貝克曼庫爾特LH750血細胞分析儀HGB原理和故障分析

李榮國

0 引言

貝克曼庫爾特LH750血細胞分析儀HGB的檢測是利用光電比色原理，將HGB Lamp光源透過HGB cuvette比色池，經(jīng)525 nm濾光片，到達HGB preamp光電傳感器，利用吸光度與血紅蛋白的比例關(guān)系，將吸光度轉(zhuǎn)換為電壓信號并進行初級放大，再經(jīng)過COMM INTFC CARD板進行A/D轉(zhuǎn)換，通過分析計算得到血紅蛋白。LH750血細胞分析儀HGB的檢測分4個時序，需要檢測2個讀數(shù)（空白讀數(shù)和樣本讀數(shù)），通過對比2個讀數(shù)的數(shù)值最終計數(shù)出HGB 數(shù)值[1-2]。

（1）時序1——清洗比色池：用WBC計數(shù)池中的稀釋液通過管路清洗HGB比色池，儀器處于樣本吸樣狀態(tài)（introduce sample）。

該時序的工作流程：5 psi（1 psi=6.89 kPa）正壓→MF7分路集合器→VL12D壓管閥→WBC bath白細胞計數(shù)池→VL12B壓管閥→HGBcuvette（1）比色池→HGBcuvette（2）比色池→VL4A壓管閥→VC11廢液瓶。

時序2——空白讀數(shù)測定：將反沖罐內(nèi)的稀釋液注入HGB比色池，通過光度計檢測比色池中稀釋液的吸光度，進行空白讀數(shù)測定，儀器處于計數(shù)狀態(tài)（counting）。

該時序的工作流程：30 psi正壓→SOL5電磁閥→VC37（1）泡沫收集器→VC37（3）泡沫收集器→backwash tank（1）反沖罐→backwash tank（3）反沖罐→SOL18電磁閥→HGB cuvette（3）比色池→HGB cuvette（4）比色池→VL6壓管閥→VL4A壓管閥→vent。

（3）時序3——排空比色池：空白讀數(shù)測定結(jié)束后，排空HGB比色池中的稀釋液，儀器處于計數(shù)狀態(tài)（counting）。

該時序的工作流程：5 psi正壓→MF7分路集合器→VL6壓管閥→HGB cuvette（4）比色池→HGB cuvette（2）比色池→VL4A壓管閥→VC11廢液瓶。

（4）時序4——樣本讀數(shù)測定：HGB比色池與WBC計數(shù)池在同一個通道上，當(dāng)溶血劑、稀釋液、樣本同時進入WBC計數(shù)池中時，利用溶血劑破壞RBC、RBC內(nèi)的血紅蛋白與溶血劑反應(yīng)生成顏色穩(wěn)定的氰化高鐵氧合物，其顏色與HGB的含量成正比，當(dāng)WBC計數(shù)池中的樣本排入HGB比色池后，利用吸光度與血紅蛋白的比例關(guān)系進行樣本讀數(shù)測定，儀器處于分析狀態(tài)（analyzing）。

該時序的工作流程：5 psi正壓→MF7分路集合器→VL12D壓管閥→WBC bath→VL12B壓管閥→HGB cuvette（1）→HGB cuvette（4）→VL6 壓管閥→VL4A壓管閥→vent。

現(xiàn)將血細胞分析儀HGB常見故障的分析處理介紹如下，供參考。

1 HGB分析結(jié)果偏低

（1）首先進入菜單 main menu→analyzer function→HGB readings（blank）&sample voltages，如果發(fā)現(xiàn)HGB的blank值低于7.5 V，則在analyzer菜單中選擇 main menu→analyzer function→HGB lamp adjust，調(diào)整到 7.5～9.5 V，故障排除。

（2）觀察RBC稀釋液泵的動作，如果發(fā)現(xiàn)泵內(nèi)有氣泡冒上來，則查看WBC計數(shù)池的液面在WBC計數(shù)時是否慢慢的升高。在WBC計數(shù)時，分血片處于交叉沖洗狀態(tài)，RBC稀釋液泵與WBC計數(shù)池相連，此時RBC稀釋液泵底部的30 psi壓力將泵中的稀釋液推到WBC計數(shù)池中，使WBC計數(shù)池中的樣本被稀釋，我們可以觀察到WBC計數(shù)池的液面在WBC計數(shù)時會慢慢的升高。由于這部分慢慢升高的稀釋液沒有與原來的樣本進行充分混合，因此出現(xiàn)WBC的結(jié)果變化不大，HGB的結(jié)果明顯偏低。更換RBC稀釋液泵泵膜后，故障排除。

（3）觀察HGB比色池在測定樣本讀數(shù)時，從HGB cuvette（2）比色池→VL4A壓管閥→VC11廢液瓶這段管子，正常應(yīng)該是先有液體，然后是空氣，但故障時筆者發(fā)現(xiàn)這段管子都是液體。檢查發(fā)現(xiàn)VL4A壓管閥中工字管被壓扁，更換壓扁工字管，故障排除。

