(zhì)量，本文采用雙波長薄層掃描法對(duì)其中的有效成分黃芩苷進(jìn)行含量測定，效果滿意，可作為其質(zhì)量控制方法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器、試劑與藥物

CS-930型薄層掃描儀(日本島津)；定量毛細(xì)管(美國Drummond)；紫外分析儀UV-1型(上海電光儀器廠) 。

聚酰胺薄膜(浙江黃巖四青生化材料廠)；黃芩苷對(duì)照品(中國食品藥品檢定研究院)；所用試劑均為分析純；瘟清顆粒劑為本公司自制。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)照品溶液制備

精密稱取黃芩苷對(duì)照品適量，加50%乙醇制成0.10mg/mL的對(duì)照品溶液，即得。

2.2 供試品溶液制備

精密稱取瘟清顆粒2g，用50%乙醇回流提取至提取液無色，濃縮后定容于50mL容量瓶中，備用。

2.3 陰性對(duì)照品溶液制備

按處方比例稱取除黃芩外的其它藥材，按照“2.2”項(xiàng)下方法制備陰性對(duì)照溶液，備用。

3 方法

3.1 薄層定性

精密吸取對(duì)照液、供試液和陰性對(duì)照液各2μL，分別點(diǎn)樣于同一聚酰胺膜(15cm×15cm)上，以36%醋酸為展開劑，展距為10cm，溶劑揮干后，在紫外燈(365nm)下檢視，供試品溶液和對(duì)照品溶液在相應(yīng)位置上具有相應(yīng)特征的斑點(diǎn)顯示，而陰性對(duì)照品溶液在相應(yīng)位置上無特征斑點(diǎn)顯示。薄層色譜見圖1。

圖1 以黃芩苷為對(duì)照品的TLC色譜

3.2 掃描結(jié)果

對(duì)黃芩苷特征斑點(diǎn)進(jìn)行光譜掃描，結(jié)果表明其在280nm波長處有最大吸收，而在350nm波長處吸收最少，故采用 S=280nm，參比波長R=250nm，雙波長鋸齒掃描，寬度為100mm。

3.3 線性關(guān)系考察

精密吸取黃芩苷對(duì)照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μL，點(diǎn)樣于同一聚酰胺薄膜上，按上述條件展開，掃描測定。結(jié)果表明，黃芩苷點(diǎn)樣量(X)在0.75～2.60μg范圍內(nèi)與峰面積積分值(Y)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為：

Y= 8 564.6X+364.7，r = 0.998 5

3.4 精密度試驗(yàn)

精密吸取黃芩苷對(duì)照品溶液2μL，在同一聚酰胺薄膜上依次點(diǎn)樣5次，按上述條件展開，測定峰面積積分值，RSD=1.78%，表明該方法精密度良好。

3.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取黃芩苷對(duì)照品溶液2μL，點(diǎn)于聚酰胺薄膜上，按上述條件展開，掃描測定斑點(diǎn)峰面積，每隔30min 測定1次，連續(xù)5次，其峰面積積分值在2h內(nèi)變化不大(RSD=1.86%，n=5)，表明測定樣品在2h內(nèi)穩(wěn)定，測定結(jié)果可靠。

3.6 回收率試驗(yàn)

精密稱取黃芩苷對(duì)照品適量，加入已知黃芩苷含量的供試品中，依法制備供試品溶液，按上述條件進(jìn)行測定，結(jié)果測得黃芩苷的平均回收率為99.05%(n=5)，該方法回收率符合要求。

3.7 供試品含量測定

精密吸取供試品溶液4μL、黃芩苷對(duì)照品溶液1μL和2μL，分別交叉點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，按上述條件展開，掃描測定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算黃芩苷含量，測定結(jié)果見表1。

表1 瘟清顆粒劑中黃芩苷含量測定結(jié)果 (mg/mL)

4 討論

本文采用聚酰胺薄膜為點(diǎn)樣板材料，采用雙波長薄層掃描法對(duì)黃芩苷含量進(jìn)行測定，方中黃芩苷與其他成分分離效果較好，不需要特殊處理將目標(biāo)測定成分與干擾成分完全分離[2]。該法具有簡便、快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，可作為測定瘟清顆粒劑中黃芩苷含量的方法，用于控制該制劑的質(zhì)量。

[1] 范卓文.薄層掃描法測定清熱咳喘寧沖劑中黃芩苷的含量[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),1996,24(2):48.

[2] 李振國.薄層掃描法測定太子咽喉凈口服液中黃芩苷的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,1998,4(6):11.

(責(zé)任編輯：尹晨茹)

Determination of Baicalin in Wenqing Granules by TLCS

Kong Xiang, Kong Xusheng, Ou Lizhi, Lei Jiangling

(Shenzhen Jiaxuan Pharma Technology Co.ltd,Guangdong,Shenzhen 518057,China)

Objective:To establish a method for determining baicalin in Wenqing granules.Methods:The content of was determined by dual-wavelength TLC-Scanning method with 280nm and 265nm as the detectin and reference wavelength respectively while 36% acetic acid as developer.Results:The linear range of baicalin was 0.75～2.60μg. The average recovery was 99.05% (RSD = 0.95%,n=5) with good linear relationship (r=0.998 5). Conclusion:The method is simple and accurate, which can be used for the quality control of Wenqing granules.

Wenqing Granules;Baicalin;Dual-wavelength TLC-Scanning Method

2013-12-24

孔翔(1976-)，男，廣東省深圳市嘉軒醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司工程師，研究方向?yàn)橹兴幏治觥?/p>

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1673-2197(2014)08-0016-01