胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白—3(IMP3)在婦科腫瘤中的應用

聶佳，章麗霞，劉鈞

(1.川北醫(yī)學院病理教研室；2．川北醫(yī)學院法醫(yī)學系，四川 南充 637000)

分子標記物是腫瘤診斷的一個重要依據(jù)，尤其是免疫組化技術的成熟，將新型分子標記物的發(fā)現(xiàn)與研究炙熱化。隨著IMP3的發(fā)現(xiàn)與克隆，其在基因及蛋白層面的研究成為腫瘤領域的一個熱點。近年來發(fā)現(xiàn)IMP3在多種惡性腫瘤中表達，并可能參與判斷腫瘤的惡性程度及預后。目前的研究主要集中在IMP3的表達特異性、作用機制，本文就IMP3在子宮頸癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌等婦科惡性腫瘤中的進展做一歸納，以期為IMP3的后續(xù)研究起一個總結(jié)指引作用。

1 IMP3結(jié)構(gòu)與功能

胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA 結(jié)合蛋白3(insulin-like growth factor Ⅱ mRNA binding protein 3，IMP3或IGF2BP3或KH-domain containing protein，KOC，又名L523S，)是高度保守VICKZ(Vg1 RBP/Vera，IMP-1，2，3，CRD-BP，KOC，ZBP-1)家族中的一員[1]，1997年克隆出該基因。 IMP3基因定位于染色體7p11.5，包含580個氨基酸殘基，其表達的蛋白與胰島素樣生長因子Ⅱ(insulin-like growth factorⅡ，IGFⅡ)的多種轉(zhuǎn)錄物mRNA特異性結(jié)合，調(diào)控IGFⅡmRNA的定位、穩(wěn)定、反轉(zhuǎn)錄和翻譯。在人和鼠的胚胎階段，IMP3高度表達于生長中的上皮、肌肉、胎盤組織，而在正常成人組織中僅局限于胎盤、淋巴結(jié)生發(fā)中心[2]。近年來，大量研究證實[3-8]，IMP3也表達于多種惡性腫瘤，如肺非小細胞癌、肺神經(jīng)內(nèi)分泌癌、肺外小細胞癌、肝細胞癌、膽管癌、轉(zhuǎn)移性胰腺癌、惡性間皮瘤、腎細胞癌、子宮內(nèi)膜樣腺癌、結(jié)直腸癌、甲狀腺濾泡癌、尿路移行細胞癌、黑色素瘤等，但IMP3在腫瘤旁組織或正常組織中表達極低或不表達。因此，認為IMP3是一種腫瘤胚胎蛋白，有可能成為腫瘤治療潛在靶點。

雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)高表達于乳腺，乳腺癌的檢測也以ER、PR作為其分子標記物[9]。Samanta等[10]發(fā)現(xiàn)IPM3的表達與雌激素受體ER密切相關，IMP3高表達是癌細胞浸潤、轉(zhuǎn)移的首要跡象。因此，我們推測，IMP3在乳腺、子宮、卵巢等雌激素受體分布密度較高的區(qū)域，通過某種通路調(diào)控mRNA，從而引起癌癥的發(fā)生。

2 IMP3與婦科腫瘤

2.1 子宮頸癌

子宮頸癌是一個全球性的健康問題，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，嚴重威脅婦女健康和生命。已有研究證實，高危型人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)16和18型是引起大多數(shù)宮頸癌的主要致病因素，預防HPV感染和早期診斷治療宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasias，CIN)是預防宮頸癌發(fā)生的重要措施[11]。對于不可改變地進展為宮頸癌群體，盡早準確診斷尤為重要。長期以來，診斷宮頸癌的方法在不斷推陳出新，從巴氏涂片、陰道鏡檢查、宮頸活體組織檢查、宮頸脫落細胞學篩查到免疫組織化學、液基薄層細胞學檢查(liquid-based cytologic test，LCT)、HPV檢測篩查宮頸癌等。即便如此，子宮頸癌的早期診斷率仍然較低，迫切需要尋找更多更可靠的腫瘤特異性生物學標志物協(xié)助診斷并指導臨床治療。對子宮頸內(nèi)膜腺體良惡性病變的鑒別，已有一些生物標記物成熟地運用于臨床，如Ki-67、p16、CEA、CA12-5等[12-13]，同時類似IMP3等新近發(fā)現(xiàn)的指標也在不斷被研究，用以提高診斷準確率[14]。

