化濁解毒愈瘍煎治療濁毒內(nèi)蘊(yùn)型胃潰瘍大鼠實(shí)驗(yàn)研究

安福麗，楊 彬，郭喜軍，劉勝春

(1.河北省中醫(yī)院，河北 石家莊 050011；2.秦皇島婦幼保健醫(yī)院，河北 秦皇島066000)

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化濁解毒愈瘍煎治療濁毒內(nèi)蘊(yùn)型胃潰瘍大鼠實(shí)驗(yàn)研究

安福麗1，楊 彬2，郭喜軍1，劉勝春1

(1.河北省中醫(yī)院，河北 石家莊 050011；2.秦皇島婦幼保健醫(yī)院，河北 秦皇島066000)

目的：給予濁毒內(nèi)蘊(yùn)型胃潰瘍大鼠灌服化濁解毒愈瘍煎，檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)，觀察其對(duì)胃潰瘍大鼠的影響。方法：采用隨機(jī)數(shù)字表法，將60只健康大鼠分為6組，即正常組(A組)、模型組(B組)、雷尼替丁治療組(C組)、化濁解毒愈瘍煎低劑量組(Da組)、化濁解毒愈瘍煎中劑量組(Db組)、化濁解毒愈瘍煎高劑量組(Dc組)，分別給予相應(yīng)藥物灌服，觀察各組大鼠胃黏膜潰瘍程度，測(cè)定其潰瘍指數(shù)、血小板活化因子(PAF)、降鈣素相關(guān)基因肽(CGRP)值。結(jié)果：雷尼替丁治療組及化濁解毒愈瘍煎高、中、低劑量組均可降低大鼠潰瘍指數(shù)，縮小潰瘍面積，降低血漿PAF并升高CGRP值，且化濁解毒愈瘍煎治療組療效優(yōu)于雷尼替丁組，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：化濁解毒愈瘍煎是治療濁度內(nèi)蘊(yùn)型胃潰瘍的有效方劑。

化濁解毒愈瘍煎；胃潰瘍；實(shí)驗(yàn)研究

消化性潰瘍(PU)是臨床常見病、多發(fā)病，呈世界性分布?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為胃潰瘍的發(fā)病取決于胃黏膜攻擊因子和保護(hù)因子之間的平衡，而胃黏膜血流量調(diào)節(jié)是保持其完整性的重要決定因素[1]。當(dāng)攻擊因子增強(qiáng)，防御因子減弱時(shí)，平衡遭到破壞，從而導(dǎo)致胃潰瘍發(fā)生。我院消化科從中醫(yī)整體理論出發(fā)，辨證施治，通過(guò)分析大量消化性潰瘍患者胃鏡檢查結(jié)果和中醫(yī)證型對(duì)照研究，總結(jié)出濁毒內(nèi)蘊(yùn)在消化性潰瘍發(fā)病機(jī)制中起著關(guān)鍵作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)給予濁毒內(nèi)蘊(yùn)型胃潰瘍大鼠模型灌服藥物，檢測(cè)其組織學(xué)及血漿PAF、DGRP等相關(guān)指標(biāo)，探討化濁解毒愈瘍煎治療濁毒蘊(yùn)型胃潰瘍的作用機(jī)制，為臨床研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康2月齡雄性Wistar大鼠60只，購(gòu)自河北中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。適應(yīng)性喂養(yǎng)7天，無(wú)異常表現(xiàn)者可入選。

實(shí)驗(yàn)藥物：雷尼替丁膠囊(中諾藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)256120655)；化濁解毒愈瘍煎，藥物組成為白芍30g、茯苓20g、 公英15g、瓦楞子15g、煅牡蠣15g、柴胡12g、苦參6g、黃連6g、白術(shù)6g、甘草6g，由河北省中醫(yī)院制劑科制成煎劑。

實(shí)驗(yàn)試劑：冰乙酸、戊巴比妥鈉溶液由河北中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供，血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒由上海西唐生物科技有限公司提供。降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)放射免疫試劑盒由北京普爾偉業(yè)生物科技有限公司提供。

