中青年單純性脂肪性肝病與膽結(jié)石關(guān)系的研究

王允野 王 菲 張 丹 金鎮(zhèn)勛

（吉林醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，吉林 吉林 132013）

中青年單純性脂肪性肝病與膽結(jié)石關(guān)系的研究

王允野 王 菲 張 丹 金鎮(zhèn)勛

（吉林醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，吉林 吉林 132013）

目的研究脂肪肝與膽結(jié)石共同的發(fā)病機(jī)制或共同的發(fā)病因素。方法臨床與基礎(chǔ)研究相結(jié)合，更深入探討脂肪性肝病與膽囊結(jié)石之間分子生物學(xué)水平相關(guān)關(guān)系。結(jié)果動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，高脂飲食組大鼠血清的三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、瘦素水平明顯高于對(duì)照組，脂聯(lián)素水平低于對(duì)照組，差異有顯著性。高脂組肝臟中TG、TC 、SREBP-1、SREBP-2明顯高于對(duì)照組。臨床實(shí)驗(yàn)組，脂肪肝伴膽結(jié)石血糖（FPG）、TG、TC、低密度脂蛋白（LDL-C）、胰島素抵抗（IR）、瘦素水平高于對(duì)照組，而高密度脂蛋白（HDL-C）低于對(duì)照組。結(jié)論脂肪肝與膽結(jié)石有共同的發(fā)病機(jī)制與發(fā)病因素。

脂肪肝；膽結(jié)石；高脂血癥；脂聯(lián)素；瘦素

近年來隨著生活水平提高，飲食結(jié)構(gòu)改變，脂肪肝、膽結(jié)石發(fā)病率逐年上升，同時(shí)二者發(fā)病相關(guān)性也引起廣泛重視，目前認(rèn)為脂肪肝與膽結(jié)石存在共同的致病因素，包括肥胖、高脂血癥、高血壓、糖尿病、胰島素抵抗、瘦素。本研究旨在研究脂肪肝與膽結(jié)石的共同發(fā)病機(jī)制或共同的發(fā)病因素，臨床與基礎(chǔ)研究相結(jié)合，更深入探討脂肪性肝病與膽囊結(jié)石之間分子生物學(xué)水平相關(guān)關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

42只大鼠喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分成2組，對(duì)照組12只，高脂組28只，對(duì)照組以普通飼料喂養(yǎng)，高脂組以2%膽固醇、10%豬油和88%標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料構(gòu)成的高脂飼料喂養(yǎng)。于24周末，分別處死兩組大鼠。處死大鼠前，用氯胺酮予麻醉，腹主動(dòng)脈采血，進(jìn)行血生化、脂聯(lián)素、瘦素測(cè)定。大鼠處死后稱取全肝濕重并記錄，取相同的部位肝組織，應(yīng)用勻漿器勻漿，測(cè)定肝勻漿組織血脂成分及SREBP-l、SREBP-2的含量。并抽取處死大鼠膽管內(nèi)膽汁，對(duì)膽汁中膽汁酸、膽固醇進(jìn)行分析。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：兩組大鼠對(duì)應(yīng)指標(biāo)用ANOVA分析，統(tǒng)計(jì)軟件為SSPS 16.0。

1.2 臨床實(shí)驗(yàn)

選取脂肪性肝病伴膽結(jié)石者20例，年齡28～65歲，男15例，女5例，對(duì)照組脂肪性肝病不伴膽結(jié)石者60例，年齡25～68歲，男36例，女24例。脂肪性肝病及膽結(jié)石診斷均經(jīng)B超和/或CT、MRI證實(shí)。所有觀察對(duì)象均常規(guī)詢問病史，僅穿單衣測(cè)量身高、體質(zhì)量，計(jì)算BMI=體質(zhì)量（kg）/身高2（m2）。

研究對(duì)象禁食12 h，次晨采靜脈血，用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定空腹血糖（FPG）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）。瘦素測(cè)定采用人瘦素酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒，按說明書進(jìn)行操作。胰島素抵抗評(píng)價(jià)采用穩(wěn)態(tài)模式評(píng)估法（HOMA）中的HOMA-IR公式，即：IR=FPG ×FINS/22.5。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SSPS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析，用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)進(jìn)行比較。

