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    清熱類中藥免煎顆粒與其煎劑體外殺菌效果的比較

    2014-03-20 09:08:50張仁霞劉常同
    關(guān)鍵詞:煎劑含藥方劑

    張仁霞 劉常同

    (1廣東省佛山市南海區(qū)第九人民醫(yī)院中藥房,佛山 528203;2廣東省佛山市南海區(qū)第九人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,佛山 528203)

    中藥煎劑作為我國傳統(tǒng)中醫(yī)臨床用藥的傳統(tǒng)劑型具有療效確切,易隨證加減變化等優(yōu)點(diǎn),但也有調(diào)配及旅行出差攜帶不便等缺點(diǎn)。而隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展,近十年來出現(xiàn)了中藥免煎顆粒。與傳統(tǒng)中藥不同,中藥免煎顆粒主要是通過較為先進(jìn)的制藥技術(shù)對傳統(tǒng)中藥實(shí)施一系列的加工,包括濃縮、提取、制粒等,在一系列加工程序后,形成顆粒狀的劑型,其可以直接通過開水口服,無需進(jìn)行水煎。與傳統(tǒng)水煎服中藥相比,中藥免煎顆粒更適合現(xiàn)今社會的發(fā)展,因此其被稱作為中藥走向現(xiàn)代社會的一種嘗試。目前,中藥免煎顆粒在臨床醫(yī)學(xué)中已得到廣泛地應(yīng)用,但其效果是否真的超越傳統(tǒng)的煎劑中藥,還有待考察。我院于2013年5月至2014年8月對10種具備殺菌功效的清熱類中藥進(jìn)行深入研究,并對比分析清熱類中藥免煎顆粒與清熱類中藥煎劑的殺菌效果,為臨床用藥及臨床治療提供重要的依據(jù),現(xiàn)報道如下。

    1 材料與方法

    1.1 儀器 培養(yǎng)基微量多點(diǎn)接種(天津生物儀器有限公司),Mneller-Hinton瓊脂(由美國BD公司生產(chǎn),批號130123)。

    1.2 藥材 射干、蒲公英、紫花地丁、大青葉、白花蛇舌草、青黛、馬勃、蚤休、魚腥草、金銀花10種中藥飲片及銀翹散、麻杏石甘湯,仙方活命飲、導(dǎo)赤散4種方劑中所具備的中藥飲片均由廣東中天醫(yī)藥有限公司提供。10種中藥及4種方劑的各種免煎顆粒由廣東一方醫(yī)藥有限公司提供。

    銀翹散藥物組成:連翹9g,金銀花9g,苦桔梗6g,薄荷6g,竹葉4g,生甘草5g,荊芥穗5g,淡豆豉5g,牛蒡子9g;麻杏石甘湯藥物組成:麻黃5g,杏仁9g,炙甘草6g,石膏18g;仙方活命飲組成:白芷、貝母、防風(fēng)、赤芍、當(dāng)歸尾、甘草節(jié)、皂角刺(炒)、穿山甲炙、天花粉、乳香、沒藥各6g,金銀花25g、陳皮9g;導(dǎo)赤散藥湯組成:生地黃10g,木通10g,生甘草梢6g,竹葉3g[1]。

    1.3 菌種 共100株分離菌株,從我院住院患者細(xì)菌檢驗(yàn)標(biāo)本中分離出來。菌株類型:大腸桿菌38株,腸球菌23株,金黃色葡萄球菌34株,其余5株。100株均通過我院檢驗(yàn)中心進(jìn)行嚴(yán)格鑒定,金黃色葡萄球菌為主要的質(zhì)檢菌株。

    1.4 方法

    1.4 .1 免煎中藥顆粒溶液制備方法 通過稱重的方式,取等同于原中藥飲片50g的中藥免煎顆粒,將其放置于準(zhǔn)備好的燒瓶內(nèi),同時加以適量的蒸餾水,以達(dá)到溶解的目的,之后將其溶解于50ml的容量瓶中,并輸入相應(yīng)的輸液瓶,小心謹(jǐn)慎地蓋好薄膜,然后再加以實(shí)施壓膠塞與鋁蓋,與高壓狀態(tài)下發(fā)揮殺菌功效,小心取出,得到等同于1g原藥材的1m l溶液。相同的,要想取得相應(yīng)的免煎顆粒,4種方劑僅僅需要稱取各方劑。1劑藥量中所含的多種中藥飲片免煎顆粒凝聚一塊后,其余方法可與單味免煎中藥相同。

