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    玫瑰花及花渣中黃酮類物質(zhì)的提取及其抗氧化活性研究

    2014-03-07 05:53:56張佳嬋謝婭霏蔣曉燕王昌濤孫寶國(guó)
    食品工業(yè)科技 2014年22期
    關(guān)鍵詞:凍干粉液料玫瑰花

    張佳嬋,謝婭霏,虞 旦,蔣曉燕,王昌濤,孫寶國(guó)

    (1.北京工商大學(xué)理學(xué)院植物資源研究開(kāi)發(fā)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100048;2.北京工商大學(xué)食品添加劑與配料北京高校工程研究中心,北京 100048)

    玫瑰花及花渣中黃酮類物質(zhì)的提取及其抗氧化活性研究

    張佳嬋1,謝婭霏1,虞 旦1,蔣曉燕1,王昌濤1,孫寶國(guó)2,*

    (1.北京工商大學(xué)理學(xué)院植物資源研究開(kāi)發(fā)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100048;2.北京工商大學(xué)食品添加劑與配料北京高校工程研究中心,北京 100048)

    以玫瑰花為對(duì)照,以提取精油后的玫瑰花渣為原料,對(duì)其中的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行乙醇提取,同時(shí)在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)得到最優(yōu)提取工藝,并對(duì)粗提物凍干粉進(jìn)行抗氧化活性分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:玫瑰花和花渣中黃酮最優(yōu)提取工藝均為乙醇濃度為45%、液料比(g/g)為60∶1、提取溫度30℃、提取時(shí)間30min,提取率分別為(4.71±0.07)mg/g和(2.31±0.08)mg/g。將所得黃酮凍干粉分別進(jìn)行羥自由基、ABTS+自由基和DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn),分析得到IC50,結(jié)果發(fā)現(xiàn)玫瑰花黃酮和玫瑰花渣黃酮凍干粉對(duì)三種自由基均具有清除能力,三種自由基清除能力的排列順序?yàn)榱u自由基>ABTS+自由基>DPPH自由基。

    玫瑰花渣,玫瑰花,黃酮,抗氧化

    玫瑰是薔薇科薔薇屬多年生常綠或落葉性灌木。玫瑰花性味甘溫,具有行氣解郁、疏肝理氣、和血散瘀等多種醫(yī)療保健功效[1-3]。目前,玫瑰最主要的用途是作為生產(chǎn)玫瑰精油的原料和觀賞植物[4]。水蒸氣法提取玫瑰精油的提取率在0.25‰~0.3‰[5],二氧化碳超臨界萃取法提取率也僅為10‰[6-7],因而生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生大量的玫瑰花渣。長(zhǎng)期以來(lái),玫瑰花渣除有一部分作為燃料利用外,其余大部分都作為垃圾丟棄。隨著玫瑰產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,人們開(kāi)始將目光轉(zhuǎn)移到玫瑰精油副產(chǎn)物的開(kāi)發(fā)再利用方面。郭永來(lái)等將干燥的玫瑰花渣作為原料利用分子蒸餾技術(shù)再次提取玫瑰精油,提取率為0.048%,并對(duì)玫瑰花渣和玫瑰花分別提取得到的精油進(jìn)行了香氣成分分析[5]。還有研究表明,玫瑰花渣提取物對(duì)DPPH等自由基的清除能力較強(qiáng),說(shuō)明具有豐富的抗氧化成分[8-10]。玫瑰花渣中含有維生素C、維生素E、β-胡蘿卜素及全面氨基酸組分,總黃酮含量高達(dá)3.34%[11-12]。黃酮類物質(zhì)具有降低血清膽固醇、抗?jié)?、抗腫瘤、抗炎、抗衰老、抗輻射、抗病毒、抗心衰、抗心肌缺血、抗心率失常等方面有明顯的藥理功效[13-16]。

