液基細(xì)胞學(xué)檢查與人乳頭狀瘤病毒檢測(cè)及陰道鏡聯(lián)合應(yīng)用對(duì)宮頸癌診斷的臨床研究

陳金順

（廣東省同江醫(yī)院婦產(chǎn)科，佛山 528300）

液基細(xì)胞學(xué)檢查與人乳頭狀瘤病毒檢測(cè)及陰道鏡聯(lián)合應(yīng)用對(duì)宮頸癌診斷的臨床研究

陳金順

（廣東省同江醫(yī)院婦產(chǎn)科，佛山 528300）

目的 探討液基細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)與人乳頭狀瘤病毒(HPV)檢測(cè)及陰道鏡聯(lián)合應(yīng)用對(duì)宮頸癌診斷的臨床意義及應(yīng)用價(jià)值。方法 回顧分析300例高危型HPV檢測(cè)及TCT檢查，對(duì)其中一項(xiàng)或兩項(xiàng)異常者做陰道鏡病理活檢，宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）及以上病變?yōu)椴±黻?yáng)性，對(duì)病理結(jié)果陽(yáng)性患者進(jìn)行結(jié)果分析。結(jié)果 單獨(dú)HPV（H組）DNA檢測(cè)陽(yáng)性35例，病理結(jié)果陽(yáng)性21例，符合率60.0%；單獨(dú)TCT（T組）檢查陽(yáng)性33例，病理結(jié)果陽(yáng)性24例，符合率72.7%；HPV及TCT檢測(cè)（H+T組）均為陽(yáng)性20例，病理結(jié)果陽(yáng)性19例，符合率95.0%。與H組及T組比較，H+T組符合率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論 HPV及TCT與陰道鏡聯(lián)合檢測(cè)宮頸癌可大大提高早期診斷的檢出率，值得臨床推廣。關(guān) 鍵 詞：人乳頭狀瘤病毒；液基細(xì)胞學(xué)檢查；宮頸癌；診斷

宮頸癌是常見的女性生殖道惡性腫瘤之一，其發(fā)病率在女性惡性腫瘤中僅次于乳腺癌，是引起婦女癌癥死亡的重要原因之一[1]。宮頸癌是一個(gè)從宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）至早期浸潤(rùn)癌直至浸潤(rùn)癌的由量變到質(zhì)變的連續(xù)發(fā)展過程，若能得到規(guī)范的篩查從而盡早發(fā)現(xiàn)和治療，可阻斷其向子宮癌的發(fā)展。近年來，宮頸癌的早期檢測(cè)方法得到了明顯的改進(jìn)。本研究利用液基細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）與人乳頭狀瘤病毒（HPV）檢測(cè)及陰道鏡聯(lián)合應(yīng)用對(duì)宮頸癌進(jìn)行診斷，并與單獨(dú)檢測(cè)組進(jìn)行比較，評(píng)價(jià)其臨床應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 對(duì)2013年1月—2013年12月入院的300例發(fā)現(xiàn)宮頸異常患者都進(jìn)行HPV-DNA和TCT檢測(cè)，對(duì)其中1～2項(xiàng)陽(yáng)性者做陰道鏡病理活檢，并將結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，所有患者在檢查前3 d未使用陰道內(nèi)藥物及做陰道沖洗；24 h內(nèi)無性行為；在非經(jīng)期檢查，檢查時(shí)不用潤(rùn)滑劑?；颊吣挲g19～64歲，平均（35.5±9.8）歲。

1.2 方法

1.2.1 HPV-DNA檢測(cè) 采用專用HPV樣刷在患者宮頸管內(nèi)旋轉(zhuǎn)3周采集樣本，置于保存液中，4℃保存，使用美國(guó)Digene公司的儀器，用第二代雜交捕獲(hybrid capture，HC2)法檢測(cè)13種高危型HPV，基因雜交捕獲II代技術(shù)是在體外進(jìn)行的核酸雜交，利用化學(xué)發(fā)光法，使微孔板信號(hào)擴(kuò)增，對(duì)HPV病毒的DNA進(jìn)行檢測(cè)。高危型HPV包含16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68型共13種，陽(yáng)性閾值為HPV-DNA≥1.0 pg/mL。