    1.4 .2 中藥煎劑溶液制備方法 由我院中藥煎藥室制備,選擇50g中藥飲片,將其放入砂鍋中,置入足量的水,以達(dá)到浸泡藥物的目的,后實(shí)施加熱作用,在其煮沸后,選擇文火實(shí)施煎煮,煎煮時間控制在20min左右,煎煮結(jié)束后需趁熱進(jìn)行過濾處理,過濾后可放置于室溫中,后裝置于輸液瓶中,再加以實(shí)施壓膠塞與鋁蓋,與高壓狀態(tài)下發(fā)揮殺菌功效,小心取出,得到等同于1g原藥材的1ml溶液。相同的,各方劑1劑藥量中所含的多種中藥飲片免煎顆粒凝聚一塊后,其余方法可與單味中藥煎劑相同。

    1.4 .3 藥液稀釋方法與含藥平板制備方法 將無菌試管C1-11號排列好,在2、3、4、5、6、7、8、9、11試管中加入0.9%氯化鈉注射液10m l,同時選擇中藥免煎顆粒劑溶液1g/ml,置入1號試管與2號試管中,當(dāng)2號試管中的溶液完全混勻后,慢慢取出10ml,小心謹(jǐn)慎地置入3號試管中,待該試管中的溶液完全混勻后,再一次取出10m l溶液,小心謹(jǐn)慎地置入4號試管中,如上述步驟一樣,持續(xù)實(shí)施稀釋處理,直至9號試管,之后又在9號試管里取出溶液10m l,并將其置入10號試管中。最后選擇10號試管,以此作為對照管,表示該試管內(nèi)為無菌陰性溶液。11號試管中所備有的溶液主要為2倍比稀釋的溶液,濃度依次如下:1000、500、250、125、62.5、31.25、15、6.3、7.6,4mg/ml。慢慢融化無菌M-H瓊脂,同時需在無菌環(huán)境下將M-H瓊脂取出,并將其放置于準(zhǔn)備好的三角瓶中,之后于1號試管內(nèi)緩慢地取出溶液4ml,并放入相同的三角瓶內(nèi),稍微搖晃一下,使三角瓶中的溶液逐漸均勻,之后再倒入平板中,給予相應(yīng)的凝固處理,最后得到1號含藥平板。從1號含藥平板到10號含藥平板,每一個所含的藥物量均不相同,1~10為200、100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.5、0.8mg/ml。選擇10號含藥平板,以此作為對照平板,表示該含藥平板為無菌陰性藥物;選擇11號含藥平板,以此作為另一對照平板,表示該含藥平板為無藥陽性。

    1.4 .4 菌種制備及接種方法 選擇0.9%氯化鈉注射液,對新鮮培養(yǎng)物實(shí)施稀釋處理,使之成為相應(yīng)的菌懸液,選擇微量多點(diǎn)接種儀于15min內(nèi)接種在含藥平板上,通過培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),溫度控制在37%,時間控制在24h左右,同時需加以細(xì)致觀察,做好各項(xiàng)記錄工作。在各種藥物中,均無需接種10號平板,因?yàn)樵撈桨逯饕獮闊o藥陽性對照用。

    1.4 .5 最小殺菌濃度測定方法 對于每一個含藥平板,需認(rèn)真觀察其菌落生長狀況以無細(xì)菌生長平板內(nèi)藥物的最小濃度比為此藥是否符合美國臨床實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(Nccls)的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。參照含藥平板的實(shí)際情況,如菌落具體的生長數(shù)量,對最小殺菌濃度進(jìn)行全面、科學(xué)地統(tǒng)計,即MIC50、MIC90。試驗(yàn)陰性對照效果均為細(xì)菌不生長,陽性結(jié)果為細(xì)菌生長。

