漿細胞樣樹突狀細胞與慢性粒細胞白血病免疫治療進展

段麗芳 張曉芹

慢性粒細胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)是血液系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，CML患者尤其耐藥患者抗腫瘤免疫能力差，免疫缺陷小鼠和人CML發(fā)生率明顯增高均提示CML和免疫系統(tǒng)相關(guān)。大量研究已經(jīng)證實，CML患者固有免疫及適應性免疫均嚴重受損［1］。近年來，隨著對CML免疫發(fā)病機制的深入研究，免疫治療成為治療CML的研究熱點，尋找有效的免疫細胞和刺激佐劑是可望提高CML長期生存的方法之一。

樹突狀細胞(dendritic cell，DCs)是一群體內(nèi)最強的專職抗原遞呈細胞，DCs在誘導和調(diào)節(jié)免疫應答中起重要作用。許多研究希望通過體內(nèi)負載腫瘤抗原的DCs遞呈抗原給T細胞從而達到抗腫瘤作用，但目前研究提示其有效性低，不能達到預想的結(jié)果，提示我們應該尋找新的腫瘤疫苗或免疫佐劑。pDCs是DCs的一個重要亞型，是體內(nèi)產(chǎn)生IFN－α的最主要的細胞，在病毒、細菌等刺激后可產(chǎn)生大量IFN－α，且逐步成熟，向DCs分化，pDCs在連接固有免疫和適應性免疫中發(fā)揮著重要作用［2］。因此，本文將pDCs的生物學特征與CML相關(guān)發(fā)病機制及應用前景做一綜述。

二、pDCs的概況

pDCs是Lennert和Remmele于1958年在活動性淋巴結(jié)周圍發(fā)現(xiàn)的，因其呈漿細胞形態(tài)但表達T細胞及單核細胞的表面標志故命名為漿細胞樣T細胞。1997年兩個獨立的研究小組證實這群細胞可以向DCs轉(zhuǎn)化，故命名為pDCs。pDCs的一個顯著特點是在細菌或病毒DNA或RNA刺激下產(chǎn)生大量的IFN－α，故pDCs最初是以干擾素產(chǎn)生細胞為人們所認識的。pDCs主要存在于外周血，與mDCs表達的趨化因子一致，但 pDCs高表達 CCR5、CCR7、CXCR3［3］。CXCR3配體與 SDF －1 相互作用可促使pDCs遷移到炎癥部位，而pDCs遷移至腫瘤微環(huán)境也與SDF －1相關(guān)［4，5］。pDCs產(chǎn)生 IFN －α 的能力是其他細胞的100～1000倍，pDCs活化后通過分泌IFN－α激活NK細胞、B細胞、T細胞、巨噬細胞和mDCs而增強免疫應答強度。pDCs產(chǎn)生大量IFN－α與其表面的 Toll樣受體(toll like receptors，TLRS)有關(guān)，pDCs僅含有 TLR7 和 TLR9［6，7］。

TLR7主要識別病毒單鏈 RNA(ssRNA)，TLR7識別配體后，發(fā)生構(gòu)象變化，募集下游信號分子，包括MyD88、IRAK、TNF －α、TRAF6、NF －κB、IKK 及 IRFs等，激活依賴MyD88經(jīng)典的信號轉(zhuǎn)導途徑。Hardy等［8］研究發(fā)現(xiàn)，pDCs特征性表達 TLR7，pDCs攝取、內(nèi)吞外來病原體，激活TLR7活化下游的TRAF6和IRF－7等因子，引起IFN－α、TNF－α等細胞因子的分泌，上調(diào)NK細胞表面活化標志CD69表達，增強NK細胞對靶細胞的殺傷活性和IFN－γ分泌。此外，活化后的pDCs還能上調(diào)MHCⅠ類分子的表達，增強CTL及NK細胞的殺傷功能，并抑制Treg的產(chǎn)生，參與免疫調(diào)節(jié)，進而增強機體抗腫瘤能力，高水平的IFN－α對于CML患者至關(guān)重要。

