磺胺噻唑在山羊體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)研究

翟新貴，張有亮，趙 彪，馬丙婷，孫 睿，李引乾

(1 西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西 楊凌 712100；2 鶴壁職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南 鶴壁 458030)

磺胺噻唑(Sulfathiazole，ST)是一種常用的磺胺類藥物，其抗菌和預(yù)防動(dòng)物細(xì)菌感染的作用較強(qiáng)[1]，在獸醫(yī)臨床上主要用于治療敏感細(xì)菌引起的肺炎、出血性敗血癥、子宮內(nèi)膜炎以及禽巴氏桿菌病、雛雞白痢等[2]?；前粪邕蛴捎谠隗w內(nèi)的血漿蛋白結(jié)合率和乙?；潭染^高，其毒性與體內(nèi)的代謝產(chǎn)物、代謝途徑及酶的多態(tài)性有關(guān)[3-4]，易產(chǎn)生結(jié)晶尿，對(duì)腎臟有一定的損害，原農(nóng)牧漁業(yè)部曾于1982年發(fā)文將該藥淘汰。但由于該藥廉價(jià)易得，抗菌作用較強(qiáng)，臨床治療效果好，排泄速度快[5]，隨后農(nóng)業(yè)部又發(fā)文恢復(fù)了該藥的使用，截止目前，有關(guān)該藥在動(dòng)物體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究鮮見報(bào)道。不同的磺胺類藥物在不同種屬動(dòng)物體內(nèi)的代謝情況存在明顯差異性[6]，另外即使同一種磺胺藥物，其在不同種類動(dòng)物體內(nèi)的代謝過程也有顯著差異，且部分磺胺類藥物的體內(nèi)氮乙?；x存在明顯的遺傳多態(tài)性[7-8]，無法只根據(jù)其他磺胺類藥物在某一種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人上的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，為獸醫(yī)臨床用藥制訂合理的給藥方案。本試驗(yàn)研究了磺胺噻唑在山羊體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)特征，以期為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 試驗(yàn)動(dòng)物為6只健康成年山羊(公母各半)，體質(zhì)量為(28.5±2.65) kg/只，試驗(yàn)期間常規(guī)飼養(yǎng)，近期無用藥史，臨床健康。

1.1.2 供試藥品與試劑 供試藥品：磺胺噻唑?qū)φ掌?，中?guó)食品藥品檢定研究院提供，批號(hào)：201214；磺胺噻唑鈉(ST-Na)注射液，規(guī)格為5 mL∶0.5 g，重慶方通動(dòng)物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20120901。

試劑：三氯醋酸，AR級(jí)，上海三浦化工有限公司，批號(hào)：20001022；亞硝酸鈉，西安化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20000115；氨基磺酸銨，AR級(jí)，上海恒信化學(xué)試劑有限公司，批號(hào):20001028；α-萘乙二胺，瑞士產(chǎn)品；無水乙醇，AR級(jí)，成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)：20130401。

1.1.3 儀器設(shè)備 紫外可見光光度計(jì)，德國(guó)耶拿公司； JA1003天平，上海天平儀四廠。

1.2 磺胺噻唑紫外測(cè)定方法的建立

1.2.1 磺胺噻唑紫外測(cè)定波長(zhǎng)的確定 配制質(zhì)量濃度為100 g/L的磺胺噻唑?qū)φ掌窐?biāo)準(zhǔn)液，在200～800 nm波長(zhǎng)進(jìn)行紫外掃描，記錄紫外吸收?qǐng)D譜，以其最大吸收波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 使用磺胺噻唑?qū)φ掌放渲?.5，5.0，10.0，25.0，50.0，100.0，200.0，250.0和400.0 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)液，以確定的最大吸收波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，分別測(cè)定其吸光度，以吸光度對(duì)濃度進(jìn)行線性回歸，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.3 回收率試驗(yàn) 用磺胺噻唑?qū)φ掌放渲?0，25和100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定其中磺胺噻唑的含量，使用添量法進(jìn)行回收率試驗(yàn)。

1.2.4 精密度試驗(yàn) 用磺胺噻唑?qū)φ掌放渲?0，25和100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定磺胺噻唑含量，日內(nèi)平行測(cè)定3次，計(jì)算日內(nèi)精密度；隔日平行測(cè)定3次，計(jì)算日間精密度。

1.3 山羊血藥濃度測(cè)定

試驗(yàn)羊只按照70 mg/kg的劑量靜脈快速推注磺胺噻唑鈉注射液，于給藥前(空白血樣)和給藥后5，10，15，30，45，60，120，180，240和300 min分別頸靜脈采血5 mL/只，取2 mL血液進(jìn)行處理，按Annino[9]的方法，用紫外可見光光度計(jì)于磺胺噻唑的最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算血液中的游離磺胺噻唑濃度，全部樣品當(dāng)日測(cè)完。

1.4 藥物動(dòng)力學(xué)分析

用殘數(shù)法擬合藥-時(shí)曲線[10]，逐只山羊用F檢驗(yàn)優(yōu)選模型計(jì)算磺胺噻唑的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 磺胺噻唑測(cè)定方法的建立

