不同外植體激素對(duì)引鳥(niǎo)花楸組培繁育的影響

王喆,盧正茂

(1.遼寧省林業(yè)基金管理總站,遼寧 沈陽(yáng)110036;2.遼寧省森林經(jīng)營(yíng)研究所,遼寧 丹東118002)

引鳥(niǎo)花楸(Sorbus aucuparia),亦稱歐洲花楸,薔薇科(Rosaceae)花楸屬(Sorbus)喬木,高可達(dá)5 m,廣散分布于北溫帶,因果形美觀而栽作觀賞植物,是最常見(jiàn)的栽培品種之一。[1]由于近幾年花楸市場(chǎng)供不應(yīng)求,繁殖手段多樣導(dǎo)致市場(chǎng)苗木質(zhì)量差別很大,組培是一種無(wú)性繁殖的生物技術(shù),能較好地保持原種的優(yōu)良經(jīng)濟(jì)性,繁殖系數(shù)高,便于工廠化生產(chǎn)和集約化經(jīng)營(yíng)[2]。近年來(lái)在園林和花卉產(chǎn)業(yè)等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用,并收到了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。為提高引鳥(niǎo)花楸育苗質(zhì)量和速度,本文著重對(duì)花楸組培中不同外植體的分化情況、污染情況進(jìn)行逐一論述,并對(duì)不同培養(yǎng)基中瓶苗的生長(zhǎng)狀況進(jìn)行調(diào)查,為以后的生產(chǎn)提供借鑒。

1　試驗(yàn)材料

試驗(yàn)外植體于2008年12月中旬采自遼寧省本溪縣偏嶺鎮(zhèn)新農(nóng)村(123°57′E,41°24′N(xiāo))多年生引鳥(niǎo)花楸成熟母樹(shù),取回后直接洗凈樹(shù)干,貯藏于室內(nèi)水培1個(gè)月,嫩枝在自來(lái)水下沖洗2 h,無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)用0.1%的HgCl溶液消毒8 min,用無(wú)菌水漂洗5次,取出外植體直接接種于MS和WPM啟動(dòng)培養(yǎng)基中,培養(yǎng)30 d后便已萌出新鮮生長(zhǎng)點(diǎn),這時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)瓶繁殖,在已形成完整植株的情況下選出達(dá)到下述各要求的外植體進(jìn)行試驗(yàn)：(1)具3片淡綠色葉片,1支主脈;(2)基部沒(méi)有愈傷組織形成;(3)生長(zhǎng)體長(zhǎng)度均為0.1～0.5 cm。本次試驗(yàn)每瓶均放置2個(gè)外植體,每個(gè)處理接種10瓶且培養(yǎng)4個(gè)周期。

2　試驗(yàn)方法

2.1　生長(zhǎng)素和分裂素濃度調(diào)試

各外植體接種完成后帶到培養(yǎng)室觀察,包括外植體顏色、長(zhǎng)、寬、愈傷組織質(zhì)量等。培養(yǎng)基的處理按在 MS培養(yǎng)基中分別添BA0.1、0.2、0.3、0.4、0.5和 KT0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg L-1[3],編號(hào)A1～A50,B1～B50共100個(gè)處理。處理用的白糖濃度均為20 mg L-1,p H值5.8,光照為1 600 lx,溫度為20℃的環(huán)境培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間設(shè)置為21 d,相對(duì)濕度70%～80%,空調(diào)房育苗,精心管護(hù)。

2.2　不同外植體培養(yǎng)設(shè)計(jì)

設(shè)置的不同外植體均來(lái)自同一株母樹(shù)的不同位置材料,分別采腋芽、頂芽、嫩枝和葉片,設(shè)置MS+BA0.5培養(yǎng)基,p H值5.8,砂糖濃度20 mg L-1,瓊脂8 g L-1,乙烯膜封口,溫度為20℃的環(huán)境培養(yǎng)。

2.3　數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用Excel2003進(jìn)行數(shù)據(jù)歸集處理：

