稽留流產(chǎn)患者超聲表現(xiàn)與其絨毛染色體異常的關(guān)系分析

楊 雙，鄧志敏，柳愛(ài)華

(深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院，深圳518101)

稽留流產(chǎn)即過(guò)期流產(chǎn)，屬于特殊的自然流產(chǎn)形式，是指胎兒或胚胎已經(jīng)死亡，但仍在孕婦宮腔內(nèi)滯留，未及時(shí)自然排出的現(xiàn)象［1］。本研究分析稽留流產(chǎn)患者的超聲表現(xiàn)與其絨毛染色體異常的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院于2012年1月～2013年3月收治的早期稽留流產(chǎn)患者356例，年齡22～41(32.4±5.2)歲;流產(chǎn)時(shí)懷孕時(shí)間42～86(71.6±7.9)d;懷孕期間305例有陰道出血(85.71%)，出血時(shí)間為 1 ～26(4.6±1.7)d;114例有下腹疼痛(32.02%)。

1.2 方法

1.2.1 B超檢查 所有患者于懷孕6周時(shí)進(jìn)行B超檢查。若經(jīng)B超檢查未發(fā)現(xiàn)胎心，則在1周后進(jìn)行復(fù)查;若已見(jiàn)胎心，且胚胎大小和停經(jīng)周數(shù)相符，則2周后進(jìn)行復(fù)查，直至10～12周。對(duì)超聲檢查中孕婦孕囊大小、胚芽長(zhǎng)度、胚芽有無(wú)、卵黃囊有無(wú)及是否有胎心等進(jìn)行記錄。在超聲檢查中，曾有胎心搏動(dòng)者為有胎心，記為甲組，共216例;超聲檢查無(wú)胎心搏動(dòng)為無(wú)胎心，記為乙組，共140例。甲組懷孕時(shí)間(65.4±7.3)d，乙組(55.7±6.7)d，P ＜0.05;甲組停經(jīng)時(shí)間(41.72±0.37)d，乙組(41.72±0.37)d，P ＞0.05。兩組體外受精(IVF)者占比、35歲以上人群及有復(fù)發(fā)流產(chǎn)史例數(shù)、年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2.2 絨毛細(xì)胞培養(yǎng)與染色體核型分析 確定孕婦宮內(nèi)胚胎停止發(fā)育后，告知患者，待患者簽署同意書(shū)后行清宮術(shù)，在手術(shù)過(guò)程中，無(wú)菌吸管吸取絨毛，利用無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行漂洗，送檢。在顯微鏡下，選取10～20 mg優(yōu)質(zhì)絨毛組織，將之剪切成糊狀，放入1 mL酶解液，37℃水浴箱中靜置15 min;11 000 r/min離心5 min，清洗后以此速度再次離心5 min;棄上清液，將4 mL培養(yǎng)液加入其中并進(jìn)行均勻吹打，接種在25cm2培養(yǎng)瓶中，5%CO2、37℃溫箱中培養(yǎng)5～7 d。利用倒置顯微鏡進(jìn)行觀察，在發(fā)現(xiàn)克隆時(shí)換液并繼續(xù)培養(yǎng)，在克隆數(shù)目達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)后繼續(xù)培養(yǎng)8～10 h。根據(jù)常規(guī)羊水細(xì)胞收獲方式對(duì)絨毛染色體加以處理，利用固定液進(jìn)行固定，離心并滴片，制為G顯帶染色體。在進(jìn)行染色體核型分析時(shí)，對(duì)每份標(biāo)本進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，分30個(gè)分裂相，對(duì)3個(gè)核型進(jìn)行分析，有嵌合體出現(xiàn)時(shí)計(jì)分裂相100個(gè)。對(duì)染色體分析結(jié)果進(jìn)行拍照保存。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