2.1.1 最大紫外可見光吸收波長(zhǎng)的確定 將磺胺噻唑標(biāo)準(zhǔn)液在200～800 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行全波段掃描，結(jié)果(圖1)顯示，磺胺噻唑在558 nm處有最大吸收峰，因此確定558 nm 作為磺胺噻唑的吸收波長(zhǎng)。

圖1 磺胺噻唑紫外掃描圖譜

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行回歸分析，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖2),得到的線性回歸方程為：y=0.005 4x+0.085 9，R2=0.994 7，n=9。式中：y為磺胺噻唑溶液在558 nm下的吸光度，x為磺胺噻唑的質(zhì)量濃度。由此可見，在0～400 μg/mL，磺胺噻唑溶液吸光度與其質(zhì)量濃度之間線性關(guān)系良好。

2.1.3 回收率試驗(yàn)結(jié)果 回收率測(cè)定結(jié)果見表1。由表1可見，該方法磺胺噻唑的平均回收率為(98.45±1.16)%，變異系數(shù)為1.37%，表明該方法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確穩(wěn)定。

2.1.4 精密度試驗(yàn)結(jié)果 精密度試驗(yàn)結(jié)果見表2和表3。表2、表3顯示，磺胺噻唑紫外測(cè)定方法的日內(nèi)精密度為0.4%，日間精密度為2.14%，表明該方法穩(wěn)定性較好，準(zhǔn)確度較高。

圖2 磺胺噻唑溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線

表1 磺胺噻唑紫外測(cè)定方法回收率試驗(yàn)結(jié)果

表2 磺胺噻唑紫外測(cè)定方法的日內(nèi)精密度

表3 磺胺噻唑紫外測(cè)定方法的日間精密度

2.2 山羊體內(nèi)磺胺噻唑血藥濃度的測(cè)定

6只山羊靜脈推注70 mg/kg磺胺噻唑鈉后，不同時(shí)間的血藥濃度見表4。

表4 山羊靜脈推注磺胺噻唑鈉(70 mg/kg)后的血藥濃度

根據(jù)表4結(jié)果，采用殘數(shù)法[10]擬合藥-時(shí)曲線，經(jīng)F檢驗(yàn)表明，藥-時(shí)曲線符合二室模型，其最佳方程為:y=366.38e-17.52x+198.37e-0.82x。 式中：y為血中磺胺噻唑鈉質(zhì)量濃度，x為用藥后時(shí)間。

2.3 磺胺噻唑在山羊體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，使用3P87藥動(dòng)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，所得藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表5。

表5 磺胺噻唑鈉在山羊體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

3 討 論

磺胺類藥物的消除速率與其血漿蛋白結(jié)合率及腎小管的重吸收有關(guān)，血漿蛋白結(jié)合率和腎小管的重吸收都與藥物的解離常數(shù)及油水分配系數(shù)等理化常數(shù)有關(guān)[11]。以磺胺間甲氧嘧啶為例，其在綿羊體內(nèi)血漿中的消除相半衰期為2 h[12]；其對(duì)兔為短效藥物，靜脈注射的消除相半衰期為1.7 h[13]或2.06 h[14]；禽類經(jīng)口給藥后在血漿中的消除相半衰期為9.57 h[15]?；前粪邕?qū)θ耸情L(zhǎng)效藥物，口服的消除相半衰期為36～48 h[16]，但對(duì)家畜并非長(zhǎng)效，且隨動(dòng)物種屬的不同差異很大，在山羊體內(nèi)的分布相半衰期為0.05 h，消除相半衰期為0.89 h。

藥物表觀分布容積(Vd)的本質(zhì)為給藥劑量(體內(nèi)藥量)與血藥濃度的比值，它標(biāo)志著藥物在血流以外組織分布能力的大小，其值與血漿蛋白結(jié)合率有關(guān)，也與藥物的油水分布系數(shù)有關(guān)[17]，水溶性或極性大的化合物，因其水溶性較大或與血漿蛋白結(jié)合率較高，不易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)或脂肪組織中，其Vd值較小。據(jù)文獻(xiàn)記載,在山羊體內(nèi)磺胺嘧啶的Vd值為(0.85±0.17) L/kg[18]，磺胺-6-甲氧嘧啶的Vd值為0.39 L/kg[19]，本試驗(yàn)測(cè)得磺胺噻唑的Vd值為(0.15±0.07) L/kg，說明磺胺噻唑在山羊體內(nèi)的離子化程度較高，排泄速度較快。

文獻(xiàn)中，磺胺類藥物的代謝動(dòng)力學(xué)多為一室開放模型[20]。本試驗(yàn)中磺胺噻唑在山羊體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)符合二室開放模型，這說明磺胺噻唑的動(dòng)力學(xué)模型對(duì)動(dòng)物有種屬差異。根據(jù)測(cè)定結(jié)果，磺胺噻唑在山羊體內(nèi)的分布相半衰期為(0.05±0.04) h，消除相半衰期為(0.89±0.21) h，維持有效濃度時(shí)間為1.58 h，說明磺胺噻唑在山羊體內(nèi)為短效藥物。

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