卡介菌多糖核酸治療白癜風(fēng)68例臨床療效及對免疫調(diào)節(jié)作用觀察

瞿理華

（醴陵市中醫(yī)院，湖南醴陵412200）

卡介菌多糖核酸治療白癜風(fēng)68例臨床療效及對免疫調(diào)節(jié)作用觀察

瞿理華

（醴陵市中醫(yī)院，湖南醴陵412200）

目的觀察卡介菌多糖核酸治療白癜風(fēng)的臨床療效。方法將68例白癜風(fēng)患者隨機(jī)分為兩組，治療組36例肌注卡介菌多糖核酸注射液聯(lián)合外用30%補(bǔ)骨脂酊，對照組32例單純外用30%補(bǔ)骨脂酊，給藥3個(gè)月。分別用流式細(xì)胞術(shù)和ELISA方法檢測卡介苗多糖核酸治療白癜風(fēng)前后患者外周血T細(xì)胞亞群、IL－10和IFN－γ的水平。結(jié)果治療組總有效率為91.7%，對照組總有效率59.4%，治療組顯著優(yōu)于對照組（P＜0.01）?？ń榫嗵呛怂嶂委熀?，患者CD4＋百分比及CD4＋／CD8＋比值較治療前升高，CD8＋百分比降低，IFN－γ水平升高（P＜ 0.05），IL－10水平下降（P＜0.05）。結(jié)論卡介菌多糖核酸可顯著改善患者細(xì)胞免疫功能，能有效治療白癜風(fēng)。

卡介菌多糖核酸；白癜風(fēng)；臨床療效；免疫調(diào)節(jié)

白癜風(fēng)是一種獲得性的皮膚色素異常，通常在兒童期或青年期發(fā)病，大約一半的病例在20歲以前發(fā)病，病因不明，其發(fā)病機(jī)理多與機(jī)體免疫紊亂有關(guān)，目前認(rèn)為Th1／Th2失衡是引起細(xì)胞免疫異常的關(guān)鍵，也是造成免疫功能低下、自身免疫性疾病及變態(tài)反應(yīng)的主要原因［1～3］。多年來的研究表明，卡介苗（BCG）及卡介菌多糖核酸提取物（BCG－PSN）可特異性增強(qiáng)機(jī)體的Th1型細(xì)胞免疫反應(yīng)，抑制Th2型細(xì)胞免疫反應(yīng)，進(jìn)而維持兩者之間的平衡［4］。2011年4月～2013年2月，我院采用卡介菌多糖核酸（商品名：斯奇康，湖南斯奇生物制藥有限公司生產(chǎn)）治療白癜風(fēng)68例，取得一定療效，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 68例患者均為2011年4月～2013年2月我院門診確診的白癜風(fēng)患者，按就診順序?qū)⒒颊叻譃閮山M：治療組36例，男19例，女17例；病程3月～15年，平均7.3年；年齡12～50歲，平均32.8歲。對照組32例，男16例，女16例；病程2月～18年，平均7.1年；年齡14～48歲，平均35.9歲。兩組的性別、年齡構(gòu)成比、病程差異無顯著性（P＞0.05），具有可比性，全部患者均無自身免疫性疾病及其他重大疾病，近1個(gè)月內(nèi)未經(jīng)治療。入組前、后檢查血、尿常規(guī)及肝腎功能均正常。

1.2 主要試劑 鼠抗人CD3－Per－CP／CD8－PE／CD4－FITC抗體、鼠免疫球蛋白IgG和溶血素購于美國BD公司。植物血凝素PHA－M和細(xì)胞培養(yǎng)液RPMI－1640購自Sigma公司，抗IL－10及IFN－γ抗體購于北京合富公司。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照2003年中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)會(huì)色素病學(xué)組《白癜風(fēng)的臨床分型及療效標(biāo)準(zhǔn)》［5］及《臨床皮膚病學(xué)》［6］制定診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 方法

1.4.1 治療方法 治療組：肌注卡介菌多糖核酸（湖南斯奇生物制藥有限公司生產(chǎn)），每次2 mL，隔日一次，每月隨診一次，連續(xù)肌注3個(gè)月。同時(shí)外用30%補(bǔ)骨脂酊，早晚患處各用1次。對照組：外用30%補(bǔ)骨脂酊，早晚患處各用1次。