2 結(jié) 果

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果。見表1～表4。

3 討 論

肝臟是脂肪合成運(yùn)轉(zhuǎn)及利用的主要器官，當(dāng)肝內(nèi)脂肪的合成超過了脂蛋白合成，就可使肝內(nèi)脂肪堆積而形成脂肪肝[1]。國內(nèi)外研究顯示脂肪肝患者膽結(jié)石發(fā)病率較正常人群高。有報(bào)道脂肪肝合并膽囊結(jié)石的發(fā)病率為12.62%，非脂肪肝人群合并膽囊結(jié)石的發(fā)病率為9.2%，兩組發(fā)病率有顯著性差異[2]。有資料顯示肥胖、糖尿病等危險(xiǎn)因素與膽囊結(jié)石有密切關(guān)系，故非酒精性脂肪性肝炎合并膽囊結(jié)石發(fā)病率較高[3]。本研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，高脂組大鼠血清中三酰甘油、膽固醇水平明顯高于對(duì)照組，差異有顯著性。高脂組中肝漿中三酰甘油、膽固醇水平高于對(duì)照組，差異有顯著性。同時(shí)對(duì)高脂組大鼠的膽汁成分測(cè)定，顯示膽固醇、膽汁酸含量高于對(duì)照組。從實(shí)驗(yàn)研究可以看出長期高脂飲食可引起大鼠膽汁中膽固醇及膽汁酸含量發(fā)生變化，可導(dǎo)致結(jié)石形成，表明脂肪肝與膽結(jié)石有共同的發(fā)病因素。

表1 各組大鼠血清生化、脂聯(lián)素、瘦素指標(biāo)變化（

表1 各組大鼠血清生化、脂聯(lián)素、瘦素指標(biāo)變化（

注：△P＜0.05

例數(shù)(n) TG TC HDL-C LDL-C 脂聯(lián)素 瘦素高脂組 28 2.82±0.15△ 2.72±0.37△ 0.64±0.09△ 0.63±0.38△ 4.74±1.06△ 16.258±5.85△對(duì)照組 12 1.41±0.22 1.56±0.20 0.89±0.15 0.43±0.15 2.77±0.36 12.10±2.56

表2 各組大鼠肝漿組織血脂成分及SREBP-l、SREBP-2的含量分析（

表2 各組大鼠肝漿組織血脂成分及SREBP-l、SREBP-2的含量分析（

注：△P＜0.05

例數(shù)(n) TG TC SREBP-1 SREBP-2高脂組 28 11.27±2.25△ 8.70±0.12△ 76.46±1.82△ 45.79±1.05△對(duì)照組 12 3.27±0.80 1.21±0.08 28.29±1.22 15.98±0.64

表3 各組大鼠膽汁中膽汁酸、膽固醇含量分析

表3 各組大鼠膽汁中膽汁酸、膽固醇含量分析

注：△P＜0.05

例數(shù)(n) TC 膽汁酸高脂組 28 10.58±1.09△ 33.40±2.82對(duì)照組 12 7.30±0.67 29.15±1.90

表4 臨床試驗(yàn)結(jié)果

脂肪肝引起膽結(jié)石患病率增多，與脂質(zhì)代謝的異常及肝臟的功能狀態(tài)有關(guān)[4]。正常情況下，肝攝取血中游離脂肪酸，合成三酰甘油及膽固醇和磷脂，三酰甘油與載脂蛋白結(jié)合成脂蛋白進(jìn)入血中。脂類攝入過量，超過血液清除能力，中性脂肪在肝細(xì)胞內(nèi)聚集，形成脂肪肝。在正常膽汁中，膽固醇之所以保持溶解狀態(tài)，是因?yàn)槟懼杏凶銐蛄康哪懼猁}和卵磷脂存在的緣故，而脂肪肝患者缺乏膽堿和不飽和脂肪酸，磷脂在肝內(nèi)合成減少，膽固醇升高，使膽汁中的膽鹽、磷脂、膽固醇三者比例失調(diào)，膽固醇在膽汁中析出而形成膽囊結(jié)石。