Li等[15]利用免疫組化方法研究了44例宮頸原位腺癌和23例宮頸良性病變中IMP3的表達情況，結(jié)果顯示宮頸原位腺癌陽性表達率高達93.18%(41例陽性表達)，而23例宮頸良性病變的腺體均為陰性。因此，推測IMP3可作為鑒別宮頸原位腺癌和良性宮頸病變的生物標記物。Las等[16]選取了34例宮頸液基細胞(liquid-based cytology，LBC)檢查診斷為AGUS(atypical glandular cells )的細胞學標本，對它們進行IMP3 免疫組織化學檢查，研究結(jié)果顯示80% 病例IMP3表達陽性，這些病例在隨后的活體組織檢查診斷為上皮內(nèi)瘤變。這項研究提示在TCT中IMP3表達陽性的病例有后期活檢的必要，這在一定程度上排除了IMP3陰性病例的活檢必要性，同時證實IMP3可作為區(qū)別宮頸腺上皮瘤變與良性病變的一種潛在標記物。最近一項研究[17]，用免疫組織化學分析IMP3在正常宮頸組織、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和浸潤性癌的表達陽性率分別為0%、0%、1%、18%、96%，且在宮頸鱗狀細胞癌高表達。用細胞遷移、增殖試驗、PCR、Western blot等證實，IMP3局限性表達于LSIL(Low-grade Squamous Intraepithelial Lesion)和HSIL(High-grade Squamous Intraepithelial Lesion)，差異性表達于癌變的鱗狀上皮和腺上皮。推測IMP3可作為一種標志物檢測宮頸鱗狀細胞癌，并可以預測有惡變潛能的上皮內(nèi)瘤變。

2.2 子宮內(nèi)膜癌

子宮內(nèi)膜癌也是常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，據(jù)美國癌癥協(xié)會統(tǒng)計數(shù)據(jù)，宮內(nèi)膜癌的致死率在所有婦科腫瘤中居第五位[18]，不可小視。根據(jù)發(fā)病機制的差異，分兩大類腫瘤，即Ⅰ型雌激素依賴性腫瘤(子宮內(nèi)膜樣腺癌)和Ⅱ型非雌激素依賴性腫瘤(包括漿液性腺癌、透明細胞癌等)[19]，Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率高、細胞分化較好、預后好；而Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌雖然發(fā)病率低，但細胞分化差，通常臨床發(fā)現(xiàn)晚，常伴轉(zhuǎn)移，死亡率高，故對其診斷上的研究尤為重要，以便早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療。楊清等[20]通過免疫組化法檢測20例正常子宮內(nèi)膜組織、10例不典型增生子宮內(nèi)膜、40例子宮內(nèi)膜樣癌的IMP3表達情況，結(jié)果顯示宮內(nèi)膜樣腺癌的陽性率明顯高于其余兩種，并且隨癌組織的分化程度降低，表達水平增高。而Mhawech等[21]搜集了401例活體組織檢查證實為子宮內(nèi)膜癌的病例，采用免疫組化檢測ER、PR、腸三葉因子(intestinal trefoil factor3，TFF3)、IMP3四項指標的陽性表達率。發(fā)現(xiàn)ER、PR、TFF3在子宮內(nèi)膜樣腺癌(endometrioid adenocarcinoma，EACs)多為陽性(P<0.001)，IMP3則更頻繁地表達在子宮內(nèi)膜漿液性腺癌(uterine serous carcinoma，USCs)和宮內(nèi)膜透明細胞癌(clear cell carcinoma，CCCs)(P<0.001)。因此，他們認為IMP3在內(nèi)的四項指標對宮內(nèi)膜癌類型的區(qū)分有很重要的意義。Zheng等[22]也通過免疫組化SP法研究298例子宮內(nèi)膜IMP3的表達，其中包括68例良性宮內(nèi)膜、35例上皮內(nèi)瘤變、21例內(nèi)膜發(fā)育不良、18例上皮內(nèi)癌、8例粘液性癌、51例漿液性癌、12例透明細胞癌、5例其他來源惡性腫瘤。結(jié)果發(fā)現(xiàn)3例子宮內(nèi)膜腺體發(fā)育不良、16例粘液性上皮內(nèi)癌、48例漿液性癌、3例透明細胞癌為陽性表達，不難得出IMP3可用于癌前評估及輔助部分類型子宮內(nèi)膜癌診斷的結(jié)論，尤其是獲取組織量過少，活檢難以明確時，起到?jīng)Q定性作用。由此可見，IMP3在哪種類型的子宮內(nèi)膜癌表達較高存在不同觀點，可使用不同的檢測方法加以明確。需要注意的是，由于IMP3高表達于滋養(yǎng)層細胞及絨毛組織，故在診斷子宮內(nèi)膜癌時要特別注意排除妊娠。

