山茱萸藥材中N、P含量的測定

（鄭州市兒童醫(yī)院，河南 鄭州 450000）

山茱萸藥材中N、P含量的測定

張濤陳海燕

（鄭州市兒童醫(yī)院，河南 鄭州 450000）

目的 測定山茱萸藥材中 N、P 的含量，為研究山茱萸藥材品質(zhì)提供參考。方法 用消解法處理實(shí)驗藥材，用凱氏定氮法測定山茱萸藥材中 N 的含量，用磷鉬比色法測定山茱萸藥材中 P 的含量。結(jié)果 山茱萸藥材中 N 的含量在 4.758 ～ 6.712 mg/g；果肉中 P 的含量在1.318 ～ 5.651 μg/g。結(jié)論 山茱萸藥材 N、P 的含量的測定能為進(jìn)一步研究山茱萸藥材品質(zhì)提供參考，為山茱萸藥材的規(guī)范化種植提供依據(jù)。

山茱萸；N、P含量；藥材品質(zhì)

山茱萸是山茱萸科多年生灌木山茱萸（Cornus officinalis Sieb.et Zucc）的干燥成熟果肉，具有補(bǔ)益肝腎，澀精固脫的功效，主治眩暈耳鳴，腰膝酸痛，內(nèi)熱消渴陽痿遺精，遺尿頻尿，崩漏帶下等。山茱萸是六味地黃丸的主要原料之一，在中藥生產(chǎn)中用量很大，但到目前為止對山茱萸原藥材的質(zhì)量要求尚沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，種植過程不規(guī)范，導(dǎo)致市場銷售的山茱萸的品質(zhì)差異極大。近年來對山茱萸藥材的研究多集中在化學(xué)成分結(jié)構(gòu)分析、化學(xué)成分指標(biāo)含量測定及山茱萸分子生物學(xué)特性等方面[1-3]，本實(shí)驗首次對山茱萸藥材中N、P的含量進(jìn)行測定，以期對山茱萸藥材的規(guī)范種植，研究山茱萸藥材品質(zhì)，山茱萸藥材N、P含量與山茱萸藥材中化學(xué)成分指標(biāo)是否存在相關(guān)性等方面的研究奠定基礎(chǔ)。

1 儀器、材料與試劑

1.1 儀器

KDN-102C型定氮儀、20孔消煮儀（上海纖檢儀器有限公司）；TU-1810紫外可見光光度計、UVWin5紫外軟件（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；1000 mL容量瓶；100 mL容量瓶；50 mL容量瓶；定量濾紙7 cm；半微量滴定管（5 mL）。

1.2 材料與試劑

實(shí)驗室實(shí)驗用山茱萸藥材產(chǎn)自河南境內(nèi)，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院陳隨清教授鑒定為山茱萸科多年生灌木山茱萸（Cornus officinalis Sieb. et Zucc）的干燥成熟果肉，實(shí)驗樣品為自制干燥成熟果肉粉末（過3號 篩 ） ， 濃 硫 酸 （ ρ=1.84 g/mL， 分 析 純 ） ， 雙 氧 水 （30%） ，NaOH（分析純），鉬酸銨（分析純），偏釩酸銨（分析純），溴甲酚綠，甲基紅，乙醇（95%～99%），硼酸（分析純），KH2PO4（分析純），70%～72%高氯酸（ρ=1.60 g/mL，分析純），2，4-二硝基酚（分析純），酒石酸氧銻鉀[K（SbO）C4H4O6] （分析純），鉬酸銨[（NH4）6Mo7O24·4H2O] （分析純），左旋抗壞血酸（分析純），H2BO3（化學(xué)純），高錳酸鉀（分析純），還原鐵粉（過3號篩），辛醇，去離子水。

2 樣品的采集及制備

2.1 樣品的采集

將山茱萸產(chǎn)區(qū)劃分若干樣方，選取生態(tài)因子相似的若干個樣方取樣，在每個樣方中取成熟度相似的、健康的山茱萸植株，隨機(jī)采集山茱萸果實(shí)并拍照記錄。

2.2 樣品的制備

取山茱萸去核，將果肉放入烘箱8 h，進(jìn)行烘干，烘干后用粉碎機(jī)粉碎，并過3號篩，放入自封袋保存。共得到7個產(chǎn)地批次樣品，樣品信息見表1。