1.4.2 外周血單一核細(xì)胞（PBMC）的分離與培養(yǎng) 所有患者取外周靜脈血，用淋巴細(xì)胞分離液分離單一核細(xì)胞。用含10%血清的RPMI－1640培養(yǎng)液調(diào)細(xì)胞濃度至1×106·mL－1，接種于24孔板，每孔1 mL。細(xì)胞懸液加入PHA終濃度為100μg·mL－1，37℃，5%二氧化碳孵箱內(nèi)培養(yǎng)。

1.4.3 T細(xì)胞亞群的檢測 采用流式細(xì)胞術(shù)，按照試劑盒說明書操作步驟進(jìn)行。

1.4.4 IL－10和IFN－γ的檢測 PBMC體外培養(yǎng)48 h后，收集上清液，用ELISA方法按照試劑盒說明書分別測定IL－10和IFN－γ的含量。

1.4.5 療效判定 參照2003年中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)會(huì)色素病學(xué)組《白癜風(fēng)的臨床分型及療效標(biāo)準(zhǔn)》制定。痊愈：白斑全部消失，恢復(fù)正常膚色；顯效：恢復(fù)正常膚色的皮損面積≥50%；有效：恢復(fù)正常膚色的皮損面積＜50%≥10%；無效：恢復(fù)正常膚色的皮損面積＜10%或無改變?？傆行剩剑ㄈ龜?shù)＋顯效例數(shù)＋有效例數(shù)）／完成例數(shù)× 100%，顯效率 ＝（痊愈例數(shù) ＋顯效例數(shù)）／完成例數(shù) × 100%，痊愈率＝痊愈例數(shù)／完成例數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 臨床療效 臨床療效結(jié)果見表1，治療組痊愈率為41.7%，總有效率為91.7%；對照組痊愈率為15.6%，總有效率為59.4%，兩組總有效率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

2.2 兩組患者治療前后T淋巴細(xì)胞亞群變化的比較見表2

治療組治療后CD4＋百分比及CD4＋／CD8＋比值升高，CD8＋百分比降低，與治療前比較，差異有顯著性（P＜0.05）。而對照組治療前后CD4＋，CD8＋及CD4＋／CD8＋雖有變化，但差異無顯著性。

2.3 兩組患者治療前后IL－10和IFN－γ水平的比較見表3 治療組治療后IL－10水平降低，IFN－γ升高，均與治療前比較差異有顯著性（P＜0.05）。對照組治療前后IFN－γ和IL－10水平比較差異無顯著性。

表1 兩組白癜風(fēng)治療效果比較（例，%）

表2 兩組患者治療前后T淋巴細(xì)胞亞群變化的比較

表3 兩組患者治療前后IL－10和IFN－γ水平的比較

2.4 不良反應(yīng) 治療組有部分患者有注射部位疼痛，但不影響治療，且迅速自行消退。

3 討論

白癜風(fēng)是一種常見難治的色素脫失性皮膚粘膜病，發(fā)病機(jī)制目前研究表明可能有四種：自身免疫、神經(jīng)體液因素、自身細(xì)胞毒性和黑素細(xì)胞自毀學(xué)說［7］。已有研究發(fā)現(xiàn)［8］白癜風(fēng)的細(xì)胞免疫學(xué)證據(jù)主要表現(xiàn)在外周血CD4＋細(xì)胞下降，而皮損局部浸潤卻以CD8＋細(xì)胞為主。T淋巴細(xì)胞亞群的比例能較客觀地反映機(jī)體的細(xì)胞免疫水平，其中CD4＋／CD8＋比值稱為免疫調(diào)節(jié)指數(shù)。CD4＋的升高將引起機(jī)體免疫調(diào)節(jié)指數(shù)的上升，從而改善患者的細(xì)胞免疫狀態(tài)。CD4＋T輔助細(xì)胞根據(jù)功能的不同分為兩種亞型（TH1和TH2）。TH1細(xì)胞產(chǎn)生IFN－γ和IL－2等，主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答，在抗感染、移植排斥反應(yīng)和自身免疫病的過程中起重要作用；而TH2細(xì)胞產(chǎn)生IL4、IL－6及IL－10等，主要介導(dǎo)體液免疫，在過敏反應(yīng)中起主導(dǎo)作用。