結(jié)石患者脂聯(lián)素水平是近來研究的熱點(diǎn)，尹純林等[5]研究表明，膽結(jié)石患者脂聯(lián)素水平低于非結(jié)石組，而胰島素抵抗指數(shù)高于非結(jié)石組。本研究表明，高脂組大鼠血清中脂聯(lián)素水平低于對(duì)照組，脂聯(lián)素水平與TG、TC、LDL等呈負(fù)相關(guān)，與HDL呈正相關(guān)，膽結(jié)石組IR較對(duì)照組高。脂聯(lián)素是一種多肽類物質(zhì)，參與機(jī)體糖脂代謝的調(diào)節(jié)。脂聯(lián)素的基因與2型糖尿病和代謝綜合征的易感位點(diǎn)均在3q27染色體上[6]。因此低水平的脂聯(lián)素與肥胖、代謝綜合征、糖尿病等相關(guān)疾病有關(guān)，亦與膽結(jié)石形成有關(guān)。

固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白（SREBPs）在調(diào)節(jié)脂質(zhì)合成及代謝的平衡和穩(wěn)態(tài)中起著重要作用，是脂肪酸代謝中的關(guān)鍵調(diào)控，因此其在脂肪肝發(fā)病過程中的作用。當(dāng)SREBPs高表達(dá)時(shí)，可引起脂肪在非脂肪組織如骨骼肌、心肌、血管、肝臟和胰島β細(xì)胞中過度積聚，從而引起胰島素抵抗、肝脂肪變和2型糖尿病等[7]。我們研究發(fā)現(xiàn)，高脂組大鼠肝勻漿SREBP-1與SREBP-2水平均顯著上升，與對(duì)照組之間差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示SREBP的高表達(dá)可能與脂肪肝的發(fā)生密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)顯示，與正常組相比，高脂組SREBP-1的表達(dá)明顯高于正常組，與文獻(xiàn)報(bào)道相符。

瘦素是由一條肽鏈構(gòu)成的肽類激素，1999年即有報(bào)道墨西哥美國人，尤其是女性，其血清瘦素水平與膽結(jié)石顯著相關(guān)[8]。本研究表明，高脂飲食組大鼠瘦素水平明顯高于對(duì)照組，臨床試驗(yàn)表明脂肪肝伴膽結(jié)石組瘦素水平高于對(duì)照組。目前研究瘦素與膽囊結(jié)石關(guān)系有以下幾點(diǎn)：①瘦素影響膽囊動(dòng)力。②瘦素通過調(diào)節(jié)HDL和膽固醇代謝，增加膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟，從而增加膽汁膽固醇分泌。③瘦素可改變膽囊膽汁酸鹽組成和大小。④瘦素對(duì)SREBP-lc的表達(dá)起負(fù)調(diào)控作用[9]。

通過本研究表明，脂代謝與膽結(jié)石發(fā)病有共同的發(fā)病因素及發(fā)病機(jī)制，如肥胖、高脂血癥、糖尿病、胰島素抵抗等因素，血脂代謝異?？蓪?dǎo)致膽汁酸、膽固醇含量異常，膽固醇析出導(dǎo)致結(jié)石的發(fā)生。從臨床病例試驗(yàn)中可以看出，脂肪肝伴有膽結(jié)石的患者FPG、TG、TC、LDL-C、胰島素抵抗IR、瘦素明顯高于非膽結(jié)石組，所以臨床上通過控制血脂、調(diào)節(jié)血糖，糾正胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，可減少脂肪肝及膽結(jié)石發(fā)生。目前生活質(zhì)量提高，脂肪肝、高脂血癥、糖尿病發(fā)病率逐漸上升，膽結(jié)石發(fā)病率也在逐漸上升，這與代謝性疾病是密切相關(guān)的，在臨床上要引起我們的重視。

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B

1671-8194（2014）17-0088-02