實(shí)驗(yàn)儀器： MK3酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀為芬蘭雷勃公司生產(chǎn)；8 、12全自動(dòng)洗板機(jī)為美國(guó)進(jìn)口產(chǎn)品；離心機(jī)為上海安亭生產(chǎn)；SHB-D循環(huán)水真空泵、FJ-2021 R-放射免疫計(jì)數(shù)器等儀器均為河北省中醫(yī)院檢驗(yàn)科儀器。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 模型制備 將60只大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)飼料7天，空白組10只大鼠飼養(yǎng)于正常環(huán)境中并給與正常飲食，其余大鼠分籠飼養(yǎng)于高熱潮濕的環(huán)境下，飼以高脂高糖飲食，即在普通飼料喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上，每日每只給予10%蜂蜜、10%白糖混合飲料自由飲用，且隔日每只大鼠灌服油脂5g,并與油脂隔日灌服等量白酒，造?？倳r(shí)間共為15天，造模時(shí)大鼠分籠飼養(yǎng)，禁食24h，禁水8h，用無(wú)水乙醇及醋酸按2∶1比例混合，取0.2mL灌胃每只大鼠1h，模型制備成功后，繼續(xù)高脂高糖飲食飼養(yǎng)7天。

1.2.2 藥物制備 化濁解毒愈瘍煎常規(guī)水煎2次，濃縮至藥汁含生藥1g/mL；雷尼替丁膠囊溶于生理鹽水中制成0.3%混懸液，均置于冰箱中冷藏保存。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)分組及給藥 A組10只為空白組，B組10只造模不治療，C組10只為雷尼替丁治療組，Da組10只、Db組10只、Dc組10只分別為化濁解毒愈瘍煎高、中、低劑量治療組。C組大鼠用藥劑量(mg/kg)=W×人用藥劑量(mg/kg)，W為折算系數(shù)=6.25；D組分別按照22.1g/kg/d、11.2g/kg/d、5.5g/kg/d劑量給藥[2]。正常組、模型組給予等體積蒸餾水，每天1次。

1.2.4 標(biāo)本采集 治療5周后，將大鼠處死，取大鼠血液做血清檢測(cè),取適當(dāng)胃竇部組織做胃黏膜組織學(xué)觀察并測(cè)定潰瘍指數(shù)。

1.2.5 指標(biāo)檢測(cè)方法 胃黏膜組織學(xué)觀察HE染色切片，光鏡下觀察潰瘍及其周圍區(qū)域組織學(xué)改變。潰瘍指數(shù)測(cè)定：潰瘍指數(shù)=潰瘍最大長(zhǎng)徑×垂直于最大長(zhǎng)徑的最大寬徑[3]。血漿中降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)及血小板激活因子(PAF)含量測(cè)定按照試劑盒說(shuō)明步驟操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 胃黏膜組織學(xué)觀察

模型組大鼠：胃潰瘍處于進(jìn)展期，部分潰瘍深達(dá)肌層，表面炎性組織壞死滲出，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)充血不明顯。雷尼替丁組大鼠：潰瘍處于愈合期，潰瘍面被再生的腺體覆蓋，邊緣新生腺體部分呈囊狀擴(kuò)張，底部肉芽組織內(nèi)新生血管豐富。 化濁解毒愈瘍煎低劑量組大鼠：潰瘍處于愈合期，潰瘍面留有少量壞死組織，周圍再生腺體呈不規(guī)則樣，黏膜下肉芽組織增生，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，毛細(xì)血管豐富。中劑量組大鼠：潰瘍處于愈合期，潰瘍面積縮小，潰瘍周圍再生腺體數(shù)量增多，腺體間結(jié)締組織減少，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，毛細(xì)血管豐富。高劑量組大鼠：潰瘍處于愈合期，潰瘍面積更小，邊緣再生腺體部分囊狀擴(kuò)張且再生腺體數(shù)量更多，腺體間結(jié)締組織減少，肉芽中膠原纖維數(shù)量增多，慢性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，新生毛細(xì)血管豐富。