    本實(shí)驗(yàn)以玫瑰花及提取精油后的玫瑰花渣作為原料,以玫瑰花做參照,將抗氧化成分——黃酮類物質(zhì)作為指標(biāo),利用乙醇提取法提取玫瑰花渣黃酮,在得到兩者的較優(yōu)提取方法的基礎(chǔ)上,比較黃酮類物質(zhì)的抗氧化性,以期為玫瑰花渣在抗氧化食品及其添加劑的研究和開(kāi)發(fā)方面提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    玫瑰花(干花蕾)、玫瑰花渣(提取精油后干燥玫瑰花) 蘭州九香玫瑰生物科技有限公司提供,均烘干粉碎過(guò)篩;蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 中國(guó)藥品生物制品檢定所;亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、無(wú)水乙醇、Tris、鹽酸、鄰苯三酚 均為分析純,購(gòu)于北京化工廠;抗壞血酸(分析純≥99.7%) 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;DPPH(1,1-二苯基苦基苯肼) 美國(guó)Sigma Aldrich公司。

    BS2202S型電子天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司;DSHZ-300型恒溫水浴振蕩器 江蘇省太倉(cāng)市實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠;T6型新世紀(jì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 黃酮含量的測(cè)定[11]

    1.2.1.1 黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精確稱取120℃干燥至恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品50mg,無(wú)水乙醇定容至50mL,超聲,得到1mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密量取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL,分別置于10mL容量瓶中,加入5%NaNO2溶液0.3mL,搖勻放置6min;加 入10%Al(NO3)3溶 液 0.3mL,搖 勻 放 置 6min;加 入4%NaOH溶液4mL,用提取溶劑定容,搖勻放置15min。510nm下測(cè)吸光度,以吸光度A為縱坐標(biāo)、蘆丁質(zhì)量濃度C(mg/mL)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    經(jīng)測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=0.087x+5×10-5,R2=0.9997。

    1.2.1.2 樣品的測(cè)定 精密量取樣品液1.0mL,置于10mL容量瓶中,加入5%NaNO2溶液0.3mL,搖勻放置6min;加入10%Al(NO3)3溶液0.3mL,搖勻放置6min;加入4%NaOH溶液4mL,用提取溶劑定容,搖勻放置15min。510nm下測(cè)吸光度。對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線得所提取總黃酮的質(zhì)量濃度。

    1.2.2 玫瑰花渣和玫瑰花乙醇提取工藝的單因素實(shí)驗(yàn)1.2.2.1 乙醇濃度單因素實(shí)驗(yàn) 選取0%、20%、40%、60%、80%、100%這六種濃度的乙醇作為提取溶劑,固 定 液 料 比(g/g)40 ∶1,提 取 溫 度 40℃ ,提 取 時(shí) 間60min,將提取液減壓抽濾后定容到100mL容量瓶中,混合均勻后測(cè)定黃酮含量。設(shè)置三組平行。

    1.2.2.2 液料比單因素實(shí)驗(yàn) 設(shè)置液料比(g/g)分別為15∶1、25∶1、35∶1、45∶1、55∶1、75∶1和95∶1,固定乙醇濃度為70%,提取溫度40℃,提取時(shí)間60min,將提取液減壓抽濾后定容到100mL容量瓶中,混合均勻后測(cè)定黃酮含量。設(shè)置三組平行。

    1.2.2.3 溫度單因素實(shí)驗(yàn) 將提取溫度分別設(shè)定為30、40、50、60、70℃,固定乙醇濃度70%,提取時(shí)間60min,液料比(g/g)40,將提取液減壓抽濾后定容到100mL容量瓶中,混合均勻后測(cè)定黃酮含量。設(shè)置三組平行。

    1.2.2.4 提取時(shí)間單因素實(shí)驗(yàn) 固定因素乙醇濃度70%,提取溫度40℃,液料比(g/g)40時(shí),提取時(shí)間分別為30、60、90、120、150min,將提取液減壓抽濾后定容到100mL容量瓶中,混合均勻后測(cè)定黃酮含量。設(shè)置三組平行。

