李玉芬 劉楊 劉金祿
肺炎克雷伯菌是臨床重要的條件致病菌之一,主要存在于人體上呼吸道和腸道,當(dāng)人體免疫力低下時可以引起感染[1]。近年來,隨著廣譜抗菌藥物在臨床的廣泛應(yīng)用,該菌的耐藥性日趨嚴(yán)重。特別是產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的耐藥性更廣更強。給臨床治療及醫(yī)院感染的控制帶來困難,而且已對人類的健康造成極大威脅[2]。因此,對于肺炎克雷伯菌的臨床感染分布,特別是耐藥性分析顯得尤為重要,現(xiàn)對我院2013年分離得到的267株肺炎克雷伯菌進(jìn)行分析,報道如下。
1.1 標(biāo)本來源267株肺炎克雷伯菌分離自我院住院患者臨床各科室送檢的感染性標(biāo)本,包括痰液、尿液、咽拭子、膿性分泌物、血液等。
1.2 試劑與器材 細(xì)菌鑒定及藥敏試驗采用Phoenix-100全自動細(xì)菌鑒定儀(BD公司生產(chǎn))及配套的鑒定卡BD PhoenixTM NMIC/ID-4;天津市金章科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)的一次性血瓊脂培養(yǎng)基;杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)的細(xì)菌干粉培養(yǎng)基系列麥康凱瓊脂。
1.3 培養(yǎng)及鑒定(1)細(xì)菌分離:首先涂片做革蘭染色,除血標(biāo)本外其余標(biāo)本分別接種于血平板培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)18~24 h待觀察。其中尿標(biāo)本需定量培養(yǎng)計數(shù)菌落數(shù)(cfu)>105/ml,血標(biāo)本需床旁接種于血培養(yǎng)瓶中,置全自動血液分析儀中培養(yǎng),待報陽以后去除血培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)種于血平板培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)18~24 h待觀察。(2)鑒定及藥敏:培養(yǎng)和鑒定按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》,分離出的菌落即按標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行革蘭染色,挑選麥康凱平板上隆起、大而黏液樣、粉紅色菌落,染色結(jié)果為革蘭陰性桿菌。用無菌棉簽挑選該單個菌落研磨至Phoenix-100全自動細(xì)菌鑒定儀配套的生化試劑瓶內(nèi),配制0.5麥?zhǔn)媳葷岫?,從中?5 μl加入滴加指示劑的藥敏試劑瓶中,將配好的兩瓶菌液分別加入陰性板(BD PhoenixTM NMIC/ID-4)的生化孔與藥敏孔,上機(jī)。(3)結(jié)果判定:按照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)2013年推薦的標(biāo)準(zhǔn)判讀。
1.4 質(zhì)量控制 用肺炎克雷伯菌ATCC 700603為質(zhì)控參考菌株。
1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 數(shù)據(jù)處理采用WHONET 5.6統(tǒng)計軟件分析。
2.1 科室分布2013年1月-2013年12月我院分離得出的267株肺炎克雷伯菌科室分布以神經(jīng)內(nèi)科、呼吸內(nèi)科、心血管內(nèi)科、ICU、內(nèi)分泌科等為主,分別為14.6%、12.0%、11.6%、11.2%、6.7%。見表1。
表1 267株肺炎克雷伯菌的科室分布構(gòu)成比 株(%)
2.2 標(biāo)本類型2013.01-2013.12我院分離得出的267株肺炎克雷伯菌的標(biāo)本類型以痰液標(biāo)本最多,占77.1%;其次為尿液、分泌物標(biāo)本,占10.9%、5.2%。見表2。
表2 267株肺炎克雷伯菌的標(biāo)本類型構(gòu)成比 株(%)
2.3 藥敏試驗結(jié)果267株肺炎克雷伯菌對除亞胺培南、美洛培南、阿米卡星耐藥率較低以外的16種抗生素有不同程度耐藥,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株的檢出率為19.5%;非產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株的耐藥率明顯低于產(chǎn)超廣譜 β-內(nèi)酰胺酶菌株的耐藥率。見表3。
表3 267株肺炎克雷伯菌對19種抗菌藥物的耐藥率%