斯奇康注射液為一種新型的免疫調(diào)節(jié)劑，由核酸及多糖等多種免疫活性物質(zhì)制成，它是在卡介苗素基礎(chǔ)上，通過改進(jìn)工藝，解決了其他免疫調(diào)節(jié)劑大分子蛋白清除不全等缺點(diǎn)，使斯奇康注射液更易于吸收，減少了過敏反應(yīng)，副作用更小。其主要作用機(jī)理是通過增強(qiáng)機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞免疫，調(diào)節(jié)體液免疫，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，穩(wěn)定肥大細(xì)胞，減少其脫顆粒所釋放的活性物質(zhì)以提高機(jī)體的免疫力。尤其對T細(xì)胞的致敏，產(chǎn)生細(xì)胞介導(dǎo)的傳染免疫，致敏T細(xì)胞在抗原的特異性刺激下分化，增殖并合成釋放出系列淋巴因子，由于淋巴因子的綜合協(xié)同作用，從而發(fā)揮細(xì)胞免疫功能，引起特異性抗體生成，達(dá)到對病變組織的排斥目的。

本研究顯示，白癜風(fēng)患者使用卡介菌多糖核酸后，外周血CD4＋百分比及CD4＋／CD8＋比值升高，CD8＋百分比降低，IFN－γ水平升高，IL－10水平降低。提示卡介菌多糖核酸可引起機(jī)體免疫調(diào)節(jié)指數(shù)的上升；并通過誘導(dǎo)IFN－γ的產(chǎn)生，使TH1／TH2平衡向TH1方向轉(zhuǎn)換，TH1細(xì)胞優(yōu)勢相對增強(qiáng)，有利于細(xì)胞免疫功能的改善。

本文應(yīng)用卡介菌多糖核酸肌注聯(lián)合補(bǔ)骨脂酊治療白癜風(fēng)，治療組總有效率為91.7%，對照組總有效率59.4%，治療組療效明顯優(yōu)于對照組，且安全性高，表明卡介菌多糖核酸可顯著改善患者細(xì)胞免疫功能，能有效治療白癜風(fēng)，值得臨床進(jìn)一步推廣使用。

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［5］中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)會(huì)色素病學(xué)組.白癜風(fēng)的臨床分型及療效標(biāo)準(zhǔn)（2003年修訂稿）［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志，2004，3（1）：65.

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Study on immunity modulation and clinical efficacy in treating 68 vitiligo patientsw ith polysaccharide nucleic acid fraction of Bacillus Calmette Guerin

QU Li-hua
（Liling Hospital of Traditional Chinese Medicine，Liling 412200，China）

ObjectiveTo observe the curative effectof polysaccharide nucleic acid fraction of Bacillus Calmette Guerin（BCG－PSN）to cure vitiligo.Methods68 vitiligo patients were randomLy divided into two groups.Treatment group was given BCG－PSN and Buguzhi Tincture，control group was only given Buguzhi Tincture，the course of treatmentwas 3 month.The level of T－lymphocyte sub－populations，IL－10and IFN－γin the peripheral blood of all patientsweremeasured by flow cytometry and ELISA methods before and after treatmentwith BCG－PSN.ResultsThe total effective rate of treatment group was 91.7%.The total effective rate of control group was 59.4%，the curative effect of treatment group was significantly better than control group（P＜0.01）.After treating with BCG－PSN，the percentage of CD4＋，CD4＋／CD8＋ratio，the level of IFN－γwere significantly increased，the level of IL－10 and the percentage of CD8＋was decreased compared with those before treatment（P＜0.05）.ConclusionBCG－PSN can markedly improve cellular immunity function and effectively cure vitiligo.

Polysaccharide nucleic acid fraction of Bacillus Calmette Guerin（BCG－PSN）；Vitiligo；Clinical efficacy；immunitymodulation

R969.4

：A

2095－5375（2014）03－0182－003

瞿理華，女，主管藥師，研究方向：醫(yī)院藥房管理及新藥研究開發(fā)，E－mail：16945548＠qq.com