表1 樣品信息表

3 山茱萸藥材中氮（N）、磷（P）元素的含量測定

3.1 山茱萸藥材中磷（P）元素的含量測定

①樣品的制備：精密稱取0.2000 g藥材樣品置于干燥的消煮管中，加水濕潤，再加5 mL濃硫酸，放置5 h后消煮，溶液全部呈棕黑色時，加入雙氧水消煮呈清液。②測定方法：將煮好的消煮液轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，待溶液冷卻后用去離子水定容，再用定量濾紙過濾，吸取濾液10 mL置100 mL容量瓶中，加去離子水約40 mL，加2，4-二硝基苯酚指示劑3滴，加6 mol/LNaOH調(diào)節(jié)至微黃色，再加2 mol/L H2SO4調(diào)至剛好無色，加釩鉬酸銨試劑10 mL，用去離子水定容至刻度，待測。供試品放置15 min后，用紫外分光光度計在波長450 nm下測定吸光度A，各批次樣品實(shí)驗結(jié)果見表2。③磷溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線：分別吸取50 μg/mL的P標(biāo)準(zhǔn)溶液1、2、3、4、6、8 mL于50 mL容量瓶中，依次按照上述步驟顯色和測定，該標(biāo)準(zhǔn)系列P的濃度依次為0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 μg/mL。以磷的濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為：y =0.0266x –0.0897，r=0.9998，表明磷濃度在0.5～4 μg/mL時與吸光度呈良好線性關(guān)系。

3.2 山茱萸藥材中氮（N）元素的含量測定

吸取3.1①中未過濾的消煮液10 mL于消煮管中，加10 mL，10 mol/L NaOH蒸餾，用10 mL硼酸指示劑吸收蒸餾液，待溜出液體積至60 mL，用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，消耗標(biāo)準(zhǔn)酸（H2SO4C=0.00532 mol/L）的體積為V，各批次樣品實(shí)驗結(jié)果見表2。

表2 山茱萸果肉中氮、磷含量表

4 實(shí)驗結(jié)果

山茱萸果肉中氮的含量在4.758～6.712 mg/g；果肉中磷的含量在1.318～5.651 μg/g，實(shí)驗結(jié)果見表2。

5 討 論

產(chǎn)地不同，山茱萸藥材質(zhì)量差距明顯，從化學(xué)成分指標(biāo)來看，不同產(chǎn)地山茱萸藥材中馬錢苷，熊果酸，總多糖，總有機(jī)酸，鞣質(zhì)含 量 等 存 在 顯 著 差 別[4,5]， 本 實(shí) 驗 對 藥 材 中 無 機(jī) 元 素 （N、P 等 元 素含量）進(jìn)行測定，以期分析藥材中無機(jī)元素含量是否對山茱萸藥材品質(zhì)有一定影響，對今后進(jìn)一步研究山茱萸藥材中化學(xué)成分指標(biāo)與無機(jī)元素之間的相關(guān)性奠定基礎(chǔ)，對無機(jī)元素與藥材中化學(xué)成分指標(biāo)的結(jié)合研究為解釋藥材道地性及藥材的規(guī)范化種植開辟一條新的途徑。

[1] 趙世萍,付桂香.山茱萸化學(xué)成分和藥理學(xué)作用的研究進(jìn)展[J].中草藥,1997,28(3):187-188.

[2] 楊晉,陳隨清.山茱萸化學(xué)成分研究[J].中草藥,2005,36(12):1780-1782.

[3] 陳隨清,楊晉,冀春如.山茱萸化學(xué)成分和質(zhì)量控制研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)藥發(fā)展論壇,2002,1(5):56-58.

[4] 石延榜,張振凌,許丹妮.不同產(chǎn)地山茱萸藥材質(zhì)量的檢測[J].時珍國醫(yī)國藥,2007,18(12):3052-3053.

[5] 陳隨清,楊晉,王利麗,等.不同栽培品種山茱萸藥材的化學(xué)質(zhì)量評價[J].世界科學(xué)技術(shù)—中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2006,8(2):68-73.

Determination of N, P content in Fructus Corni

ZHANG Tao, CHEN Hai-yan
(The Children's Hospital of Zhengzhou, Zhengzhou 450000, China)

Objective To determine the N, P content in the Cornus officinalis. Methods The Cornus officinalis was treated by digestion method, the N content of Cornus officinalis was determined by kjeldahl nitrogen method, the P content of Cornus officinalis was determined by phosphomolybdate colorimetry. Results The N content of Cornus officinalis is 4.758-6.712 mg/g; the P content of Cornus officinalis is 1.318-5.651 μ g/g. Conclusion The Determination of N, P content in Cornus officinalis could provide a reference for further research on the quality of Cornus officinalis, the study could Provide basis for the standardized cultivation of Cornus officinalis.

Cornus officinalis Sieb.et Zucc; The N, P content; The quality of cornus officinalis

R284.2

：B

：1671-8194（2014）30-0038-02