近年來,肺炎克雷伯菌已經(jīng)成為醫(yī)院感染以及免疫缺陷者感染患者的重要機(jī)會致病菌,可通過患者之間的交叉感染或者人工呼吸機(jī)等相關(guān)醫(yī)療器械傳播,其在免疫力低下或者接受有創(chuàng)性診療的患者中可以引起敗血癥、肺炎、尿道或腹腔感染[3]。由表1分析可知,肺炎克雷伯菌科室分布主要在神經(jīng)內(nèi)科、呼吸內(nèi)科、心血管內(nèi)科、ICU、內(nèi)分泌科,可能由于這些科室的患者病情嚴(yán)重,免疫力水平低下、患病時間長、聯(lián)合多種藥物治療等有關(guān)[4]。由表2分析可知,肺炎克雷伯菌的標(biāo)本類型以痰液標(biāo)本為主,其次為尿液標(biāo)本,說明肺炎克雷伯菌常引起的是呼吸道感染以及泌尿系感染,于相關(guān)文獻(xiàn)[5]報道一致。
由表3分析可知,肺炎克雷伯菌對多種抗菌藥物產(chǎn)生耐藥,對我院分離出的278株肺炎克雷伯菌的19種抗菌藥物的耐藥性檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行分析可知,除亞胺培南、美洛培南、阿米卡星耐藥率偏低外,非產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株對氨芐西林、氯霉素、四環(huán)素、氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑啉、哌拉西林的耐藥率分別是73%、15.5%、14.1%、10.2%、10.8%、10.7%,其余對12種抗生素的耐藥率均低于10%,而產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株對亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率分別是3.8%、5.9%、9.8%、17.3%、25.5%,對其余14種抗生素均高于50%,甚至達(dá)100%。因此非產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株的耐藥率明顯低于產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株的耐藥率,而本院肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率為19.5%,低于劉業(yè)霞[6]報道的臨沂市沂水中心醫(yī)院的檢出率,這與不同地區(qū)、不同醫(yī)院的用藥習(xí)慣有關(guān),同時也說明我院在ESBLs陽性菌株引起的感染控制工作較好。
雖然本院肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株的檢出率較其他醫(yī)院低,但卻出現(xiàn)了3株耐碳青霉烯類菌株,其檢出率與2011年度全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)[7]報告基本一致,在前幾年未曾發(fā)生。由于產(chǎn)酶菌株的出現(xiàn)將大大增加臨床治療中的困難,因此,在臨床治療中,臨床醫(yī)生應(yīng)對細(xì)菌耐藥性引起高度重視,且必須根據(jù)藥敏結(jié)果合理、有效的選用抗菌藥物,特別是對該菌檢出率較高的科室以及易患人群。
1 劉曉平,蔡朝陽,邵小華,等.肺炎克雷伯菌耐藥性趨勢及特征性分析.蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2013,38:339-342.
2 陳瑤,韓昌洪,鮮于麗.肺炎克雷伯菌臨床感染分布及耐藥性分析.實用藥物與臨床,2010,13:229-230.
3 王曉君,應(yīng)斌松.醫(yī)院感染肺炎克雷伯菌的分布及耐藥性分析.海峽藥學(xué),2013,25:183-184.
4 楊懷德,張進(jìn)軍.臨床感染肺炎克雷伯菌耐藥性分析.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2010,1:1267-1269.
5 曲穎,蔣曉飛.醫(yī)院感染肺炎克雷伯菌的分布及耐藥性分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2011,21:5068-5071.
6 劉業(yè)霞.超廣譜β-內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌耐藥性分析.工企醫(yī)刊,2011,24:4-5.
7 張偉麗,孔海深,楊青,等.Mohnarin 2011年度報告:華北地區(qū)細(xì)菌耐藥監(jiān)測.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22:4965-4970.