戈舍瑞林聯(lián)合比卡魯胺間歇治療對(duì)前列腺癌患者血清VEGF和miR—34a的影響

李霖　韓晨東

[摘 要] 目的：探討戈舍瑞林聯(lián)合比卡魯胺間歇治療對(duì)前列腺癌患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）和miR-34a的影響。方法：選擇2007年12月-2012年6月收治的晚期前列腺癌患者83例為研究對(duì)象，采用戈舍瑞林聯(lián)合比卡魯胺的間歇內(nèi)分泌治療，治療9個(gè)月后評(píng)價(jià)療效。測(cè)定治療前后患者血清的VEGF和miR-34a。結(jié)果：患者的前列腺體積和血清前列腺特異性抗原（PSA）在治療后均有明顯減少，與治療前比較差異顯著（P<0.01）；前列腺體積變化率平均為36.4%，PSA抑制率為63.6%。治療后患者血清VEGF均明顯降低（P<0.01），治療后血清miR-34a明顯升高（P<0.01）。結(jié)論：戈舍瑞林聯(lián)合比卡魯胺間歇內(nèi)分泌治療可以明顯減少前列腺癌血清VEGF，提高miR-34a的表達(dá)。

[關(guān)鍵詞] 間歇治療；前列腺癌；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；miR-34a

中圖分類號(hào)：R737 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2055-5200（2014）02-045-03

在歐美國(guó)家前列腺癌的發(fā)病率較高[1]。近年來，我國(guó)前列腺癌的發(fā)病率也呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅男性的健康，大部分患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已是晚期，此時(shí)手術(shù)根治的機(jī)會(huì)多已失去，往往需要采取以內(nèi)分泌治療為主的姑息療法進(jìn)行治療。國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，前列腺癌發(fā)病是與雄激素相關(guān)聯(lián)的，比卡魯胺屬于非甾體類抗雄激素藥物，可與雄性激素受體競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合。戈舍瑞林是一種促黃體生成素釋放激素類似物的藥物，可降低男性血清睪丸酮含量。因此，二者均對(duì)前列腺癌有治療作用。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是一種多功能細(xì)胞生長(zhǎng)因子，能特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、促進(jìn)生成腫瘤血管，在其作用下腫瘤增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)。microRNA是一種內(nèi)源性非編碼的短鏈RNA，它可以對(duì)腫瘤細(xì)胞發(fā)揮作用，其表達(dá)可以抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[2]。本研究主要采用戈舍瑞林聯(lián)合比卡魯胺間歇治療，觀察前列腺癌患者血清VEGF和miR-34a的變化，進(jìn)一步研究其聯(lián)合治療的機(jī)理。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2007年12月至2012年6月我院收治的晚期前列腺癌患者83例作為研究對(duì)象，年齡65～83歲，平均年齡（75.4±8.1）歲，臨床表現(xiàn)為尿頻、排尿困難及骨痛等。經(jīng)多普勒彩超、直腸指檢、前列腺CT及MR、血前列腺特異性抗原（PSA）等檢查，診斷為前列腺癌；前列腺穿刺活檢進(jìn)一步證實(shí)為前列腺癌。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）已接受抗雄激素治療、雌激素治療、睪丸切除術(shù)、酮康唑治療、黃體生成素釋放激素類似物治療和細(xì)胞毒藥物治療；（2） 前列腺放射試驗(yàn)前3月內(nèi)接受治療者；（3） 5年內(nèi)曾患前列腺癌以外的其他惡性疾??；（4） 丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶值高于正常值上限的1.2倍或膽紅素高于正常值上限1.5倍；（5） 對(duì)研究藥物過敏、患有其他疾病、藥物濫用或酗酒等影響研究進(jìn)行行為。所有治療均征得患者及家屬同意，并經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 治療方法

采用間歇內(nèi)分泌治療，給予戈舍瑞林1次3.6mg，28日1次，比卡魯胺1次50mg，1日1次；用藥持續(xù)6～9個(gè)月，血PSA下降至4ng/mL以下，維持3個(gè)月后停藥，進(jìn)入間歇期，當(dāng)血PSA上升至4ng/mL時(shí)，再次開始治療，直至再次使血PSA降至4ng/mL，以此類推進(jìn)入下一周期。

1.3 療效評(píng)價(jià)