    1.2.3 玫瑰花渣和玫瑰花乙醇提取工藝的正交實(shí)驗(yàn)

    在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較大的幾個(gè)因素進(jìn)行正交設(shè)計(jì),按照正交設(shè)計(jì)表格(表1)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并測(cè)定黃酮含量。

    表1 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表Table 1 Orthogonal factor level table

    1.2.4 羥自由基清除實(shí)驗(yàn)[17]取0.5mL 0.75mmol/L鄰二氮菲無(wú)水乙醇溶液于試管中,依次加入1mL 0.15mol/L 磷 酸 鹽 緩 沖 溶 液(PBS,pH7.40)和 0.5mL蒸餾水,充分混勻后,加入0.5mL 0.75mmol/L硫酸亞鐵 溶 液(FeSO4),混 勻 后 ,加 入 0.5mL 0.01% 雙 氧 水(H2O2),于37℃ 水 浴 60min 后 ,在 536nm 測(cè) 其 吸 光 值 ,所得數(shù)據(jù)為損傷管吸光度A損傷。未損傷管以0.5mL蒸餾水代替損傷管中的0.5mL 0.01%雙氧水,操作方法同損傷管,可測(cè)得536nm未損傷管的吸光度值A(chǔ)未損傷。樣品管以0.5mL樣品代替損傷管中的0.5mL蒸餾水,操作方法同損傷管,可測(cè)得536nm樣品管中的吸光度A樣品。按照下式計(jì)算樣品對(duì)·OH的清除率:

    1.2.5 ABTS+自 由 基 清 除 實(shí) 驗(yàn)[18]將 5mL 7mmol/L ABTS+和88μL 140mmol/L過(guò)硫酸鉀溶液混合,在室溫、避光條件下靜置過(guò)夜,形成ABTS+儲(chǔ)備液。使用前用無(wú)水乙醇稀釋成工作液,使其在734nm下的吸光度在0.70±0.02。

    在一系列比色管中,分別加入4mL ABTS+工作液,再分別加入40μL不同濃度的Trolox標(biāo)準(zhǔn)品溶液,準(zhǔn)確振蕩30s,測(cè)定反應(yīng)6min后734nm波長(zhǎng)下的吸光度。繪制吸光度與Trolox標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    取4mL ABTS+工作液,加入40μL樣品待測(cè)液,準(zhǔn)確震蕩30s,測(cè)定反應(yīng)6min后734nm波長(zhǎng)下的吸光度A樣品。按照下式計(jì)算:

    1.2.6 DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)[19]取1.5mL蒸餾水加入到1.5mL DPPH溶液中,迅速混勻,室溫下避光靜置30min后于517nm下測(cè)吸光度值,記錄為A0。

    取樣 品溶 液1.5mL加 入 到1.5mL DPPH溶 液 中 ,迅速混勻,室溫下避光靜置30min后于517nm下測(cè)吸光度值,記錄為A。

    DPPH自由基清除率的計(jì)算公式為:

    式中:A0:未加入樣品時(shí)反應(yīng)體系的吸光度A:加入待測(cè)樣品后反應(yīng)體系的吸光度。

    1.2.7 粗提黃酮凍干粉的制備 采用正交實(shí)驗(yàn)所得的最優(yōu)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行黃酮的提取,對(duì)所得黃酮進(jìn)行冷凍干燥,條件為-80℃,0.03mBar,48h。由此得到玫瑰花渣黃酮粉末和玫瑰花黃酮粉末。

    1.2.8 粗提黃酮的抗氧化活性 將粗提黃酮凍干粉配制不同濃度的凍干粉黃酮溶液,對(duì)不同濃度黃酮溶液分別進(jìn)行DPPH自由基、ABTS+自由基和羥自由基清除率實(shí)驗(yàn),同時(shí)計(jì)算IC50。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    本課題所做實(shí)驗(yàn)均設(shè)置三組平行,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SPSS 19.0數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行顯著性分析(p<0.05),所得結(jié)果以±s表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 多種因素對(duì)玫瑰花渣和玫瑰花乙醇提取法的影響

