辛伐他汀對(duì)阿霉素致心衰兔心功能的影響

殷國(guó)田等

【摘要】 目的：探討不同劑量辛伐他汀對(duì)阿霉素所致心衰兔保護(hù)作用及其抗心衰的機(jī)制。方法：雄性新西蘭大耳白兔60只，隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對(duì)照組（CON）、CHF模型組（CHF）、CHF+辛伐他汀低劑量組（LD-SIM）、CHF+辛伐他汀中劑量組（MD-SIM）、CHF+辛伐他汀高劑量組（HD-SIM）。正常對(duì)照組（CON）給予耳緣靜脈等體積生理鹽水，每周1次，共10周。其余組均給予生理鹽水注射液稀釋的鹽酸阿霉素，按4 mg/kg，每周1次，共10次，而辛伐他汀干預(yù)組同時(shí)給予低、中、高劑量辛伐他汀灌胃治療，劑量分別為0.3 mg/（kg·d），

1.5 mg/（kg·d），3.0 mg/（kg·d）。10周后測(cè)定大鼠心功能左室肥厚指數(shù)、ELISA測(cè)定血清中hs-CRP和MMP-13含量。結(jié)果：各藥物治療組可不同程度改善左室肥厚，其中辛伐他汀大劑量組與CHF模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），而辛伐他汀中劑量組與其比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而小劑量治療組與之比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；大中劑量治療組心功能指標(biāo)（±dp/dtmax）明顯優(yōu)于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），辛伐他汀大劑量組與中劑量組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而小劑量治療組與模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；各藥物治療組能降低血清中CRP、MMP-13含量（P<0.01或P<0.05）。結(jié)論：辛伐他汀能夠預(yù)防左心肥厚，降低血漿CRP、MMP-13濃度，從而減緩細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的降解改善心功能，這可能是辛伐他汀抗心衰作用機(jī)制之一。

【關(guān)鍵詞】 辛伐他??； 阿霉素； 心力衰竭； 左室重構(gòu)； MMP-13； hs-CRP

心力衰竭（heart failure，HF）是由諸多原因造成心肌損傷或壞死，繼而引發(fā)心臟結(jié)構(gòu)和功能改變，最終導(dǎo)致心室舒張和/或收縮功能低下，不能滿足全身各器官的代謝需求并導(dǎo)致體/肺循環(huán)淤血。盡管數(shù)十年來得益于理念、技術(shù)和藥物的進(jìn)步，然慢性心衰（chronic heart failure，CHF）5年存活率不足50%，已給全社會(huì)和患者家庭帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，成為心血管領(lǐng)域需要攻堅(jiān)的最后堡壘。因此如何及早防控HF發(fā)生發(fā)展尤為重要。迄今研究表明，HF發(fā)生發(fā)展的基本機(jī)制是心室重塑。其中，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）是一組降解基質(zhì)蛋白的水解酶，在心室重塑過程中具有重要作用，可降解所有細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）成分[1]。C反應(yīng)蛋白（CRP）是非特異性急性反應(yīng)蛋白，HF時(shí)其血漿中水平升高，是判斷組織損傷程度的較敏感的指標(biāo)，亦是判斷心肌受損程度的重要指標(biāo)。辛伐他汀作為降膽固醇藥物在臨床廣泛應(yīng)用，近20年來，關(guān)于其降脂外的多效性被廣為研究，如辛伐他汀抑制心肌細(xì)胞肥厚從而預(yù)防心衰的作用受到廣泛關(guān)注[2-4]。鑒于此，本文探討辛伐觀察辛伐他汀對(duì)慢性心力衰竭的心功能的影響和辛伐他汀抗心力衰竭的分子機(jī)制，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)雄性新西蘭大耳白兔60只，體質(zhì)量（1200±30）g，由新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。全部動(dòng)物飼養(yǎng)在正常晝夜周期的環(huán)境中，自由飲水，室溫控制在（22±2）℃。

1.2 主要儀器與試劑 美國(guó)Bio-rad imark酶標(biāo)儀，高速冷凍離心機(jī)（德國(guó)Heraeus公司），RM6240多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)（成都儀器廠），不銹鋼手提式壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠），精密電子天平（FA1004）（上海精宏電子儀器有限公司），微量加樣器（德國(guó)eppendorf公司），辛伐他汀片購(gòu)自河南省迪康醫(yī)藥有限責(zé)任公司，氯化鈉注射液（河南天方藥業(yè)股份有限公司），鹽酸阿霉素（上海研生生化試劑有限公司），兔子MMP-13 ELISA試劑盒、兔子hs-CRP ELISA試劑盒（R&D）。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物模型制作及取材 60只雄性新西蘭大白兔適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為正常對(duì)照組（CON組，12只）、心衰模型組（CHF組，7只）、CHF+辛伐他汀低劑量組（LD-SIM，8只）、CHF+辛伐他汀中劑量組（MD-SIM，9只）、CHF+辛伐他汀高劑量組（HD-SIM，9只）。正常對(duì)照組（CON組）給予耳緣靜脈等體積生理鹽水，每周1次，共10周。其余組均給予生理鹽水注射液稀釋的鹽酸阿霉素，按4 mg/kg，每周1次，共10次，而辛伐他汀干預(yù)組同時(shí)給予低、中、高劑量辛伐他汀灌胃治療，劑量分別為0.3 mg/（kg·d），1.5 mg/（kg·d），3.0 mg/（kg·d）。藥物干預(yù)10周后，將兔稱體重（BW）后麻醉致死，迅速取血液、心臟及血管標(biāo)本并分別進(jìn)行相應(yīng)標(biāo)本處理。

1.3.2 心功能測(cè)定 動(dòng)物稱重后，用3%戊巴比妥鈉

（30 mg/kg）腹腔注射麻醉，切開頸部、分離右頸總動(dòng)脈，將之切開后并逆行插入內(nèi)充0.1%肝素-生理鹽水的導(dǎo)管至左心室，停置20 min后，利用RM6240多道生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，記錄壓力曲線，計(jì)算出mLVSP（平均心室收縮壓）、mLVDP（平均心室舒張壓）、mLVP（平均心室內(nèi)壓）、HR（心率）、mdP/dtmax（平均心室內(nèi)壓最大上升速率）、m-dP/dt max（平均等容舒張期室內(nèi)壓最大下降速率）、mt-dP/dtmax（平均心室開始收縮至發(fā)生dp/dtmax的間隔時(shí)間）。

1.3.3 心肌肥厚指數(shù)計(jì)算 處死兔子并取血后，迅速取出心臟，分離心底部大血管、心房及右心室，用預(yù)冷的生理鹽水充分沖洗，濾紙吸干，用分析天平稱取心肌重量（HW），左心室（含室間隔）濕重（LVW），以全心/體重和左心室濕重/體重計(jì)算心肌重量指數(shù)（CPI，HW/BW，mg/g）和左心室心肌肥厚指數(shù)（LVHI，LVW/BW，mg/g）。

1.3.4 血漿中CRP、MMP-13濃度的測(cè)定 按ELISA試劑盒說明配制標(biāo)本處理所需的抗凝劑，肝素10 U/mL，動(dòng)物處死后立即取血注入預(yù)冷的內(nèi)含肝素的試管中，混勻后即刻放入冰水中冷卻，隨后4 ℃ 3000 rpm離心15 min，取上清液，分別按試劑盒步驟檢測(cè)CRP、MMP-13的濃度。endprint