前列腺體積的變化經(jīng)直腸超聲檢查，前列腺體積=前列腺左右徑×前后徑×上下徑×0.52。前列腺體積變化率（%）= 前列腺治療開始前體積-前列腺治療后體積/前列腺治療開始前體積。PSA的抑制率（%）= 開始治療前PSA值-治療后PSA值/開始治療前PSA值。

1.4 血清VEGF和miR-34a的測(cè)定

清晨空腹抽取靜脈3mL，靜置30min，以2000r/min離心15min分離血清，將其吸取放入Ependoff管中，置于-20℃冰箱保存?zhèn)錂z。酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定VEGF。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測(cè)定血清miR-34a。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理與分析，計(jì)量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，正態(tài)分布數(shù)據(jù)用（x±s）表示，偏態(tài)分布數(shù)據(jù)比較前經(jīng)變量轉(zhuǎn)換為正態(tài)，用中位數(shù)與四分位數(shù)間距表示，兩樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)采用成組設(shè)計(jì)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)定為α=0.05，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后療效比較

患者的前列腺體積和血清PSA在治療后均有明顯減少，與治療前比較差異明顯（P<0.01）；前列腺體積變化率平均為36.4%，PSA抑制率為63.6%。見表1。

表1 治療前后療效比較（x±s）

時(shí)間 例數(shù) 前列腺體積（cm3） PSA（ug/L）

治療前

治療后 83

83 62.5±10.8

31.8±7.23* 36.7±8.1

2.7±0.6*

與治療前比較*P<0.01

2.2 治療前后血清VEGF和miR-34a變化

如表2所示治療后患者血清VEGF均明顯降低（P<0.01），治療后血清miR-34a明顯升高（P<0.01）。

表2 治療前后血清VEGF和miR-34a變化 （x±s）

時(shí)間 例數(shù) VEGF（pg/mL） miR-34a（相對(duì)量）

治療前

治療后 83

83 447.3±97.2

125.4±42.7* -6.67±1.03

-4.07±0.85*

t

P 27.6233

0.0000 17.7373

0.0007

3 討論

前列腺癌是男性泌尿生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，常見于老年男性。近年來我國(guó)前列腺癌的發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)。在治療過程中對(duì)患者的年齡、全身狀況、病理分級(jí)及臨床分期等因素均應(yīng)綜合考慮[3]。手術(shù)去勢(shì)療法或者手術(shù)根治仍是目前常規(guī)的治療方法，但單純采用手術(shù)治療腫瘤易復(fù)發(fā)，癌細(xì)胞從雄激素依賴性轉(zhuǎn)為非依賴性或雄激素阻斷不完全是復(fù)發(fā)主要原因。對(duì)雄激素的依賴前列腺內(nèi)細(xì)胞各不相同，大多數(shù)癌細(xì)胞依賴于雄激素，雄激素轉(zhuǎn)變成雙氧睪酮，其結(jié)合雄激素受體后能使前列腺細(xì)胞分裂受到激活，前列腺細(xì)胞發(fā)生異常無(wú)序生長(zhǎng)導(dǎo)致癌變。因此，阻斷雄激素就可抑制腫瘤的生長(zhǎng)。美國(guó)國(guó)立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）2010指南建議，內(nèi)分泌治療或化療應(yīng)被應(yīng)用于晚期（轉(zhuǎn)移性）患者。到目前為止前列腺癌的內(nèi)分泌治療已有60多年歷史，是治療中晚期前列腺癌的主要途徑。

