UF-1000i尿沉渣分析儀檢測尿紅細(xì)胞和白細(xì)胞影響因素的探討

徐鋒，郭俊英

(福建醫(yī)科大學(xué)教學(xué)醫(yī)院福建省腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建 福州350014)

為適應(yīng)尿液沉渣分析儀標(biāo)準(zhǔn)化的要求，UF-1000i全自動尿沉渣分析儀綜合流式細(xì)胞原理、電阻抗法及熒光染色技術(shù)，定量檢測尿液中的有形成分。任何儀器都存在一定的檢測誤差且尿中有形成分復(fù)雜，勢必對紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測產(chǎn)生影響。但我們發(fā)現(xiàn)結(jié)晶、酵母樣菌、上皮細(xì)胞、黏液絲均導(dǎo)致儀器檢出錯誤[1]，須結(jié)合鏡檢。為此，筆者隨機(jī)抽取1258例尿標(biāo)本，比較UF-1000i和手工鏡檢結(jié)果，探討紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測的影響因素?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 隨機(jī)收集1258例住院患者尿標(biāo)本。

1.2 儀器和試劑 UF-1000i全自動尿沉渣分析儀，配套試劑及質(zhì)控物，均購自日本Sysmex株式會社。日本Olympus顯微鏡和一次性專用尿沉渣計(jì)數(shù)板。

1.3 檢測方法 用一次性塑料尿杯收集新鮮晨尿分成兩管，每管10ml，一管用于UF-1000i尿沉渣分析儀檢測，另一管以1500r/min離心5min，棄上清液，留 0.2ml,混勻后，取20μl滴入尿沉渣計(jì)數(shù)板，先用低倍鏡觀察全片，再用高倍鏡計(jì)數(shù)有形成分。所有標(biāo)本均在2h內(nèi)檢測完畢。正常參考值：UF-1000i：紅細(xì)胞<25.0 個(gè)/μl、白細(xì)胞<25.0 個(gè)/μl；顯微鏡鏡檢：紅細(xì)胞<3個(gè)/HP,白細(xì)胞<5個(gè)/HP。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。兩種方法檢測陽性率比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 UF-1000i和手工鏡檢檢測紅細(xì)胞和白細(xì)胞結(jié)果比較 以鏡檢為標(biāo)準(zhǔn)，1258例樣本中UF-1000i檢測紅細(xì)胞陽性率、真陽性率、假陽性率分別為24.8%、57.6%、42.4%；白細(xì)胞陽性率、真陽性率、假陽性率分別為17.4%、74.8%、25.2%；手工鏡檢紅細(xì)胞、白細(xì)胞陽性率分別為15.0%、13.3%，兩種方法檢測紅細(xì)胞和白細(xì)胞陽性率經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 UF-1000i和手工鏡檢檢測紅細(xì)胞和白細(xì)胞結(jié)果比較

2.2 UF-1000i檢測紅細(xì)胞和白細(xì)胞假陽性結(jié)果影響因素分析 紅細(xì)胞假陽性增高：草酸鈣結(jié)晶占60.6%、非晶型鹽類占23.4%、酵母樣菌占16.0%；白細(xì)胞假陽性增高：腎小管上皮細(xì)胞占87.3%，細(xì)菌占12.7%，見表2。

表2 UF-1000i檢測紅細(xì)胞和白細(xì)胞假陽性結(jié)果影響因素

2.3 UF-1000i檢測紅細(xì)胞和白細(xì)胞假陰性結(jié)果影響因素分析 紅細(xì)胞假陰性增高：小紅細(xì)胞占66.7%、影細(xì)胞占33.3%；白細(xì)胞假陰性增高：尿潴留時(shí)間過長占75.0%、黃疸占25.0%，見表3。

表3 UF-1000i檢測紅細(xì)胞和白細(xì)胞假陰性結(jié)果影響因素

3 討論

尿液有形成分檢查是尿液分析中不可缺少的重要內(nèi)容，UF-1000i尿沉渣分析儀因其無離心、簡單快速、重復(fù)性好、提供定量結(jié)果等優(yōu)點(diǎn)，在臨床廣泛應(yīng)用[2]。但由于儀器本身的局限，如不能識別病理結(jié)晶、病理管型的具體類別及腫瘤細(xì)胞，當(dāng)尿中有大量結(jié)晶、酵母樣菌、黏液絲等顆粒，常干擾檢測結(jié)果[3]。本研究表明，UF-1000i檢測尿紅細(xì)胞和白細(xì)胞存在假陽性或假陰性，主要的原因是尿中有形成分的干擾。