分化率=(誘導(dǎo)出的叢生芽數(shù)/接種外植體總數(shù))×100%

污染(褐化)苗發(fā)生率=污染(褐化)發(fā)生苗/該外植體誘導(dǎo)出的不定芽總數(shù)×100%

3　結(jié)果與分析

3.1　啟動(dòng)培養(yǎng)基不同繁殖速度不同

本試驗(yàn)中分別設(shè)置MS和WPM培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)WPM培養(yǎng)基的萌發(fā)速度和MS培養(yǎng)基要相差8 d左右,得到的分化芽統(tǒng)計(jì)表明,MS和WPM幾乎沒(méi)有差別,培養(yǎng)基中大量元素的分量對(duì)引鳥(niǎo)花楸的組織還是有影響的。所以從繁殖效率的角度考慮,生產(chǎn)中用MS作為啟動(dòng)培養(yǎng)基有利于提高生產(chǎn)率。

3.2　不同的培養(yǎng)材料結(jié)果不同

組織培養(yǎng)過(guò)程中以MS+BA0.5培養(yǎng)基為基質(zhì),設(shè)置了4種不同位置的培養(yǎng)外植體,分別觀察瓶苗的分化率、分化周期、污染率和褐化率,每個(gè)周期培養(yǎng)25 d,4個(gè)周期后調(diào)查結(jié)果如表1。

表1　不同培養(yǎng)材料的培養(yǎng)結(jié)果

由表1可見(jiàn)：分化率最好的是頂芽,其次是腋芽、嫩枝和葉片;分化周期最短的是腋芽,但各部位的外植體經(jīng)過(guò)啟動(dòng)后,其生長(zhǎng)速率幾乎差不多,只是平均分化周期中啟動(dòng)時(shí)間長(zhǎng)短不一而已;污染率最低的是頂芽;褐化率最高的是嫩枝[4]。

3.3　不同外源激素對(duì)花楸組培苗的影響

花楸組培苗在添加不同激素以后的生長(zhǎng)表現(xiàn)如表2。MS培養(yǎng)基在添加BA和ZT后的生長(zhǎng)表現(xiàn)各有不同,如添加BA0.1以后的分化率為67%,在添加0.2～0.3以后的分化率在逐次下降,試驗(yàn)證明BA0.5的分化率最高,達(dá)到90%;而添加ZT培養(yǎng)基的生長(zhǎng)表現(xiàn)不如BA好,證明只有添加最適濃度的培養(yǎng)基其生長(zhǎng)狀態(tài)才能達(dá)到最佳。

表2　不同外源激素瓶苗的生長(zhǎng)表現(xiàn)

4　結(jié)論與討論

4.1引鳥(niǎo)花楸的組織培養(yǎng),最適合的啟動(dòng)培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基,WPM培養(yǎng)基的萌分速度和MS培養(yǎng)基要相差8 d左右,培養(yǎng)基中大量元素的分量對(duì)引鳥(niǎo)花楸的組織還是有影響的。所以從繁殖效率的角度考慮,生產(chǎn)中用MS作為啟動(dòng)培養(yǎng)基有利于提高生產(chǎn)率。

4.2不同位置的培養(yǎng)外植體,分化率最好的是頂芽,其次是腋芽、嫩枝和葉片;分化周期最短的是腋芽,但各部位的外植體經(jīng)過(guò)啟動(dòng)后,其生長(zhǎng)速率幾乎差不多,只是平均分化周期中啟動(dòng)時(shí)間長(zhǎng)短不一而已;污染率最低的是頂芽;褐化率最高的是嫩枝。生產(chǎn)中采用頂芽有利于提高生產(chǎn)率。

4.3不同外源激素對(duì)花楸組培苗有不同的影響,實(shí)驗(yàn)證明,花楸組培苗在MS培養(yǎng)基上以添加BA,BA0.5的分化率最高,達(dá)到90%,而添加ZT培養(yǎng)基的生長(zhǎng)表現(xiàn)不如BA好,證明只有添加最適濃度的培養(yǎng)基其生長(zhǎng)狀態(tài)才能達(dá)到最佳。

參考文獻(xiàn)：

[1]余治家,于澎濤,王緒芳,等.多用途樹(shù)種歐洲花楸及其引種[J].中國(guó)城市林業(yè),2007,5(6)：56-58

[2]劉瑋,李長(zhǎng)海,莊倩,等.歐洲花楸引種及生物學(xué)特性[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2007,35(2)29-30

[3]高曄華,郭朋偉,吳榮哲.黑果腺肋花楸組培苗增殖的初步研究[J].北方園藝,2012(17)：119-121

[4]趙春莉,李金英.植物組織培養(yǎng)中污染原因及其控制方法[J].吉林農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,35(6)：11-13