亞硝酸鈉滴定法對氨基苯甲酸酯類藥物的含量測定分析

孫宇光

【摘 要】目的：采用亞硝酸鈉滴定法對氨基苯甲酸酯類藥物的含量進行測定，分析其藥物反應(yīng)及其含量。方法：根據(jù)測定指示其終點的方法，主要有電位法、永停滴定法，外指示劑法等。結(jié)果：芳伯氨基在酸性液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，反應(yīng)終點用永停法或外指示劑法顯示。結(jié)論：亞硝酸鈉滴定法對氨基苯甲酸酯類藥物的含量進行測定方法中目前多采用永停滴定法顯示終點。

【關(guān)鍵詞】氨基苯甲酸酯類藥物；亞硝酸鈉滴定法；甲酸酯類藥物；亞硝酸鈉定量反應(yīng)；永停滴定法；外指示劑法；電位法

有芳伯氨基的藥物如對氨基苯甲酸脂類、磺胺類；水解以后有芳伯氨基對乙酰氨基酚；分子中有硝基可還原得芳伯氨基者比如無味氯霉素等藥物，均可用亞硝酸鈉法測定含量。

1 基本原理

芳伯氨基在酸性液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，反應(yīng)終點用永停法或外指示劑法顯示。這種方法適用范圍比較廣泛，為一些國家的藥典中所采用。

2 測定的主要條件

重氮化反應(yīng)的速度受多種因素的影響，亞硝酸鈉滴定液及反應(yīng)生成的重氮鹽也不夠穩(wěn)定，因此測定中應(yīng)當(dāng)注意以下主要條件。

2.1 反應(yīng)速度與藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的關(guān)系

在鹽酸存在的條件下，重氮化進行反應(yīng)，第一步的反應(yīng)速度慢，后兩步反應(yīng)速度則比較快，所以整個反應(yīng)速度取決于第一步。如果能使第一步反應(yīng)速度加快，則整個反應(yīng)也就相應(yīng)地加快，而第一步的反應(yīng)快慢與含芳伯氨基化合物中芳伯氨基的游離程度有密切的關(guān)系，如果游離芳伯氨基的堿性較弱，則在一定強度酸性溶液中成鹽的比例較小，即游離芳伯氨基較多，重氮化反應(yīng)速度就快；反之，芳伯氨基堿性較強，則在一定程度上酸性液中成鹽比例較大，游離芳伯氨基較少，則重氮化反應(yīng)速度就慢。因此，在苯胺芳環(huán)上，尤其是在對位，存在有取代基如磺酸基、硝基、羥基、甲基和鹵素等，由于共軛效應(yīng)與誘導(dǎo)效應(yīng)，使芳伯氨基N上電子云密謀降低，則芳伯氨基堿性減弱，重氮化反應(yīng)就較快；反之，如果在苯胺環(huán)對位上，存在的取代基為烷氧基、羥基和甲基等，使芳伯氨基N上電子云密度增大，則堿性增強，重氮化反應(yīng)速度變慢。所以，一般在測定時，特別是具有能增強芳伯氨基堿性的取代基的藥物，于供試溶液中需加入適量溴化鉀大約2～3克，使加速重氮化反應(yīng)。溴化鉀與鹽酸作用產(chǎn)生溴化氫，由于試驗中的硝酸離子濃度過大，因此能夠加速重氮化反應(yīng)的進行。

2.2 反應(yīng)速度與酸及酸度的關(guān)系

因胺類的鹽酸鹽較其硫酸鹽的溶解度大，反應(yīng)速度也較快，所以多采用鹽酸。鹽酸的用量按反應(yīng)為1mol的芳胺與2mol的鹽酸作用，但實際測定的鹽酸用量要大得多，尤其是某些在酸中難溶解的藥物，往往要多加一些酸。在強酸性介質(zhì)中，可以加速反應(yīng)的進行，重氮化合物在酸性溶液中比較穩(wěn)定，防止生成偶氮氨基化合物，影響測定結(jié)果。酸度加大，反應(yīng)向左進行，因此可以避免偶氮氨基化合物的生成。但酸度過大，可以阻礙氨基的游離，反而影響重氮化反應(yīng)速度。在太濃的鹽酸中也可使亞硝酸分解。所以一般加酸的量為芳胺類藥物與酸的mol比約為1：2.5～6。