引起UF-1000i檢測尿紅細(xì)胞假陽性的因素是尿中有大量的結(jié)晶(主要是草酸鈣結(jié)晶)、非晶型鹽類、酵母樣菌。因紅細(xì)胞形態(tài)、大小、染色與結(jié)晶(尤其是草酸鈣結(jié)晶)、非晶型鹽類相似，在散點(diǎn)圖上有交叉分布，因此紅細(xì)胞計(jì)數(shù)呈假陽性增高[4]。酵母樣菌影響紅細(xì)胞的原因可能由于其在散點(diǎn)圖上分布介于RBC和WBC之間，雖然大部分情況下儀器可以區(qū)分酵母樣菌與紅細(xì)胞，但仍有和紅細(xì)胞重疊的情況，導(dǎo)致儀器分析錯誤[5]。引起UF-1000i檢測尿紅細(xì)胞假陰性的因素是紅細(xì)胞高度異形性，如小紅細(xì)胞和影細(xì)胞等。

引起UF-1000i檢測尿白細(xì)胞假陽性的原因主要為腎小管上皮細(xì)胞、細(xì)菌。因?yàn)榘准?xì)胞的散射光、熒光強(qiáng)度及電阻抗信號，部分與腎小管上皮細(xì)胞重疊，而且白細(xì)胞大小、染色敏感度與腎小管上皮細(xì)胞相似，因此導(dǎo)致白細(xì)胞假陽性結(jié)果的增多[6]。由于染料對細(xì)菌膜的滲透性低，染色后熒光強(qiáng)度和前向散射光強(qiáng)度也較低，當(dāng)尿中的細(xì)菌達(dá)到一定量時(shí)，相互聚集成團(tuán)，其大小與白細(xì)胞相近，導(dǎo)致儀器誤認(rèn)為白細(xì)胞。本研究僅有4例白細(xì)胞檢測假陰性，其中3例是尿液在膀胱潴留時(shí)間過長導(dǎo)致白細(xì)胞破壞，1例為黃疸標(biāo)本，可能是由于膽紅素的顏色干擾白細(xì)胞的檢測[7]。

本文儀器法假陽性是相對于鏡檢法的陰性而言，而鏡檢法的結(jié)果相對于真實(shí)結(jié)果是存在假陰性的可能，只是非常少見，如尿中紅細(xì)胞和白細(xì)胞完全溶解時(shí)，鏡檢是看不到的，此時(shí)鏡檢法的陰性即為相對于真實(shí)結(jié)果的假陰性。當(dāng)紅細(xì)胞和白細(xì)胞完全溶解時(shí)，UF-1000i是否能檢測到尿中兩者存在，對此問題有待進(jìn)一步研究。

引起UF-1000i與手工鏡檢不符的原因主要是方法學(xué)差異。UF-1000i檢測未離心標(biāo)本，檢測量為800μl，且線性范圍寬，而手工鏡檢為離心標(biāo)本，鏡檢量小于200μl，以及檢驗(yàn)人員主觀經(jīng)驗(yàn)等都導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)偏低。因此，出現(xiàn)UF-1000i檢測陽性而手工鏡檢陰性的情況。

綜上所述，UF-1000i尿沉渣分析儀是目前用于測定尿液有形成分的先進(jìn)儀器，由于檢測結(jié)果假陽性或假陰性的客觀存在，因此，必須結(jié)合手工鏡檢，以確保尿液紅細(xì)胞、白細(xì)胞檢測結(jié)果的可靠。

[1]李炎鑫,鐘亞玲.UF-100尿沉渣分析儀不能取代鏡檢[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2005,23(2):156.

[2]王鴻利.實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:115-117.

[3]顧可梁.尿液有形成分的識別與檢查方法的選擇[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(6):572.

[4]張倩春,李亞鵬.UF-1000i尿沉渣分析儀檢測尿中紅細(xì)胞形態(tài)的臨床意義[J].臨床醫(yī)學(xué),2009,29(7):75-77.

[5]李一龍.UF-100尿沉渣儀紅細(xì)胞測定質(zhì)量探討及對策[J].檢驗(yàn)與臨床,2009,47(31):89-90.

[6]陳小劍,陳文亥,金勝鑫,等.UF-100全自動尿沉渣儀白細(xì)胞檢測影響因素探討[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2004,22(6):519-520.

[7]秦桂娥,靳巖.UF-100尿沉渣分析儀影響因素探討[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,27(10):935-937.