356 例稽留流產(chǎn)患者均順利完成絨毛染色體檢測(cè)，甲組染色體核型檢測(cè)結(jié)果正常83例、異常133例，其中結(jié)構(gòu)異常11例、數(shù)目異?；颊?22例;在核型數(shù)目異常患者中，68例為三體異常結(jié)構(gòu)。乙組染色體核型檢測(cè)結(jié)果正常57例、異常83例，其中結(jié)構(gòu)異常8例、數(shù)目異常患者75例;在核型數(shù)目異?；颊咧?，46例為三體異常結(jié)構(gòu)。甲組異常染色體發(fā)生率為62.41%(133/216)，乙組為59.29%(83/140)，P ＞0.05

3 討論

稽留流產(chǎn)發(fā)病原因較為復(fù)雜，可能與內(nèi)分泌異常［2］、生殖器解剖異常、免疫［3］或遺傳等多方面因素有關(guān)。在早期自然流產(chǎn)中，稽留流產(chǎn)占比高達(dá)50%，且這一數(shù)值近年來(lái)呈不斷增高趨勢(shì)。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，在早期自然流產(chǎn)中，胚胎發(fā)育異常是最常見(jiàn)原因，在所有致使早期自然流產(chǎn)原因中占比高達(dá)50%～60%［4］。當(dāng)孕婦有過(guò)大精神壓力，在遺傳基因上存在缺陷，或者母體有不良習(xí)慣，受環(huán)境因素影響時(shí)，很可能會(huì)導(dǎo)致稽留流產(chǎn)現(xiàn)象?；袅鳟a(chǎn)不僅會(huì)給患者及其家庭造成極大痛苦，同時(shí)也會(huì)給患者身體造成嚴(yán)重創(chuàng)傷。自1961年P(guān)enrose等報(bào)道自然流產(chǎn)胚胎具有三倍體異常以來(lái)，隨著人類(lèi)細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)的提高，人們不斷加深了對(duì)流產(chǎn)胚胎染色體異常的認(rèn)識(shí)［5］。目前臨床上更傾向于對(duì)多次自然流產(chǎn)的患者才行絨毛染色體分析。

在受精卵發(fā)育中會(huì)形成絨毛組織這一胚胎重要附屬物。與胚胎細(xì)胞類(lèi)似，絨毛細(xì)胞具有生物遺傳性。同時(shí)，絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞分裂能力旺盛，在體外培養(yǎng)下可為研究細(xì)胞周期功能等提供所需細(xì)胞，因此在產(chǎn)前診斷中應(yīng)用十分廣泛［6］。在胚胎遺傳因素所致缺陷中，稽留流產(chǎn)胚胎染色體異常是常見(jiàn)病因，有50%以上稽留流產(chǎn)是因染色體異常引起。在本次研究中，356例稽留流產(chǎn)患者經(jīng)體外培養(yǎng)絨毛組織并對(duì)絨毛染色體核型進(jìn)行分析，異常核型檢出與文獻(xiàn)報(bào)道一致。同時(shí)，在絨毛染色體核型分析中，染色體異常核型主要包括結(jié)構(gòu)異常與數(shù)目異常，其中結(jié)構(gòu)異常數(shù)目異常及三體異常占比均與文獻(xiàn)一致。由此可知，三體是染色體數(shù)目異常中最常見(jiàn)現(xiàn)象，這是因?yàn)樵跍p數(shù)分裂過(guò)程中，生殖細(xì)胞染色體不發(fā)生分離。在患者年齡不斷增大的情況下，染色體三體發(fā)生幾率會(huì)逐漸增高。臨床實(shí)踐證明，在患者胚胎停育時(shí)，有不同超聲表現(xiàn)，主要為小胚胎、空孕囊、大卵黃、小孕囊等，一些超聲表現(xiàn)和特定染色體有關(guān)。在本次研究中，分別對(duì)超聲下有胎心或無(wú)胎心患者染色體異常情況進(jìn)行對(duì)比，兩組染色體異常發(fā)生率間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［7］。

綜上所述，染色體異常是誘導(dǎo)稽留流產(chǎn)的主要原因，對(duì)胚胎染色體異常情況進(jìn)行研究，可為分析稽留流產(chǎn)形成原因及下次正常懷孕提供重要指導(dǎo)。

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