1.2.2 TCT檢測(cè) 采用新柏式液基細(xì)胞學(xué)進(jìn)行宮頸細(xì)胞學(xué)檢查，取專用宮頸刷插入宮頸管內(nèi)約1 cm，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5～6圈，收集宮頸外口和宮頸管的脫落細(xì)胞，放入細(xì)胞保存液中，將裝有標(biāo)本的小瓶放入新柏氏制片儀中，儀器自動(dòng)混勾細(xì)胞，打散黏液，通過白色濾過膜，隨機(jī)取樣制片。95%乙醇固定，巴氏染色。在顯微鏡下進(jìn)行閱片，依據(jù)TBS系統(tǒng)進(jìn)行診斷分型[2]。具體包括：無上皮內(nèi)病變或惡性病變(NILM)，不典型鱗狀細(xì)胞(ASC)包括不能明確意義(ASC-US)和不除外上皮內(nèi)高度病變(ASC-H)，不典型腺細(xì)胞(AGC)，鱗狀上皮內(nèi)低度病變(LSIL)，鱗狀上皮內(nèi)高度病變(HSIL)，鱗狀細(xì)胞癌(SCC)和腺癌(AC)。TBS報(bào)告正?；蜓装Y為細(xì)胞學(xué)陰性，ASCUS及以上病變?yōu)榧?xì)胞學(xué)陽(yáng)性。

1.2.3 電子陰道鏡檢查 暴露宮頸，拭凈宮頸表面分泌物做初步觀察，經(jīng)醋酸試驗(yàn)、碘試驗(yàn)后在可疑部位取活檢行病理組織學(xué)檢查。鏡下閱片，并進(jìn)行診斷分級(jí)，根據(jù)細(xì)胞異常程度可分為CINⅠ級(jí)(指宮頸上皮細(xì)胞輕度不典型增生)、CINⅡ級(jí)(指中度不典型增生)、CINⅢ級(jí)(指中度不典型增生或子宮頸原位癌)、鱗狀上皮癌、腺癌。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料對(duì)比采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV-DNA、TCT陽(yáng)性與病理陽(yáng)性診斷結(jié)果比較 300例標(biāo)本中，單獨(dú)HPV-DNA（H組）陽(yáng)性35例，占11.6%；病理結(jié)果陽(yáng)性21例，符合率60.0%。單獨(dú)TCT（T組）陽(yáng)性33例，占11.0%；病理結(jié)果陽(yáng)性24例，符合率72.7%。HPV-DNA及TCT檢測(cè)（H+T組）均為陽(yáng)性20例，占6.7%；病理結(jié)果陽(yáng)性19例，符合率95.0%。與H組及T組比較，H+T組符合率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表1。

2.2 HPV感染率與病理診斷結(jié)果比較 本研究中有51例患者因HPV-DNA和（或）TCT結(jié)果陽(yáng)性而進(jìn)行陰道鏡下病理活檢，HPV感染率在不同的病理結(jié)果中分別為≤CINⅠ級(jí)15例，占57.7%；≥CINⅡ級(jí)20例，占80%。與≤CINⅠ級(jí)患者比較，≥CINⅡ級(jí)的HPV感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 TCT檢查與病理診斷結(jié)果比較 50例患者中，炎癥改變24例、異常涂片26例。其中ASC（ASC-US、ASC-H）11例，檢出CINⅠ級(jí)5例、CINⅡ級(jí)2例；LSIL 9例，檢出CINⅠ級(jí)5例、CINⅡ級(jí)2例，CINⅢ級(jí)1例；HSIL 6例，檢出CINⅠ級(jí)1例、CINⅡ級(jí)3例、CINⅢ級(jí)2例。隨著細(xì)胞學(xué)異常級(jí)別的升高，宮頸高度病變檢出率顯著增加。見表3。

3 討論

宮頸癌在全球女性中僅次于乳腺癌的最常見的婦科惡性腫瘤之一，死亡率在女性惡性腫瘤中居首位，并有逐年上升的趨勢(shì)[3]。在世界范圍內(nèi)，每年約有51萬婦女被診斷為宮頸癌，其中85%發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家。我國(guó)宮頸癌每年新增病例約13.5萬，占全球發(fā)病總量的1/3，其死亡率占女性惡性腫瘤的第2位，是嚴(yán)重危害我國(guó)女性健康的重大疾病[4]。宮頸癌的發(fā)生是一個(gè)從CIN至早期浸潤(rùn)癌直至浸潤(rùn)癌的由量變到質(zhì)變的連續(xù)發(fā)展過程，CIN如果得到及時(shí)正確治療會(huì)完全治愈，具有進(jìn)一步發(fā)展或恢復(fù)正常的雙重性[5]。因此，對(duì)宮頸癌的早期篩查和及時(shí)預(yù)防可最大限度避免宮頸癌發(fā)生。

表1 HPV-DNA、TCT陽(yáng)性與病理陽(yáng)性診斷結(jié)果比較

表2 HPV感染率與病理診斷結(jié)果比較 [例(%)]

表3 TCT檢查與病理診斷結(jié)果比較 [例(%)]