（4）仔細觀察HGB比色池在空白讀數(shù)與樣本讀數(shù)時的液面情況，如果HGB比色池的液面在時序2和時序4的工作狀態(tài)下都出現(xiàn)緩慢上升現(xiàn)象，這說明SOL18電磁閥關(guān)閉不嚴(yán)，使反沖罐內(nèi)的稀釋液漏到HGB比色池中，造成樣本被稀釋。更換SOL18電磁閥，故障排除。

（5）管路脫落也會造成HGB分析結(jié)果偏低。筆者常見VC37泡沫收集器（2）端口的堵頭脫落，觀察HGB空白讀數(shù)時，反沖罐內(nèi)的稀釋液沒有完全進入HGB比色池，HGB比色池中液體會比較少，空白讀數(shù)測定偏低，其HGB結(jié)果也會偏低，而且VC37泡沫收集器（2）端口的堵頭脫落，在自動進樣時會報警“aspiration C”，進行相應(yīng)處理后，故障排除。

2 HGB分析結(jié)果偏高

首先觀察WBC計數(shù)池和RBC計數(shù)池，在WBC樣本計數(shù)時，樣本、稀釋液、溶血劑分別進入WBC計數(shù)池并伴隨混勻氣泡注入后，WBC計數(shù)池的液面會明顯低于3個寶石孔墊圈位置，由于WBC計數(shù)池和HGB比色池在同一液路上，故又分2種情況：（1）查看WBC稀釋液泵，如果WBC稀釋液泵有氣泡，則說明稀釋液泵破膜。更換稀釋液泵膜，故障排除。（2）觀察分血片動作是否錯位，如果發(fā)現(xiàn)WBC稀釋液泵沒有將6 mL稀釋液全部推到WBC計數(shù)池中，筆者建議將清洗分血片全部拆開并逐片清洗，裝上后故障排除。

3 HGB分析結(jié)果重復(fù)性不好

此故障比較復(fù)雜，筆者首先需要連續(xù)觀察10個以上進入HGB比色池中的樣本情況，并記錄比色池液面情況：

（1）如果發(fā)現(xiàn)HGB比色池在樣本讀數(shù)測定時液面忽高忽低，一般是由于SOL18電磁閥滲漏引起，更換電磁閥，故障排除。

（2）如果發(fā)現(xiàn)樣本進入HGB比色池前，HGB比色池有時排空有時沒有完全排空，一般是VL4A壓管閥動作偏慢，VL4A壓管閥工字管被壓扁，更換工字管，故障排除。

（3）還有一種可能是WBC計數(shù)池樣本計數(shù)時液面忽高忽低，主要是WBC計數(shù)池排廢液的管路有問題，VL12B壓管閥工字管被壓扁，更換VL12B壓管閥工字管，故障排除。

4 HGB分析結(jié)果“……”

（1）首先查看HGB的空白電壓情況，進入菜單main menu→analyzer function →HGB readings（blank）&sample voltages，如果發(fā)現(xiàn)HGB的blank值低于7.5 V，則在analyzer菜單中選擇main menu→analyzer function→HGB lamp adjust，使其值在8.5 V左右，如不能調(diào)到7.5～9.5 V，則analyzer會提示“HGB lamp adjust out of range”。一般有2種情況：①燈泡老化。更換燈泡，故障排除。②比色光路臟。如果反沖罐內(nèi)的稀釋液進入比色池后變渾濁，則說明光路有臟東西。拆開比色池旁邊燈泡插座，用擦鏡紙擦拭光路后可修復(fù)。

（2）檢查HGB比色池?zé)襞?，如果發(fā)現(xiàn)HGB Lamp燈泡忽明忽暗，則說明燈泡的電源線接觸不良。筆者采用清理腐蝕線路后直接焊接的方式排除此故障。

（3）觀察測定空白讀數(shù)時，如果稀釋液上升偏慢，則說明與HGB比色池連通外界的回路有故障，一般是HGB比色池（4）號端口有些堵，清除堵塞管子垃圾，故障可排除。

（4）觀察空白讀數(shù)測定時如果HGB比色池內(nèi)的液體有明顯氣泡或在沸騰，可以肯定有30 psi正壓氣體進入HGB比色池內(nèi)，根據(jù)經(jīng)驗，從VL4A壓管閥到VC11排廢池的單向閥很可能損壞，更換單向閥，故障排除。

（5）與VL12D壓管閥相連的氣阻有問題。觀察樣本讀數(shù)測定時樣本從WBC計數(shù)池排入HGB比色池時的流速偏快，在比色池中產(chǎn)生了一些氣泡，使樣本讀數(shù)結(jié)果偏離。進行相應(yīng)調(diào)整后，故障排除。

[1]張振光.LH750/GENS儀器檢測HGB原理及常見故障分析[J].醫(yī)療衛(wèi)生裝備，2009，30（11）：128-129.

[2]王明利.LH500血細胞分析儀故障檢修[J].生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)進展，2011，32（3）：182-184.