2.3 卵巢癌

卵巢癌是一種死亡率和復發(fā)率極高的惡性腫瘤，在婦科腫瘤中居于首位[23]。由于卵巢位置較深，癌變時臨床癥狀出現(xiàn)晚，故早期診斷率較低。發(fā)現(xiàn)時通常到了晚期，錯過了最佳治療時期，即便積極手術、放化療，五年生存率僅接近10%[24]。并有研究報道稱卵巢癌可逾越血腦屏障發(fā)生腦轉(zhuǎn)移[25]。到目前為止，卵巢癌的發(fā)病原因、機制仍不明確，百家爭鳴，各持一說，同樣的也沒有一種用于早期篩查的臨床檢查手段，對卵巢癌的探索任重道遠。IMP3作為一種較新的生物標志物，在卵巢癌的研究文獻少見。

郭聰敏等[26]搜集大連婦產(chǎn)醫(yī)院2002年至2008年進行手術治療的卵巢透明細胞癌(ovarian clear cell cancer，OCCC)病理標本44例，用免疫組化SP法檢測IMP3在腫瘤組織中的表達。結(jié)果顯示30例OCCC胞漿著色，表達率68%，與對照組的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。并隨臨床分期，表達強度呈上升趨勢。于是推測IMP3是OCCC發(fā)生發(fā)展過程中的一個基因，并可作為一項腫瘤標記物用于診斷和判斷預后。IMP3作為OCCC標志物的相關研究，國外也有報道。Kob等人對475例不同亞型的卵巢癌用免疫組化法檢測其表達，并調(diào)查病例的生存率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)IMP3是卵巢癌預后不良的一種獨立因素[27]。

2.4 妊娠滋養(yǎng)細胞腫瘤

妊娠滋養(yǎng)細胞腫瘤是一類源于胎盤滋養(yǎng)細胞的腫瘤，包括上皮樣滋養(yǎng)細胞腫瘤(包括葡萄胎和侵蝕性葡萄胎)、妊娠絨毛膜癌和胎盤部位滋養(yǎng)細胞腫瘤，共同特征為滋養(yǎng)層細胞異常增生。一直以來，都是以人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin HCG)作為臨床診斷、隨訪觀察、評價療效的指標。單由HCG來判斷滋養(yǎng)層細胞腫瘤被發(fā)現(xiàn)有很多弊端，諸如HCG假陰性表現(xiàn)[28]、各地檢測HCG方法的差異、病人隨訪的依從性高低等。不妨尋找一種標記物予以補充，以利于疾病的監(jiān)測。張梅娜等[29]選取200例葡萄胎首次清宮患者的石蠟標本，分HCG>2×105mIU/mL和HCG<2×105mIU/mL兩組，各100例，用免疫組化法檢測IMP3的表達情況。結(jié)果顯示，在HCG>2×105mIU/mL組陽性率為90%，HCG<2×105mIU/mL組陽性率78%，兩組比較有統(tǒng)計學差異。同時，對兩組病例統(tǒng)一進行后期隨訪，發(fā)展為侵蝕性葡萄胎的病例IMP3陽性率高，差異有統(tǒng)計學意義。表明IMP3表達與HCG濃度具有一致性，同時IMP3也具有預測葡萄胎發(fā)展為侵蝕性葡萄胎的生物學標志潛能。

2.5 平滑肌肉瘤

子宮平滑肌肉瘤具有臨床癥狀不典型，早期診斷困難，容易轉(zhuǎn)移、治愈率低等特點，對人群危害較高。有學者認為，這種惡性腫瘤的發(fā)生及患者生存率與雌孕激素受體的表達相關[30]。因此我們有必要考慮，IMP3是否參與其中，目前，IMP3與平滑肌肉瘤之間的關系少有研究，具體作用機制也不明確。Cor等[31]提出IMP3可以作為平滑肌腫瘤的一種生物標志物，當然包括子宮平滑肌肉瘤。他們收集了216例手術病例(82例子宮平滑肌肉瘤、62例平滑肌瘤、72例子宮平滑肌瘤變異型)，對這些病例用免疫組化的方法檢測IMP3的表達情況。結(jié)果顯示43例子宮平滑肌肉瘤和3例子宮平滑肌瘤變異型為陽性表現(xiàn)，其余均為陰性。推測出IMP3可作為子宮及其他平滑肌肉瘤的一種標志物，用于肉瘤的鑒別診斷?，F(xiàn)有可作為平滑肌瘤標記物的有P16、Ki-67、P53、CA125等，必要時聯(lián)合幾種以提高診斷準確率。IMP3是否有加入診斷標記的必要，需要后續(xù)研究支持猜測。