宮頸癌是為數(shù)不多的原因明確的惡性腫瘤，現(xiàn)已證明與宮頸癌發(fā)生密切相關(guān)的因素是生殖道HPV感染，高危型HPV與宮頸癌及CIN的發(fā)生相關(guān)，尤其HPV 16型具有很強(qiáng)的致病性[6]。本研究表明，HPV檢測(cè)是發(fā)現(xiàn)高度CIN的一種敏感的、有效的方法，且HPV的感染在高度CIN發(fā)生率增加。由于高危型HPV感染與CIN及宮頸癌有密切關(guān)系，高危型HPV檢測(cè)與細(xì)胞學(xué)聯(lián)合篩查宮頸癌和CIN，尤其適用于高危人群的大面積普查。通過HPV檢測(cè)，可預(yù)測(cè)宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，以指導(dǎo)篩查的時(shí)間間隔，對(duì)治療后的患者可將HPV檢測(cè)作為其療效判斷和隨防監(jiān)測(cè)的手段。

細(xì)胞學(xué)檢查是CIN篩查及診斷的主要方法。新發(fā)展的TCT檢測(cè)改變了常規(guī)涂片的操作方法，幾乎保留了所得到的全部標(biāo)本，細(xì)胞固定及時(shí)，形態(tài)結(jié)構(gòu)不容易改變，細(xì)胞隨機(jī)均勻分布，并且濕固定的細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰，易于鑒別，大大地提高了診斷的準(zhǔn)確性。本研究表明，ASC性質(zhì)的明確有重要的臨床意義，可提示部分患者有高度CIN及宮頸鱗癌的可能，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行進(jìn)一步處理。

陰道鏡是介于肉眼和低倍顯微鏡之間的一種內(nèi)鏡，是國(guó)內(nèi)外學(xué)者公認(rèn)的輔助診斷CIN的重要方法。其將宮頸放大10～40倍，觀察組織的表面顏色、構(gòu)型、邊界、終末血管網(wǎng)，發(fā)現(xiàn)異常病變，準(zhǔn)確定位進(jìn)行多點(diǎn)活檢，評(píng)價(jià)病變性質(zhì)。值得注意的是，陰道鏡圖像的解釋有一定的主觀性，以致影響活檢部位的選擇和陰道鏡診斷，使陰道鏡檢查與活檢病理診斷符合率的報(bào)道差異較大。

在本研究中，H+T組符合率顯著高于H組及T組（P＜0.01），表明高危型HPV、TCT檢測(cè)聯(lián)合陰道鏡檢查可早期、準(zhǔn)確診斷宮頸高度病變。其中HPV作為分子檢測(cè)指標(biāo)，TCT用于篩查宮頸病變，陰道鏡作為一種良好的診斷工具可提供準(zhǔn)確的活檢部位。三者聯(lián)合應(yīng)用可提高宮頸病變的診斷率，減少漏診誤診的發(fā)生，值得臨床推廣。

[1] Desantis C, Ma J, Bryan L, et al. Breast cancer statistics, 2013[J]. CA: A Cancer Journal for Clinicians, 2014, 64(1): 52-62.

[2] Davey DD. Cervical cytology classification and the Bethesda System[J]. Cancer J, 2006, 9(5): 327-334.

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[4] 應(yīng)倩，夏慶民，鄭榮壽，等．中國(guó)2009年宮頸癌發(fā)病與死亡分析[J]．中國(guó)腫瘤，2013，22(8)：612-616．

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[6] 郝瑞鳳，王培玉．宮頸癌流行病學(xué)及高危因素探討[J]．醫(yī)學(xué)綜述，2011，10(15)：1479-1480．

Clinical Investigation of Combination with Liquid-based Cytological Test, HPV, and Colposcope on the Diagnosis of Cervical Cancer

Chen Jinshun

Objectives To investigate the clincial characteristics and vales of combination with liquid-based cytological test (TCT), HPV, and colposcope on the diagnosis of cervical cancer.MethodsAll 300 patients checked with HPV or TCT in our hospital were retrospectively analyzed for the clinical data. The colposcope was conducted in patients with one or two abnormal values. CIN and more serious were considered as pathological positive, and then the positive patients were analyzed for the clinical data.ResultsThere was 35 DNA positive cases and 21 pathological positive cases in the single HPV group (compliance rate 60.0%), 33 TCT positive cases and 24 pathological positive cases in the single HCT group (compliance rate 72.7%), 20 HPV+TCT positive cases and 19 pathological positive cases in the single HCT group (compliance rate 95.0%). The compliance rate of HPV+TCT group was signifi cantly higher than that of HPV or TCT single group (P＜0.01).ConclusionsTCT combined with colposcopy and HPV detection can greatly improve the early diagnosis of cervical cancer detection rate and is worthy of promotion.

HPV; TCT; cervical cancer; diagnosis

1672-7185（2014）14-0044-03

10.3969/j.issn.1672-7185.2014.14.028

2014-05-08）

R711

A