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    趨化因子受體CXCR4與食管鱗癌生物學行為的臨床研究

    2014-03-21 01:17:41任艷艷
    關(guān)鍵詞:趨化因子鱗癌食管

    任艷艷

    (濰坊護理職業(yè)學院,山東 青州 262500)

    趨化因子受體CXCR4與食管鱗癌生物學行為的臨床研究

    任艷艷

    (濰坊護理職業(yè)學院,山東 青州 262500)

    目的 探討趨化因子受體CXCR4與食管鱗癌生物學行為的關(guān)系。方法 對37例食管鱗癌患者實施趨化因子受體CXCR4 mRNA與蛋白相對表達量測定,并探討其與食管鱗癌的生物學行為關(guān)系。結(jié)果 趨化因子受體CXCR4 mRNA與蛋白相對表達量,與侵及外膜、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)及TNM分期有關(guān)。結(jié)論 檢測CXCR4對預測食管鱗癌的侵襲、轉(zhuǎn)移有重要的臨床價值。

    食管鱗癌;趨化因子受體CXCR4;檢測

    趨化因子受體是指一種介導趨化因子行使功能的GTP蛋白偶聯(lián)的跨膜受體。研究發(fā)現(xiàn),CXC類趨化因子受體CXCR4的配體CXCL12多表達于乳腺癌的特異轉(zhuǎn)移部位,如肺、肝臟等,與患者腫瘤生長狀態(tài)有關(guān),可影響腫瘤的侵襲、生長及轉(zhuǎn)移狀態(tài)[1]。但關(guān)于這類型趨化因子受體在食管鱗癌方面的報告并不多見,本研究基于這一背景,簡要分析了兩者間的生物學行為,旨在為臨床觀察提供幫助。現(xiàn)報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取我院2010—2013年收治的食管鱗癌患者37例,所有患者均行手術(shù)切術(shù)腫瘤,其中男21例、女16例;年齡38~74歲,平均(54.5±8.3)歲。所有患者在行食管鱗癌切除手術(shù)之前均經(jīng)過化療或放療治療。收集37例患者的癌組織及癌旁組織,所有收集物均經(jīng)病理學檢查確定為食管鱗癌。TNM病理分期為Ⅱa、Ⅱb及Ⅲ期。在實施手術(shù)后0.5 h內(nèi)采集樣本,在最短時間內(nèi)將樣本放置于液氮中保存,液氮保存1 h后迅速轉(zhuǎn)移至-80℃冷柜中保存。

    表1 CXCR4蛋白表達與食管鱗癌病理參數(shù)關(guān)系

    1.2 方法

    1.2.1 CXCR4 mRNA相對表達量的測定 取冰凍樣本0.1 g并用Trizol試劑勻漿。提取出樣本組織總RNA,將MMLV通過逆轉(zhuǎn)錄酶使之成為cDNA,使用試劑盒PCR將CXCR4擴增,同時還可將β-actin擴增使之成為內(nèi)參照。PCR產(chǎn)物放置于2%瓊脂凝膠上電泳,實施EB染色操作,通過凝膠成像分析系統(tǒng)對所得到的圖像進行研究,相對量的表達采用實驗得到的吸光度與β-actin密度之間的比值來表示[2]。

    1.2.2 CXCR4蛋白相對表達量的測定 取少許樣本組織,將其加入到0.5 mL勻漿液中實施勻漿操作,采用BCA法對樣本蛋白進行定量測定。將獲得的蛋白采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠進行電泳分離,并通過電轉(zhuǎn)儀將分離出的蛋白轉(zhuǎn)印在硝酸纖維素膜上。將5%脫脂奶粉靜置5 h(需處于封閉狀態(tài),避免與空氣過多接觸),加入到CXCR4一抗,在4℃環(huán)境中孵育一整晚,利用TBST多次洗膜后將二抗加入其中,在正常溫度(室溫)下孵育2 h。之后染色20 min,利用凝膠成像分析系統(tǒng)了解條帶的吸光度,同時將內(nèi)參照選為β-actin。相對量的表達采用電泳條帶密度與相對內(nèi)參密度之間的比值來表示[3]。

    2 結(jié)果

    CXCR4蛋白表達與食管鱗癌病理參數(shù)關(guān)系研究見表1。本研究選取腫瘤大小、分化程度、侵及外膜、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)及TNM分期對其相關(guān)參數(shù)展開研究,了解這些因素下相對表達量的差異性。

    3 討論

    趨化因子受體CXCR4可在多種實體腫瘤中表達,許多研究已證實CXCL12/CXCR4軸在腫瘤的遷移、浸潤、轉(zhuǎn)移及預后中具有重要作用,對腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的作用主要包括以下幾方面。①CXCL12/CXCR4軸可以調(diào)控腫瘤細胞的增殖與凋亡:CXCL12/CXCR4軸多以自分泌刺激腫瘤及間質(zhì)細胞,促進腫瘤細胞的生長增殖。②CXCL12/CXCR4軸可以促進腫瘤血管的生成:血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)能將多種骨髓細胞從骨髓募集到外周血,CXCL12能捕獲血液循環(huán)中骨髓血管生成前體細胞的某些亞型,如RBCCs,并將其準確定位到正在生長的血管周圍,促進內(nèi)皮細胞芽生;CXCR4與VEGF還可以通過相互上調(diào)對方在內(nèi)皮細胞及腫瘤細胞上的表達來促進腫瘤血管的生成[4-5]。

    由于食管鱗癌早期癥狀不明顯,就診時多偏中、晚期,雖然目前以手術(shù)為主的綜合治療取得了較好的療效,但復發(fā)和轉(zhuǎn)移仍是制約延長生存期和降低病死率的主要原因。本研究初步證實,趨化因子受體CXCR4表達與食管鱗癌的浸潤、轉(zhuǎn)移相關(guān),但其確切作用機制尚需進一步深入研究。鑒于目前對胸中段食管癌尚無公認的標準手術(shù)方式,Ivor-Lewis手術(shù)和主動脈弓上水平吻合術(shù)均可作為對胸中段食管鱗癌治療的候選手術(shù)方式。由于采取該兩種手術(shù)方式治療的患者,即使實現(xiàn)了完全切除,長期生存期腫瘤復發(fā)率較高,有必要對有選擇的食管鱗癌患者采用有針對性的手術(shù)后輔助治療措施。

    [1] 宋亮.趨化因子受體CXCR4、CCR7與食管鱗癌生物學行為的臨床研究[D].濟南:山東大學,2012.

    [2] 尹東,劉靜,賈詠存,等.口腔鱗癌中趨化因子受體CXCR4和CCR7表達及其與臨床病理特征的關(guān)系[J].口腔醫(yī)學,2013(1):8-12.

    [3] 陳鋼.趨化因子受體CCR7、CXCR4與肺癌器官轉(zhuǎn)移關(guān)系的臨床研究[D].濟南:山東大學,2010.

    [4] 宋亮,王洲.趨化因子受體CXCR4和CCR7及其配體與食管癌轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究進展[J].中華腫瘤防治雜志,2010(20):1694-1699.

    [5] 吉茹.CXCR4、CCR7及其配體在乳腺癌及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶組織芯片中的表達及意義[D].天津:天津醫(yī)科大學,2010.

    1672-7185(2014)15-0072-02

    10.3969/j.issn.1672-7185.2014.15.042

    2014-06-12)

    R735.1

    A

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