3 問題與展望

在積極摸索IMP3可否大范圍用于臨床診斷的過程中也存在很多問題，比如IMP3是否對宮頸鱗癌、腺癌都有診斷價值；在非雌激素依賴性子宮內(nèi)膜腫瘤高表達，還是在雌激素依賴性子宮內(nèi)膜腫瘤中高表達，存在爭議；是否特異性表達于卵巢透明細胞癌，從而區(qū)別于其他組織學類型的卵巢癌；與哪些指標或方法聯(lián)合使用能最大限度地提高腫瘤診斷效價比；明確IMP3在腫瘤組織中高表達的機制，在其作用路徑上給予適當干擾，是否可以成為腫瘤治療新靶點。這都需要我們在現(xiàn)有的基礎上繼續(xù)研究。

目前的金標準——病理活體組織檢查，對于一小部分的高級別上皮內(nèi)瘤變和惡性腫瘤很不容易區(qū)分，特別是獲取組織過少時，沒辦法明確診斷。再者，組織鉗取過程中存在擠壓、灼燒等因素，導致細胞變形。從取材、固定、石蠟包埋到切片、染色等后期處理中，如果不是特別精細，也會隱藏很多問題，從而限制準確地診斷。在這種情況下，使用分子標記物區(qū)分腫瘤良惡性，判斷腫瘤來源、侵襲能力、預后等有著非常大的優(yōu)勢。目前IMP3作為腫瘤標志物，主要為回顧性研究，受臨床資料的限制，前瞻性實驗還有待深入，在以后的研究中，可以采取新穎的實驗方法明確IMP3的作用機制，使這種標志物更好地在臨床應用。

【參考文獻】

[1] Yisraeli JK．VICKZ proteins：a multi-talented family of regulatory RNA-binding proteins[J].Biology of the Cell，2005，97(1)：87-96.

[2] Vikesaa J，Hansen TV，J?nson L，et al．RNA-binding IMPs promote cell adhesion and invadopodia formation[J].EMBO Journal，2006，25(7)，1456-1468.

[3] Findeis-Hosey JJ，Xu H．The use of insulin like-growth factor II messenger RNA binding protein-3 in diagnostic pathology[J].Human Pathology，2011，42(3)：303-314.

[4] Wachter DL，Kristiansen G，Soll C，et al．Insulin-like growth factor Ⅱ mRNA-binding protein 3(IMP3)expression in hepatocellular carcinoma．A clinicopathological analysis with emphasis on diagnostic value[J].Histopathology，2012，60(2)：278-286.

[5] Zhong Jiang，Lohse Christine M，Chu Peigou G．，et al．Oncofetal protein IMP3 ：A novel molecular marker that predicts metastasis of papillary and chromophobe renal cell carcinomas[J].CANCER，2008，112(12)：2676-2682.

[6] Beljan Perak R，Durdov MG，Capkun V，et al．IMP3 can predict aggressive behaviour of lung adenocarcinoma[J].Diagn Pathol，2012，7(1)：165.

[7] Lee DJ，Xylinas E，Rieken M，et al．Insulin-like Growth Factor Messenger RNA-binding Protein 3 Expression Helps Prognostication in Patients with Upper Tract Urothelial Carcinoma[J].Eur Urol，2013，25．[Epub ahead of print]

[8] Yu L，Xu H，Wasco MJ，et al.，IMP-3 expression in melanocytic lesions[J].J Cutan Pathol，2010，37(3)：316-322

[9] 趙江濤，胡大為．120例乳腺癌中ER、PR、P53、HER-2、TOPⅡ表達及臨床意義[J].川北醫(yī)學院學報，2012，27(3)：213-215

[10] Samanta S，Sharma VM，Khan A，et al．Regulation of IMP3 by EGFR signaling and repression by ERβ：implications for triple-negative breast cancer[J].Oncogene，2012，31(44)：4689-4697

[11] Du H，Wu，RF，Tang HR，et al．Investigation on the prevalence of high risk human papillomavirus and cervical cancer among adult women，in Shenzhen[J].Zhonghua liuxingbingxue zazhi，2012，33(8)：799-802

