凝固酶陰性葡萄球菌的特性及其發(fā)展

蘭桂梅

（湖南省邵陽(yáng)市新寧縣人民醫(yī)院，湖南 邵陽(yáng) 422700）

凝固酶陰性葡萄球菌的特性及其發(fā)展

蘭桂梅

（湖南省邵陽(yáng)市新寧縣人民醫(yī)院，湖南 邵陽(yáng) 422700）

目的研究凝固酶陰性葡萄球菌的特性及其發(fā)展情況。方法將采集的384株凝固酶陰性葡萄球菌標(biāo)本經(jīng)培養(yǎng)，首先經(jīng)行涂片染色，觀察染色特性；經(jīng)分離，固體培養(yǎng)觀察群落生長(zhǎng)分布狀態(tài)，群落特征；增殖培養(yǎng)再分離培養(yǎng)后做分離鑒定試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)、抵抗力試驗(yàn)。結(jié)果該類細(xì)菌為球形或近似球形，呈葡萄串狀排列，無(wú)鞭毛，無(wú)芽孢，經(jīng)革蘭染色呈紫色陽(yáng)性反應(yīng)。該類細(xì)菌屬于需氧型細(xì)菌，耐鹽，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求度不高，液體培養(yǎng)呈均勻混濁生長(zhǎng)分布。群落成中等大小，圓形，凸起邊緣整齊光滑，成黃白色油狀。血平板培養(yǎng)部分出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。該類細(xì)菌主要包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人型葡萄球菌、腐生葡萄球菌32株、華納葡萄球菌等。該類細(xì)菌對(duì)抗生素有很高的耐藥性，對(duì)青霉素、氨芐西林等耐藥性高達(dá)90%；環(huán)丙沙星、阿莫西林、克林霉素等耐藥性在70%以上；頭孢唑啉、頭孢呋辛、頭孢曲松、四環(huán)素等耐藥性在50%左右，對(duì)頭孢呋辛、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、利福平等耐藥性較低，對(duì)利奈唑胺、萬(wàn)古霉素沒(méi)有耐藥性。該類細(xì)菌對(duì)外界因素的抵抗力強(qiáng)，耐干燥，耐熱，對(duì)龍膽紫敏感。結(jié)論該類細(xì)菌特性成典型的葡萄球菌特性，其致病性低于致病性葡萄球菌，但耐藥性很高。

凝固酶陰性葡萄球菌；分類；耐藥性；群落特性

凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）一般被認(rèn)為是人體正常菌群，1880年被首次鑒定，因不產(chǎn)生凝固酶因而稱為凝固酶陰性葡萄球菌[1,2]。此類細(xì)菌耐藥性強(qiáng)，造成了治療上的極大困難，已成為臨床面臨的一個(gè)非常棘手的問(wèn)題[3]。本文旨在通過(guò)研究凝固酶陰性葡萄球菌的特性和發(fā)展情況，為臨床防治該類細(xì)菌的感染提供參考依據(jù)。

表1 凝固酶陰性葡萄球菌的分型比例表

1 資料與方法

1.1 菌株來(lái)源

384株凝固酶陰性葡萄球菌來(lái)自醫(yī)院2012年～2013年的臨床標(biāo)本，包括血液、尿液、傷口分泌物、痰液、糞便。經(jīng)過(guò)分離，初步鑒定，保存于半固體培養(yǎng)基備用。

1.2 方法

標(biāo)本經(jīng)培養(yǎng)，直接涂片染色；經(jīng)分離培養(yǎng)觀察群落生長(zhǎng)分布狀態(tài)，群落特征；增殖培養(yǎng)再分離培養(yǎng)后做分離鑒定試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)、抵抗力試驗(yàn)。

1.3 儀器與材料

細(xì)菌鑒定：梅里埃ATB細(xì)菌鑒定儀，藥敏試驗(yàn)：K-B紙片擴(kuò)散法，藥敏試紙由中國(guó)生物制品研究所提供。

1.4 細(xì)菌分離與藥敏試驗(yàn)

細(xì)菌分離與藥敏試驗(yàn)按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》操作。藥敏檢測(cè)結(jié)果判讀根據(jù)CLSI/NCCLS標(biāo)準(zhǔn)，量取的抑菌圈直徑來(lái)判斷凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)該藥物的敏感性形式，共分為敏感、/中介、耐藥三個(gè)檔次。數(shù)據(jù)分析 采用WHONET 5.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié) 果

2.1 形態(tài)與染色

通過(guò)對(duì)細(xì)菌經(jīng)行培養(yǎng)觀察可得，該類細(xì)菌為球形或近似球形，呈葡萄串狀排列，無(wú)鞭毛，無(wú)芽孢，一般沒(méi)有莢膜。經(jīng)革蘭染色呈紫色陽(yáng)性反應(yīng)。