    2.1.1 乙醇濃度對(duì)黃酮類物質(zhì)乙醇提取法的影響 按照方法1.2.2,以玫瑰花為對(duì)照,討論了不同濃度乙醇對(duì)玫瑰花渣提取液中黃酮含量的影響。由圖1可以看出,隨著乙醇濃度的提高,黃酮含量先升高后降低,對(duì)于玫瑰花和玫瑰花渣來(lái)說(shuō),乙醇濃度在40%~60%時(shí)均顯示最高的黃酮含量,且乙醇濃度在該范圍時(shí),黃酮含量差異性不顯著(p>0.05)。因此,從物料的節(jié)省方面考慮,選擇35%、40%、45%作為正交實(shí)驗(yàn)水平。

    圖1 乙醇濃度對(duì)黃酮含量的影響Fig.1 Effect of ethanol concentration on flavonoid content

    2.1.2 液料比對(duì)黃酮類物質(zhì)乙醇提取法的影響 一般而言,液料比是傳質(zhì)推動(dòng)力的直接體現(xiàn),隨著液料比的增大,傳質(zhì)推動(dòng)力增大,整個(gè)溶媒的傳質(zhì)過(guò)程加快[20],加 入 提 取 溶 劑 過(guò) 多 又 會(huì) 增 加 成 本 。 按 照 方 法

    1.2.2,以玫瑰花為對(duì)照,討論了不同的液料比對(duì)玫瑰花渣提取液中黃酮含量的影響。由圖2可以看出,隨著液料比的增大,黃酮含量的變化幅度較小,玫瑰花與玫瑰花渣均顯示較為相似的變化趨勢(shì)。液料比為55∶1時(shí),玫瑰花和玫瑰花渣的黃酮含量均處于最大值,分別為3.31mg/g樣品和1.95mg/g樣品。因此選擇液料比(g/g)50∶1、55∶1、60∶1作為正交實(shí)驗(yàn)水平。

    2.1.3 提取溫度對(duì)黃酮類物質(zhì)乙醇提取法的影響 按照方法1.2.2,以玫瑰花為對(duì)照,討論了不同的提取溫度對(duì)玫瑰花渣提取液中黃酮含量的影響。由圖3可以看出,提取溫度對(duì)于玫瑰花和玫瑰花渣中黃酮的提取含量影響均不顯著,基于能耗的考慮,選擇30℃作為正交實(shí)驗(yàn)的唯一水平。

    圖2 液料比對(duì)黃酮含量的影響Fig.2 Effect of molar ratio of the substrates on flavonoid content

    圖3 提取溫度對(duì)黃酮含量的影響Fig.3 Effect of reaction temperature on flavonoid content

    2.1.4 提取時(shí)間對(duì)黃酮類物質(zhì)乙醇提取法的影響 按照方法1.2.2,以玫瑰花為對(duì)照,討論了不同的提取時(shí)間對(duì)玫瑰花渣提取液中黃酮含量的影響。由圖4可以看出,提取時(shí)間對(duì)于玫瑰花和玫瑰花渣中黃酮的提取含量影響均不顯著,基于能耗的考慮,選擇30min作為正交實(shí)驗(yàn)的唯一水平。

    圖4 提取時(shí)間對(duì)黃酮含量的影響Fig.4 Effect of reaction time on flavonoid content

    2.2 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化玫瑰花和玫瑰花渣黃酮提取工藝條件

    根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,分別對(duì)玫瑰花和玫瑰花渣黃酮提取工藝進(jìn)行正交設(shè)計(jì)。選擇對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較大的兩個(gè)單因素:乙醇濃度和液料比(g/g)進(jìn)行正交設(shè)計(jì),固定提取溫度30℃和提取時(shí)間30min。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2。

