TCT與傳統(tǒng)涂片在尿脫落細(xì)胞學(xué)檢測中的對比研究

李紅全 唐顓

膀胱癌是常見惡性腫瘤之一，膀胱鏡和尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查是膀胱癌早期診斷或(和)隨訪監(jiān)測的“金標(biāo)準(zhǔn)”;但膀胱鏡檢查的創(chuàng)傷性和傳統(tǒng)尿脫落細(xì)胞學(xué)的低敏感度對診斷的作用受到限制;人們對非創(chuàng)傷性或高敏感性的診斷方法越來越感興趣;液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測(thin-layer cytologital test，TCT)在婦科腫瘤篩查中廣泛應(yīng)用，大大提高婦科腫瘤細(xì)胞的檢出率和診斷的準(zhǔn)確性，但在尿液的應(yīng)用的相關(guān)文獻(xiàn)極少。本文就尿TCT制片與傳統(tǒng)涂片對腫瘤細(xì)胞的診斷價值進(jìn)行探討分析，總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2008年4月至2013年4月我院門診和住院膀胱癌疑似患者268例，其中男176例，女92例;平均年齡60.2歲;所有病例均有不同程度血尿和(或)尿頻、尿痛等與膀胱腫瘤相關(guān)的癥狀;經(jīng)膀胱鏡和組織病理學(xué)證實(shí)為膀胱惡性腫瘤68例。

1.2 儀器與試劑 Cytoprep-1離心機(jī)(長沙英泰儀器有限公司)，液基薄層細(xì)胞制片試劑(廣州江元醫(yī)療科技有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 囑患者收集早晨第二次新鮮中段尿液100 ml以上，立即送檢，連續(xù)3 d;采用配對設(shè)計(jì)方法，將每次尿液標(biāo)本分為兩份，隨機(jī)進(jìn)入TCT組和傳統(tǒng)涂片組。

1.3.2 TCT方法:將標(biāo)本置于4℃的冰箱內(nèi)10 min，輕輕倒去一部分，保留50 ml，分別置于等量的兩個離心管中，加入適量50%乙醇和冰醋酸混合溶液(1∶1)，離心5 min(2 000 r/min)，棄上清液，用吸管吸取尿沉渣，按1∶4的體積比例加入保存液，震蕩混勻后靜置10 min以上，棄清液，震蕩離心管，行TCT制片，蘇木精伊紅染色，鏡檢。

1.3.3 傳統(tǒng)涂片方法:將標(biāo)本放置于4℃的冰箱內(nèi)10 min，輕輕倒去一部分，保留50 ml，分別等量置于兩個離心管中，離心5 min(2 000 r/min)，棄上清液，用吸管吸取尿沉渣均勻涂片，潮干后置于95%乙醇固定15 min，蘇木精伊紅染色，鏡檢。

1.4 質(zhì)量評估與細(xì)胞學(xué)診斷 兩者制片質(zhì)量評估分滿意和不滿意;參照Ordon等［1］報道的標(biāo)準(zhǔn)，每張涂片以保存完好和形態(tài)清晰、上皮數(shù)量＞50個做為滿意標(biāo)準(zhǔn);診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《診斷細(xì)胞病理學(xué)》［2］，采用4級分類法，診斷結(jié)果分為無異常細(xì)胞、非典型細(xì)胞、可疑惡性細(xì)胞和惡性細(xì)胞;統(tǒng)計(jì)分析時把前兩種結(jié)果歸為陰性診斷，后兩種為陽性診斷;連續(xù)3次標(biāo)本見1次及以上陽性即為陽性;所有標(biāo)本均由同一位病理醫(yī)師診斷。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)意義。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)本滿意率 TCT標(biāo)本滿意768例次，不滿意36例次，滿意率95.5%(768/804);傳統(tǒng)涂片滿意693例次，不滿意111例次，滿意率86.2%(693/804);TCT滿意率明顯高于傳統(tǒng)涂片，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表1。

表1 TCT與傳統(tǒng)涂片標(biāo)本滿意率結(jié)果對比 例次(%)

2.2 TCT和傳統(tǒng)涂片檢查細(xì)胞學(xué)診斷結(jié)果對比

TCT檢出:惡性細(xì)胞37例，可疑惡性細(xì)胞29例，非典型細(xì)胞25例，無異常細(xì)胞177例，陽性檢出率24.6%;傳統(tǒng)涂片檢出:惡性細(xì)胞33例，可疑惡性細(xì)胞24例，非典型細(xì)胞27例，無異常細(xì)胞184例，陽性檢出率22.0%;TCT陽性檢出率高于傳統(tǒng)涂片，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表2。

表2 TCT與傳統(tǒng)涂片檢查細(xì)胞診斷結(jié)果對比 例(%)

2.3 TCT和組織病理學(xué)診斷結(jié)果 選取細(xì)胞學(xué)和組織病理學(xué)標(biāo)本均滿意，有明確診斷結(jié)果196例;TCT的敏感度 73.5%(50/68)、特異度 99.2%(127/128)。見表3。

表3 TCT與組織病理學(xué)結(jié)果對比 例(%)