TLR9識別細菌和病毒DNA分子如常見的CpG元件等。TLR9識別配體后通過MyD88經(jīng)典途徑激活pDC分泌IFN－α、IL－6、TNF－α等細胞因子，進而活化NK細胞、單核細胞，啟動固有免疫應答，并誘導IgG型抗體分泌，抑制IgE型抗體的產(chǎn)生，促進Th1細胞分化，增強APC和CTL細胞活性，啟動適應性免疫應答［9］。pDCs活化后分泌的TNF－α可提高DCs表面表面 MHC分子和 CD80、CD86表達水平，在CD40L協(xié)助下，誘導初始CD4+T細胞向Th1分化。pDC是啟動固有性免疫應答的關(guān)鍵，也是連接固有性免疫和適應性免疫的橋梁，在機體的免疫系統(tǒng)中發(fā)揮著重要的作用。Hemmi等通過小鼠基因剔除技術(shù)證實CpG－DNA是通過TLR9發(fā)揮作用的，CpG－ODN通過TLR9誘導的Th1型優(yōu)勢免疫應答，可以增強機體對病毒等胞內(nèi)微生物的抵抗力，提高NK細胞和CTL細胞活性，而這些能力也正是CML治療中所需要的。

二、pDCs在CML中的作用

有研究提出CD40L聯(lián)合IL－3能刺激pDCs成為有功能的DCs，并促進Th2細胞分化。白血病患者體內(nèi)不成熟的mDCs和pDCs不能誘導T細胞活化，但仍能遞呈腫瘤抗原并誘導CD4+/CD25+調(diào)節(jié)性T細胞病抑制抗腫瘤免疫。應用IL－10抗體和CpG ODN可增強的CTL抗腫瘤應答。有人提出利用成熟pDCs和mDCs制備的混合疫苗能明顯增加抗原特異性CD8+T細胞的水平，提示利用pDCs可能重建或增強抗腫瘤免疫［10］。

研究證實慢性乙型肝炎患者外周血中pDCs數(shù)量及功能嚴重受損，進一步研究發(fā)現(xiàn)pDCs內(nèi)的TLR7和TLR9表達明顯減少，且功能受損，提出其可能是pDCs功能缺陷的主要原因，并指出通過 TLR7和TLR9配體來恢復pDCs功能可能是治療慢性乙型肝炎的一個新的切入點［9］。國外有研究表明，初診CML患者外周血中pDCs數(shù)量和功能均嚴重缺陷，經(jīng)治療病情緩解后pDCs數(shù)量和功能較前明顯恢復［11］。Dummer等［12］發(fā)現(xiàn)，TLR7配體米喹莫特可募集腫瘤區(qū)域的pDCs，增加IFN－α等細胞因子的分泌，進而形成炎性環(huán)境致使腫瘤退化。有研究證實，在人肺腺癌A549細胞上，TLR9配體CpG ODN作為一種免疫佐劑可通過TLR9誘導強的Thl型免疫應答，可作為單一治療或者免疫治療的輔助治療應用于腫瘤的治療［13］。國外有報道極少數(shù)白血病可以自行緩解，推測可能與感染時TLRs誘導白血病細胞分化成熟和抑制其增殖有關(guān)［14］，并有研究提出白血病化療方案中增加TLR7和TLR9配體能顯著提高DCs對腫瘤抗原遞呈能力，激活T細胞，并能增強化療藥物的敏感度［15］。

CML患者體內(nèi)pDCs的數(shù)量及功能受損，導致內(nèi)源性IFN－α減少，造成機體正常的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、骨髓微環(huán)境及細胞分化失調(diào)，導致細胞惡性克隆是CML重要發(fā)病機制之一。有研究提出黃芪多糖可以提高CML患者pDCs的活性，推測可能與上調(diào)pDCs內(nèi)TLR9有關(guān)［16］。IFN－α對 CML療效確定，外源性補充的IFN－α治療CML的機制之一就是通過糾正pDCs的功能進而恢復CML患者內(nèi)源性IFN－α進而控制疾病，故恢復pDCs功能一方面可直接補充內(nèi)源性IFN－α達到治療目的，另一發(fā)面通過恢復pDCs功能使機體的免疫紊亂狀態(tài)重新達到免疫平衡，達到控制疾病的目的。但是CML患者pDCs上TLRs數(shù)量及功能研究鮮見。因此評價通過刺激pDCs能否克服CML細胞介導的免疫抑制效應，從而改善內(nèi)部微環(huán)境，啟動固有免疫適應性免疫增強抗CML效應非常重要。

三、展 望

pDCs是一群異質(zhì)性的細胞群體，是唯一產(chǎn)生大量IFN－α的細胞。已經(jīng)證實pDCs參與病毒感染、自身免疫性疾病、實體瘤及白血病的發(fā)病。pDCs產(chǎn)生IFN－α對CML具有肯定療效，因此通過開發(fā)新的免疫佐劑提高pDCs的數(shù)量和產(chǎn)生IFN－α的功能，恢復和穩(wěn)定體內(nèi)原有的平衡狀態(tài)，重新激活控制疾病的通路，達到控制疾病可能為CML免疫治療提供新思路。

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