    2 結(jié)果

    2.1 殺菌作用 10種中藥飲片煎劑與免煎顆粒劑對100例臨床分離菌株的抑菌作用比較,見表1。

    表1殺菌作用比較(Mg/ml)

    通過上述表1可知,在10種煎劑中,射干殺菌作用最強(qiáng),蒲公英、紫花地丁、大青葉殺菌作用也較強(qiáng),金銀花、蛇舌草、青黛、魚腥草等所具備的殺菌功能差別不大,蚤休、大青葉、馬勃、射干、白花蛇舌草煎劑所具備殺菌效果優(yōu)于免煎顆粒,紫花地丁、蒲公英劑型所具備的殺菌效果差異較大,煎劑殺菌效果優(yōu)于免煎顆粒。

    2.2 殺菌作用 四種方劑的煎劑與免煎顆粒劑對100例臨床分離菌株的殺菌作用比較,見表2。

    表2殺菌作用比較(Mg/ml)

    由表2可知,4種方劑對金黃色葡萄球菌等100例分離菌株有較強(qiáng)殺菌作用,4種方劑的煎劑與免煎中藥相比,仙方活命飲、銀翅散、導(dǎo)赤散3種方劑與免煎中藥顆粒,其煎劑的殺菌作用是免煎顆粒的1~2倍,只有麻杏石甘湯的兩種劑型殺菌作用相當(dāng)。

    3 討論

    本實(shí)驗(yàn)所用菌株均從本院不同臨床患者分泌物所得,科別遍及內(nèi)、外、婦兒等科病人,具有一定的代表性,而該實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)中藥對臨床分離菌株有一定的殺菌功效,其中紫花地丁等中藥和4種中藥煎劑及其免煎顆粒均對金黃色葡萄球菌有很好的殺菌作用,早已引起世界醫(yī)學(xué)關(guān)注,故據(jù)此開發(fā)和研究抗菌抗病毒的中藥是新的嘗試途徑。而本實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基采用M-H瓊脂大大提高其實(shí)驗(yàn)靈敏度,而接種細(xì)菌方法改人工接種為多點(diǎn)接種儀器接種[2]。

    本實(shí)驗(yàn)顯示,中藥煎劑效果要好于免煎顆粒效果,而本次實(shí)驗(yàn)所用飲片均經(jīng)鑒定為質(zhì)量上乘的中藥材,而免煎顆粒的生產(chǎn)提供者一方藥業(yè)公司,是我國免煎顆粒現(xiàn)代化生產(chǎn)的龍頭示范企業(yè),也應(yīng)嚴(yán)格控制原藥材的來源、質(zhì)量。另外一方面,在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下應(yīng)用的中藥,尤其是體現(xiàn)中醫(yī)“整體觀念及辨證論治”兩大特點(diǎn)的中藥復(fù)方方劑,其藥效是藥方中所有藥味所含的有效物質(zhì)的整體效果,復(fù)方中各種中藥根據(jù)中藥“七情”相互配合,根據(jù)病人不同的病情隨證加減。而在炮制、煎煮過程中產(chǎn)生了原藥材料所沒有的新物質(zhì),而正是這是物質(zhì),產(chǎn)生了中藥對人體的整體療效[3]。

    綜上所述,中藥配方免煎顆粒,簡單混合后的藥效肯定不能等同于流傳于中國幾千年的中藥傳統(tǒng)煎劑,但其服用攜帶方便,不用煎煮也是其優(yōu)點(diǎn),故應(yīng)更深入研究中藥有效成分提取、不斷改進(jìn)工藝,將煎劑和免煎顆粒特點(diǎn)共同發(fā)揮,使中藥更好地走向現(xiàn)代化。

    [1]謝鳴.方劑學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:53-54.

    [2]李仲興,王秀華.應(yīng)用M-H瓊脂進(jìn)行連翹體外抗菌實(shí)驗(yàn)效果觀察[J].中國中藥雜志,2000,25(12):742.

    [3]薛燕.雷躋丸.中藥復(fù)方霰彈理論[M].北京:中國環(huán)境科學(xué)出版社,1996:48-49.

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