2.4 傳統(tǒng)涂片和組織病理學(xué)診斷結(jié)果 選取細(xì)胞學(xué)和組織病理學(xué)標(biāo)本均滿意，有明確診斷結(jié)果196例;傳統(tǒng)涂片的敏感度為66.2%(45/68)、特異度99.2%(127/128)。見表4。

表4 傳統(tǒng)涂片與組織病理學(xué)結(jié)果對比 例(%)

3 討論

膀胱癌是最常見的惡性腫瘤之一，位居世界腫瘤第7位，發(fā)病率占癌癥總數(shù)的3.2%［3］;早期診斷比較困難［4］，膀胱鏡和尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查是診斷、隨訪監(jiān)測膀胱癌的“金標(biāo)準(zhǔn)”;但膀胱鏡檢查為創(chuàng)傷性操作，易引患者不適并可能導(dǎo)致尿路感染;尿傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)檢查雖然特異度高，但低敏感度，因此對膀胱癌診斷的作用受到一定限制;Arora等［5］報道，其敏感度為65.8%，特異度為100%;國內(nèi)葉見波等［6］報道敏感度為65%，特異度為99.3%，本研究結(jié)果尿傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)敏感度為66.2%，特異度為99.2%;與前二者報道的敏感度及特異度相近。因此人們對非創(chuàng)傷性和高敏感度的診斷方法越來越感興趣;TCT是20世紀(jì)90年代發(fā)展起來的一項(xiàng)細(xì)胞檢測新制片技術(shù)，目前廣泛用于婦科宮頸腫瘤篩查，并逐步擴(kuò)展到細(xì)胞學(xué)檢測的其他領(lǐng)域，如尿脫落細(xì)胞［6，7］;本研究結(jié)果 TCT 制片的敏感度為73.5%，高于傳統(tǒng)涂片;特異度99.2%;TCT制片與傳統(tǒng)涂片的特異度的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。Niedworok等［8］研究尿傳統(tǒng)涂片檢測對高級別尿路上皮癌的診斷敏感度3次分別為85.9%、83.6%、89.2%;國內(nèi)陳岳等［9］研究結(jié)果傳統(tǒng)涂片檢測對高級別尿路上皮癌的診斷敏感性高，低級別敏感性低;本研究結(jié)果TCT制片與傳統(tǒng)涂片兩者對高級別尿路上皮癌的敏感度都高于低級別;可能與低級別尿路上皮癌脫落的癌細(xì)胞異型性小，并且數(shù)量較少，造成診斷困難有關(guān);近年部分學(xué)者運(yùn)用尿液膀胱腫瘤標(biāo)志物(如核基質(zhì)蛋白22等)檢測證實(shí)可進(jìn)一步提高敏感度［10，11］。

TCT比傳統(tǒng)涂片敏感度高的原因如下:(1)尿脫落細(xì)胞收集方式，TCT標(biāo)本經(jīng)離心沉淀后置于專用保存液中，使細(xì)胞幾乎100%保留。(2)在細(xì)胞保存液中含有固定劑、細(xì)胞分離提取劑等成分，它不但可以除去尿中的大部分血細(xì)胞、炎性細(xì)胞及碎片等非診斷雜質(zhì)，還可以及時固定并保持尿中細(xì)胞的原始形態(tài)結(jié)構(gòu)。(3)在制片過程中，采用標(biāo)準(zhǔn)化的操作，避免手工操作的隨意性;經(jīng)過梯度離心，自然沉降等過程進(jìn)一步分離血細(xì)胞、炎性細(xì)胞等雜質(zhì);同時因病變細(xì)胞比正常細(xì)胞比重大，沉降速度快，靠細(xì)胞表面的張力均勻分布，與玻片形成穩(wěn)固的結(jié)合;因此TCT制片大大提高了對病變細(xì)胞的捕獲能力，并細(xì)胞單層排列，防止脫片或白片;(4)TCT制片的濕固定法使細(xì)胞核結(jié)構(gòu)更清晰;同時TCT制片使細(xì)胞固定在較小的范圍內(nèi)，便于閱片者觀察，不易形成視力疲勞。(5)在傳統(tǒng)制片尿中細(xì)胞不能完全保留，丟失部分診斷細(xì)胞;不能有效除去非診斷雜質(zhì)，細(xì)胞過度重疊，干擾診斷;涂片視野大，閱片者易形成視力疲勞等。

尿TCT與傳統(tǒng)制片標(biāo)本的質(zhì)量評估均暫無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn);沈周俊等［11］報道的標(biāo)準(zhǔn)為:尿涂片標(biāo)本要求保存完好，形態(tài)結(jié)構(gòu)晰，上皮數(shù)＞50個;本研究兩組標(biāo)本均參照此標(biāo)準(zhǔn)，尿傳統(tǒng)涂片的滿意度為86.2%，TCT標(biāo)本滿意度為95.5%，結(jié)果表明TCT組的滿意度明顯高于傳統(tǒng)涂片組，組間比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

綜上所述，尿TCT制片標(biāo)本滿意度和敏感度明顯高于傳統(tǒng)涂片，兩者的特異度相同;TCT在尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查中的應(yīng)用值得推廣。

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