在前列腺癌發(fā)展中，人體內(nèi)雙氫睪酮水平正常與否具有重要作用。人體內(nèi)大部分雙氫睪酮約90%來源于睪丸，小部分約10%來源于腎上腺，因此，為了更有效的阻斷雄激素對(duì)前列腺的影響，睪丸來源雄激素在被去除的同時(shí)，腎上腺來源的雄激素也需被阻斷。戈舍瑞林是一種多聚緩釋植入劑，逐漸在體內(nèi)進(jìn)行生物降解，是促黃體生成素釋放激素的類似物，腦垂體促黃體生成素合成被抑制，可降低男性血清睪酮水平。比卡魯胺是一個(gè)競(jìng)爭(zhēng)性的雄激素受體的拮抗劑，并且其血漿消除半衰期長(zhǎng)，服用方便。戈舍瑞林與比卡魯胺聯(lián)合應(yīng)用可使包括腎上腺皮質(zhì)來源的雄激素得到去除，雄激素完全被抑制。二者在臨床聯(lián)合應(yīng)用以持續(xù)性內(nèi)分泌治療為多，可能導(dǎo)致生活質(zhì)量下降，如疲勞、智力下降、性欲低下、勃起功能障礙、肌力降低、脂肪聚積、心理障礙、精神抑郁、生理活動(dòng)和整體活動(dòng)能力降低，患者的相關(guān)治療費(fèi)用同時(shí)增加[4]。近期文獻(xiàn)報(bào)道，心血管疾病的發(fā)病率和死亡率在內(nèi)分泌治療后可能增加[5]。新診斷的前列腺癌患者在接受激素治療1年以上后，較接受12個(gè)月以內(nèi)激素治療的患者患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加了20%。同時(shí)，激素治療使患者對(duì)胰島素的敏感性降低，低密度脂蛋白及甘油三酯進(jìn)一步升高。因而近年來，間歇性內(nèi)分泌治療受到高度重視[6]，間歇性療法由于使用激素減少，上述副作用得以減輕。間歇性內(nèi)分泌治療的理論基礎(chǔ)是：間斷進(jìn)行全雄激素抑制，通過補(bǔ)充雄激素，存活的腫瘤細(xì)胞進(jìn)入到正常的分化途徑，凋亡的能力得到恢復(fù)。

PSA是敏感的前列腺癌標(biāo)志物，分子量約為34 000Da，PSA是一種由前列腺腺泡及導(dǎo)管上皮分泌的蛋白酶，PSA值與臨床分期、前列腺癌體積和病理分級(jí)有良好的相關(guān)性。作為臨床常用的檢測(cè)指標(biāo)，PSA 可以用于前列腺癌診斷及判斷內(nèi)分泌治療的療效及預(yù)后[7]。本研究顯示，患者的前列腺體積和血清PSA在治療后均有明顯減少，與治療前有明顯差異（P<0.01）；前列腺體積變化率平均為36.4%，PSA抑制率為63.6%，因此，采用戈舍瑞林聯(lián)合比卡魯胺間歇治療前列腺癌是有效的。

VEGFs是首先從牛垂體濾泡星形細(xì)胞體外培養(yǎng)液中純化出來的，血管內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂活性可以被其加強(qiáng)[8]?，F(xiàn)有研究表明：VEGF是特異性最高、作用最強(qiáng)的血管生成調(diào)控因子，它可特異性地結(jié)合血管內(nèi)皮細(xì)胞，能使血管通透性得到增強(qiáng)，進(jìn)一步刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并促進(jìn)血管內(nèi)物質(zhì)的滲出，內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡也可以被其抑制，蛋白酶被激活，因此更加有利于降解細(xì)胞外基質(zhì)，誘導(dǎo)新生血管的生長(zhǎng)及延伸，為遷移內(nèi)皮細(xì)胞和轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞提供形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)[9-10]。miRNAs可以調(diào)節(jié)人類近30%的基因表達(dá)，可以起到癌基因或者腫瘤抑制基因的功能[11]。其在一些基礎(chǔ)細(xì)胞進(jìn)程中均扮演著極為重要的角色，如脂肪代謝、細(xì)胞生長(zhǎng)周期調(diào)控、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡、血細(xì)胞生成等。研究表明，miRNA均存在于人類及動(dòng)物的血清和血漿中。血清miRNA的表達(dá)在同一種物種的不同個(gè)體中也是穩(wěn)定一致的，miRNA的穩(wěn)定性不被輕易影響，可作為潛在新型疾病標(biāo)志物。多種腫瘤和腫瘤細(xì)胞系中都存在miR-34a的表達(dá)缺失或下調(diào)，miR-34a表達(dá)水平減少的原因之一為miR-34a啟動(dòng)子的高頻率甲基化[12]。另外，腫瘤抑制基因P53也可以誘導(dǎo)miR-34a的表達(dá)，腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)不僅在高表達(dá)miR-34a后受到抑制，細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的基因產(chǎn)物同樣也可以被其抑制[13]。本研究顯示，治療后患者血清VEGF均明顯降低（P<0.01），治療后血清miR-34a明顯升高（P<0.01），因此，戈舍瑞林聯(lián)合比卡魯胺間歇內(nèi)分泌治療可以減少前列腺癌的血管生成，減少腫瘤生長(zhǎng)，減慢腫瘤轉(zhuǎn)移的發(fā)生。

參 考 文 獻(xiàn)

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