    表2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)分析表Table 2 Orthogonal Test Results

    表3 正交實(shí)驗(yàn)方差分析表Table 3 Orthogonal array design and anova results

    以黃酮含量為因變量,玫瑰花和玫瑰花渣黃酮提取實(shí)驗(yàn)的分析結(jié)果見(jiàn)表2、方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。從表2中可以看出,各因素對(duì)玫瑰花黃酮提取效果的影響程度為:乙醇濃度>時(shí)間>液料比>溫度,各因素對(duì)玫瑰花渣黃酮提取效果的影響程度為:乙醇濃度>液料比>溫度>時(shí)間。在a=0.05水平上,乙醇濃度對(duì)玫瑰花、玫瑰花渣中黃酮的提取效果影響顯著,液料比、時(shí)間和溫度對(duì)黃酮的提取效果影響不顯著(表3)。玫瑰花黃酮最佳提取工藝為:乙醇濃度45%、液料比(g/g)為60∶1、提取溫度30℃、提取時(shí)間為30min;玫瑰花渣黃酮最佳提取工藝為乙醇濃度45%、液料比(g/g)為60∶1、提取時(shí)間為30min、提取溫度30℃,由以上可知,兩個(gè)最優(yōu)條件一致。

    2.3 優(yōu)化條件的結(jié)果驗(yàn)證

    將以上優(yōu)化的反應(yīng)條件進(jìn)行3組驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)明顯差異(表4),表明正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化的工藝條件可行。

    表4 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證Table 4 Verification results of Orthogonal test

    2.4 抗氧化活性研究

    常用體外抗氧化測(cè)定方法可分為4類:a.活性氧自由基清除能力,包括羥自由基和超氧自由基;b.基于氫原子轉(zhuǎn)移(HAT)的檢測(cè)方法有ORAC(氧自由基吸收能力)法、TRAP法、PCL(化學(xué)發(fā)光法)法、β-胡蘿卜素亞油酸體系、LDL(低密度脂蛋白)氧化法等;c.基于SET反應(yīng)機(jī)制的抗氧化實(shí)驗(yàn)方法有福林酚法、DPPH法、ABTS法、FRAP等;d.金屬離子螯合法。基于不同的抗氧化機(jī)理以及實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)條件,本課題選擇了兩種實(shí)驗(yàn)機(jī)理的自由基清除方法對(duì)所得樣品進(jìn)行測(cè)定。圖5~圖7分別為不同濃度的黃酮凍干粉對(duì)羥自由基、ABTS+自由基和DPPH自由基的清除能力結(jié)果。從圖5~圖7可以看出,不同濃度下的黃酮凍干粉對(duì)三種自由基的清除能力表現(xiàn)不同。對(duì)于相同自由基的清除實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),隨著黃酮凍干粉濃度的增加,清除自由基的能力也隨之增加。經(jīng)過(guò)計(jì)算得到IC50。如表5所示。

    圖5 不同濃度黃酮凍干粉對(duì)羥自由基的清除能力Fig.5 OH free radical scavenging rates of flavones freeze-dried powder

    圖6 不同濃度黃酮凍干粉對(duì)ABTS+自由基的清除能力Fig.6 ABTS free radical scavenging rates of flavones freeze-dried powder

    圖7 不同濃度黃酮凍干粉對(duì)DPPH自由基的清除能力Fig.7 DPPH free radical scavenging rates of flavones freeze-dried powder

    表5 IC50結(jié)果(μg/mL)Table 5 Results of IC50(μg/mL)