2.2 培養(yǎng)特性

該類細(xì)菌屬于需氧型細(xì)菌，耐鹽，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，經(jīng)液體培養(yǎng)基觀察可得該類細(xì)菌呈均勻混濁生長(zhǎng)分布。經(jīng)普通固體培養(yǎng)基培養(yǎng)可見中等大小菌落，圓形，凸起邊緣整齊光滑，成黃白色油狀。血平板培養(yǎng)部分出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。

2.3 分類及分型

經(jīng)過(guò)分離培養(yǎng)的，384株凝固酶陰性葡萄球菌的分類鑒定結(jié)果顯示，表皮葡萄球菌214株（55.73%），溶血葡萄球菌49株（12.76%），人型葡萄球菌23株（6.00%），腐生葡萄球菌32株（8.33%），木糖葡萄球菌10株（2.60%），華納葡萄球菌26株6.77，其他30。詳見表1。

2.4 細(xì)菌藥敏結(jié)果

通過(guò)藥敏試驗(yàn)測(cè)試可知，在常用的17種抗生素中，青霉素、氨芐西林、紅霉素等耐藥性高達(dá)90%；環(huán)丙沙星、阿莫西林、克林霉素等耐藥性在70%以上；頭孢唑啉、頭孢曲松、四環(huán)素等耐藥性在50%左右，對(duì)頭孢呋辛、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、利福平等耐藥性較低，對(duì)利奈唑胺、萬(wàn)古霉素沒(méi)有耐藥性，可見該類細(xì)菌的耐藥性問(wèn)題已經(jīng)很嚴(yán)重了，詳見表2。

2.5 抵抗力特性

經(jīng)抵抗力試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該類細(xì)菌對(duì)外界因素的抵抗力強(qiáng)于其他無(wú)芽胞菌，耐干燥，耐熱，對(duì)龍膽紫敏感，耐藥性強(qiáng)。

3 討 論

通過(guò)對(duì)該類細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該類細(xì)菌已經(jīng)對(duì)抗生素產(chǎn)生了普遍的耐藥性，對(duì)目前常使用的青霉素、氨芐西林等耐藥性高達(dá)90%；環(huán)丙沙星、阿莫西林、克林霉素等耐藥性在70%以上；頭孢唑啉、頭孢曲松、四環(huán)素等耐藥性在50%左右，對(duì)于我院常用的頭孢呋辛、復(fù)方新諾明等抗生素耐藥性較低，使用該類抗生素治療該類細(xì)菌感染有不錯(cuò)的效果。對(duì)利奈唑胺、萬(wàn)古霉素沒(méi)有耐藥性。該類細(xì)菌耐藥性普遍增高是由于人們對(duì)抗生素的濫用造成的，特別是β-內(nèi)酰胺類藥物這樣的廣譜抗生素醫(yī)院內(nèi)的廣泛使用。凝固酶陰性葡萄球菌可分為MSCNS和MRCN S兩類，MRCNS攜帶mecA基因。研究顯示MSCNS的耐藥程度明顯低于MRCNS[4]。MRCNS的耐藥性高的原因是，mecA基因能夠編碼低親和力青霉素結(jié)合蛋白，該蛋白能夠產(chǎn)生對(duì)苯唑西林和所有頭孢菌素、青霉素類及酶抑制劑的復(fù)合抗菌藥物的耐藥性[5]。凝固酶陰性葡萄球菌的致病性不取決于菌種，而是由細(xì)菌染色體上的細(xì)胞間黏附基因（ica）和mecA基因、aac（6'）基因、等耐藥性基因[6]。

表2 凝固酶陰性葡萄球菌的耐藥性研究

由于抗生素的濫用，該類細(xì)菌感染的耐用性普遍較高，頭孢呋辛、復(fù)方新諾明、利福平等是治療該類細(xì)菌感染的不錯(cuò)選擇，使用萬(wàn)古霉素是最后的治療方案。

[1] 余續(xù)發(fā).耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌醫(yī)院感染的調(diào)查[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2005,12(4):313-314.

[2] 李勝利,張嬰之,吳菊芳,等.葡萄球菌醫(yī)院感染的調(diào)查研究[J].中國(guó)醫(yī)院感染學(xué)雜志,2007,8(2):65-67.

[3] Smith K,Hellmark B,Sderquist B.Characterization of SCCmec elements in methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis isolated from blood cultures from neonates During Three decades [J].APMIS,2011,119(12):885-893.

[4] 張永標(biāo),梁彩倩,張扣興,等.凝固酶陰性葡萄球菌菌譜與藥敏譜調(diào)查[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2006,10(18):395-396.

[5] 洪秀華.臨床微生物學(xué)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2004:180.

[6] Ardic N,Sareyyu Poglu B,Ozyu RTM,et al.Investigation of aminoglycoside modifying enzyme genes in methicillin-resistant staphylococci[J].Microbiol Res,2006,161(1):49-54.

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1671-8194（2014）09-0039-02