[12] Ikenberg H，Bergeron C，Schmidt D，et al．Screening for cervical cancer precursors with p16/Ki-67 dual-stained cytology：results of the PALMS study[J].J Natl Cancer Inst，2013，105(20)：1550-1557

[13] 戴偉萍．腫瘤標記物CEA、CA125在宮頸癌中的檢測價值分析[J].中外醫(yī)學研究，2013，1(4)：68-69

[14] Danialan R，Assaad M，Burghardt J，et al．The utility of PAX8 and IMP3 immunohistochemical stains in the differential diagnosis of benign，premalignant，and malignant endocervical glandular lesions[J].Gynecol Oncol， 2013，130(2)：383-388

[15] Li C，Rock KL，Woda BA，et al．IMP3 is a novel biomarker for adenocarcinoma in situ of the uterine cervix：an immunohistochemical study in comparison with p16(INK4a)expreasion[J].ModPathol，2007，20(2)：242-247

[16] Lastra RR，Ou JJ，Reilly ME，et al．Utility of ProExC and IMP3 immun-ocytochemical staining in atypical glandular cells of undetermined significance in liquid-based cervical cytology[J].Diagnostic Cytopathology，2013 Aug 1．doi：10.1002/dc.23029.

[17] Lu D，Yang X，Jiang NY．IMP3，a New Biomarker to Predict Progression of Cervical Intraepithelial Neoplasia Into Invasive Cancer[J].Am J Surg Pathol， 2011，35(11)：1638-1645

[18] Siegel R，Naishadham D，Jemal A．et al．Cancer statistics，2013[J].CA Cancer J Clin，2013，63(1)：11-30

[19] Tavassoli FA, Peter Devilee.乳腺及女性生殖器官腫瘤病理學和遺傳學(WHO2003)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：272-290.

[20] 楊清，畢芳芳，劉冬玲．IMP-3在不同病變子宮內(nèi)膜組織中的表達及臨床意義[J].生物技術通訊，2013，24(1)：91-93.

[21] Mhawech-Fauceglia P，Yan L，Liu S，et al．ER+/PR+/TFF3+/IMP3_ immuno-profile distinguishes endometrioid from serous and clear cell carcinomas of the endometrium：a study of 401 cases[J].Histopathology，2013，62(7)：976-985.

[22] Zheng W，Yi X，F(xiàn)adare O，et al．The oncofetal protein IMP3：a novel biomarker for endometrial serous carcinoma[J].Am J Surg Pathol，2008，32(2)：304-315.

[23] Weroha SJ，Becker MA，Enderica-Gonzalez S，et al．Tumorgrafts as in vivo surrogates for women with ovarian cancer[J].Clin Cancer Res，2014，7 [Epub ahead of print]

[24] Grann AF，Thomsen RW，Jacobsen JB，et al．Comorbidity and survival of Danish ovarian cancer patients from 2000-2011：a population-based cohort study[J].Clin Epidemiol，2013，5(Suppl.1)：57-63

[25] 杜琴，雷開鍵．血腦屏障與惡性腫瘤腦轉(zhuǎn)移[J].川北醫(yī)學院學報，2013，28(3)：298-301

[26] 郭聰敏，姜繼勇．IGF2BP3在卵巢透明細胞癌中的表達及意義[D].遼寧：大連醫(yī)科大學碩士論文，2010.

[27] K?bel M，Xu H，Bourne PA，et al．IGF2BP3(IMP3)expression is a marker of unfavorable prognosis in ovarian carcinoma of clear cell subtype[J].Mod Pathol，2009，22(3)：469-475

[28] Mundangepfupfu T，Waseem M．Partial Hydatidiform Mole With False-Negative Urine Human Chorionic Gonadatropin Test in the Emergency Department[J].Emerg Med，2013，Nov 1．pii：S0736-4679

[29] 張梅娜，張麗娟．IMP3在葡萄胎中的表達及其意義[D].河北：河北醫(yī)科大學，2011.

[30] George S，F(xiàn)eng Y，Manola J，et al．Phase 2 trial of aromatase inhibition with letrozole in patients with uterine leiomyosarcomas expressing estrogen and/or progesterone receptors[J].Cancer，2013，Nov 12．doi：10.1002/cncr.28476

[31] Cornejo K，Shi M，Jiang Z．Oncofetal protein IMP3：a useful diagnostic biomarker for leiomyosarcoma[J].Hum Pathol，2012，43(10)：1567-1572.