    從表5可以看出,玫瑰花黃酮與玫瑰花渣黃酮對(duì)三種自由基均具有清除能力,發(fā)現(xiàn)除ABTS+自由基清除實(shí)驗(yàn)外,玫瑰花黃酮對(duì)于羥自由基和DPPH自由基的清除能力略高于玫瑰花渣黃酮的清除能力,但相差不大。馮作山在研究玫瑰花渣時(shí)也得到相似結(jié)果[12]。其中,兩種黃酮凍干粉對(duì)羥自由基清除率的IC50(0.12、0.15μg/mL)小于對(duì)ABTS+和DPPH自由基清除率的IC50,說(shuō)明黃酮凍干粉對(duì)羥自由基的清除能力強(qiáng)于對(duì)另外兩種自由基的清除能力。其中,DPPH自由基清除率的IC50(68.08、78.18μg/mL)最大,說(shuō)明對(duì)于三種自由基而言,DPPH自由基的清除率最弱。從該抗氧化結(jié)果可以看出,對(duì)于相同樣品,評(píng)價(jià)體外抗氧化性需根據(jù)不同抗氧化機(jī)理進(jìn)行綜合評(píng)價(jià),才可得到有效結(jié)論。

    3 結(jié)論

    本實(shí)驗(yàn)同時(shí)得到了玫瑰花黃酮和玫瑰花渣黃酮的最優(yōu)提取方案均為:乙醇濃度為45%,液料比(g/g)為60∶1,提取時(shí)間30min,提取溫度30℃。對(duì)提取得到的黃酮進(jìn)行冷凍干燥,得到玫瑰花黃酮和玫瑰花渣黃酮的凍干粉。最后對(duì)所得黃酮進(jìn)行羥自由基、ABTS+自由基和DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn),并得到IC50,發(fā)現(xiàn)玫瑰花黃酮和玫瑰花渣黃酮凍干粉對(duì)三種自由基均具有清除能力,且玫瑰花黃酮的抗氧化活性較高于玫瑰花渣黃酮,三種自由基清除實(shí)驗(yàn)作比較發(fā)現(xiàn),兩種黃酮凍干粉對(duì)于羥自由基的清除能力高于ABTS+自由基和DPPH自由基,其中DPPH自由基的清除能力最小。

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    Technological conditions and antioxidant activities of the flavonoid extracted from rose and rose residue

    ZHANG Jia-chan1,XIE Ya-fei1,YU Dan1,JIANG Xiao-yan1,WANG Chang-tao1,SUN Bao-guo2,*
    (1.Beijing Technology&Business University,Beijing Key Laboratory of Plant Resources Research and Development,Beijing 100048,China;2.Beijing Technology&Business University,Beijing Higher Institution Engineering Research Center of Food Additives and Ingredients,Beijing 100048,China)

    Selecting rose residue as the research object,compared with rose,the optimal flavonoid extraction conditions of ethanol extraction were obtained by Orthogonal Test,on the basis of one factor tests.Antioxidant activities were tested,using crude extract lyophilized power.The optimal condition of rose and rose residue ethanol extraction were ethanol concentration 45% ,liquid to solid ratio (g/g) 60∶1,temperature 30℃ ,extraction time 30min.Under this condition ,flavonoids from rose and rose residue were respectively (4.71 ±0.07 )mg/g and (2.31±0.08)mg/g.Antioxidant activities of rose residue were investigated with the method of scavenging ·OH ,ABTS+· and DPPH·.IC50was calculated.Results indicated that the flavonoid extract from rose residue had antioxidant activities as well as that from rose.Orders of these three free radical-scavenging activities was ·OH-scavenging activity>ABTS+·-scavenging activity>DPPH·-scavenging activity.

    rose residue;rose;ethanol extraction;extraction rate

    TS202.3

    B

    1002-0306(2014)22-0226-05

    10.13386/j.issn1002-0306.2014.22.041

    2013-12-23

    張佳嬋(1987-),女,碩士研究生,中級(jí)職稱,研究方向:食品生物技術(shù)。

    * 通訊作者:孫寶國(guó)(1961-),男,博士,教授,研究方向:食品香料與風(fēng)味化學(xué)。

    質(zhì)檢公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(201310132)。

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