2.2 潰瘍指數(shù)(UI)測(cè)定

雷尼替丁組、化濁解毒愈瘍煎低、中、高劑量組大鼠的潰瘍指數(shù)均顯著低于模型組(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。化濁解毒愈瘍煎低、中劑量組與雷尼替丁組大鼠潰瘍指數(shù)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但高劑量組大鼠潰瘍指數(shù)顯著低于雷尼替丁組(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示不同劑量化濁解毒愈瘍煎可發(fā)揮與雷尼替丁相同甚至更優(yōu)的抗?jié)冃Ч?，見?。

表1 各組潰瘍指數(shù)比較

組別例數(shù)(n)UI模型組 1025.11±1.83雷尼替丁組 109.01±2.02*中藥低劑量組108.27±1.69*△中藥中劑量組107.43±0.89*△中藥高劑量組106.07±1.12*◎

注：＊表示與模型組比較，P<0.05；△表示與雷尼替丁組比較，P>0.05;◎表示與雷尼替丁組比較，P<0.05。

2.3 各組大鼠血漿PAF、CGRP含量比較

與模型組相比，雷尼替丁組、化濁解毒愈瘍煎中、低、高劑量組大鼠PAF、CGRP含量均顯著升高(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與雷尼替丁組相比，中、低、高劑量組大鼠 PAF、CGRP含量均顯著升高(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。提示不同劑量化濁解毒愈瘍煎均可顯著提高大鼠PAF、CGRP含量，改善胃黏膜微循環(huán)，進(jìn)而修護(hù)受損胃黏膜。

組別例數(shù)(n)PAF(mu/mL)CGRP(pg/mL)A1082.22±5.31128.34±6.17B10164.40±1.5785.18±3.21C10130.01±7.36*98.97±6.24*Da10110.34±5.24*△105.11±2.37*△Db1099.11±3.89*△113.21±2.63*△Dc1090.81±3.42*△121.00±2.53*△

注：A組為正常對(duì)照組，B組為模型組，C組為雷尼替丁治療組，Da、Db、Dc分別為化濁解毒愈瘍低、中、高劑量組。＊表示與對(duì)照組比較，P<0.05；△表示與雷尼替丁組比較，P<0.05。

3 討論

化濁解毒愈瘍煎為我院郭喜軍教授根據(jù)幾十年胃腸病治療經(jīng)驗(yàn)潛心研究而得的方劑，方中苦參、公英、黃芩、黃連清熱燥濕、瀉火解毒；柴胡、白芍疏肝解郁、柔肝止痛、抑木扶土；瓦楞子、牡蠣制酸、止痛、止血等，諸藥合用共奏舒肝理氣、和胃降逆、化濁解毒之功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，黃連、柴胡具有抗實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍的作用[4]，黃芩有較強(qiáng)的抗炎和抑制Hp作用，而白術(shù)對(duì)應(yīng)激性胃潰瘍有顯著抑制作用，可降低胃液酸度，減少胃液及胃蛋白酶分泌等[5]。綜上所述，化濁解毒愈瘍煎為治療濁度內(nèi)蘊(yùn)型胃潰瘍的有效方劑，值得臨床進(jìn)一步深入研究。

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[3] 李廷荃,馬貴同.補(bǔ)氣活血中藥對(duì)大鼠胃潰瘍愈合過(guò)程中EGFR、bFGFR蛋白表達(dá)的影響[J].上海中醫(yī)藥雜志,2008,42(7):78-80.

[4] 陳波華,刑洪軍,張影,等.淺述黃連等中藥抑制幽門螺旋桿菌生長(zhǎng)的試驗(yàn)研究[J].黑龍江醫(yī)藥,1996,9(2):115.

[5] 顏正華.中藥學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2012:125,159-163,883.

(責(zé)任編輯：尹晨茹)

2014-02-27

安福麗(1976-)，女，河北省中醫(yī)院副主任藥師，研究方向?yàn)樗幬锓治觥?/p>

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1673-2197(2014)10-0012-02