2.3 反應(yīng)速度與溫度的關(guān)系

溫度高，反應(yīng)速度快；但溫度高時，可使亞硝酸逸失，并且可以使重氮鹽分解。一般溫度每升高10度，重氮化反應(yīng)速度加快2.5倍，但重氮鹽分解速度也相應(yīng)地加速2倍，所以測定時一定都要在低溫下進行。由于低溫時反應(yīng)慢，經(jīng)過試驗，可以在室溫10～30度時進行，為了避免亞硝酸的揮發(fā)和分解，滴定時將滴定管尖端插入液面下三分之二處，一次將大部分亞硝酸滴定液在攪拌下迅速加入，使其盡快反應(yīng)，然后將滴管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再緩緩滴定至終點。這樣一來可以縮短滴定時間，也不影響結(jié)果。

2.4 反應(yīng)速度與滴定速度的關(guān)系

重氮化反應(yīng)分為分子反應(yīng)，速度較慢，所以滴定不宜過快，以防反應(yīng)不完全而造成亞硝酸的損失。但如上述將滴定管尖端插入液面以下，較快放出滴定液，可在室溫滴定又能防止亞硝酸的損失，而在管尖提出液面后，滴定宜慢，尤其是在近終點時，因尚未作用的芳伯氨基濃度極稀，須在最后一滴加入攪拌1～5分鐘以后再確定是否達到真正的終點。

3 指示終點的方法

根據(jù)目前測定的方法主要有電位法、永停滴定法，外指示劑法等，現(xiàn)在多采用永停滴定法進行指示終點。

3.1 永停滴定法

主要原理為將兩根鉑電極插入固定液中，在兩個電極間外加電壓約為50毫伏，在電解池線路中串聯(lián)一靈敏的檢流計。用亞硝酸鈉溶液定時，終點前，線路上無電流通過，電流計指針指零。當(dāng)溶液中有微量亞硝酸存在時，電極即起氧化還原反應(yīng)，線路中有電流通過，此時電流計指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點。

3.2 電位法

利用甘汞—鉑電極系統(tǒng)，當(dāng)重氮化反應(yīng)完成時，溶液中有多余的亞硝酸，使電位產(chǎn)生突躍。如果用直讀式電位計，則可使電位指針突然偏轉(zhuǎn)而指示終點。美國藥典多采用此法。

3.3 外指示劑法

常用碘化鉀—淀粉糊劑或者試紙，滴定終點時，稍過量的亞硝酸鈉在酸性液中氧化碘化鉀，析出的碘遇到淀粉即顯藍色。使用時，將糊劑置白磁板上鋪為薄層，當(dāng)以細玻棒蘸取少許滴定液劃過，立即顯藍色即為滴定終點。用本法指示終點適用于多種藥物及其制劑的亞硝酸鈉滴定法。但由于滴定溶液的酸堿性，未達到終點時，碘化鉀在酸性液中遇光被空氣緩緩氧化也能夠游離出碘，與淀粉顯藍色而混淆終點；亞硝酸鈉液在過量1～2滴時方可靈敏地指示終點；以及由于多次外試也可能損失供品而增加滴定誤差，所以初次采用者較難以掌握。一般可以予先計算滴定液的消耗量，在接近理論終點前，緩緩滴定和取樣液試終點，可以減少供試樣品的損失。應(yīng)用外指示劑的靈敏度和反應(yīng)液的體積有關(guān)，如果測定與標化的體積不一致，往往會引入一定偏差，為了避免這些偏差，可使測定時溶液的體積與標化亞硝酸鈉滴定液時體積一致或測定與標化均進行空白校正。

總而言之，通過上述方法對于氨基苯甲酸酯類藥物進行含量的測定效果顯著，使用方便，有效易行，除此之外，還有高效液相色譜法和非水溶液滴定法等進行藥物的測量。