黃花三寶木化學(xué)成分研究*

覃其昶,何翊,黃光影,黃榮韶,李良波

(1.廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院,南寧 530004;2.廣西壯族自治區(qū)馬山縣農(nóng)業(yè)局,馬山 530600)

黃花三寶木化學(xué)成分研究*

覃其昶1,何翊1,黃光影2,黃榮韶1,李良波1

(1.廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院,南寧 530004;2.廣西壯族自治區(qū)馬山縣農(nóng)業(yè)局,馬山 530600)

目的 研究廣西黃花三寶木(Trigonostemon lutescensY.T.Chang et J.Y.Liang)的化學(xué)成分。方法對(duì)廣西黃花三寶木的枝葉乙醇提取物的石油醚萃取部分進(jìn)行色譜分離,用波譜方法和理化性質(zhì)鑒定各化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果分離得到10種化合物,分別為十四碳烷醇、1-烯-3-酮-白樺脂酸甲酯、膽甾烷-4-烯-3-酮、3β-羥基-4-烯-膽甾烷、十八碳-9, 12-二烯酸、克羅烷-4,11-二烯-17-酸甲酯、11α-羥基貝殼杉烷-16-烯、麥角甾烷-5-烯-7-酮、9-烯-齊墩果酸乙酯、3-乙?；?9烯-齊墩果酸。結(jié)論10種化合物均為首次從黃花三寶木中分離得到。

黃花三寶木;化學(xué)成分;三萜

黃花三寶木(Trigonostemon lutescensY.T.Chang et J.Y.Liang)屬于大戟科三寶木屬(Triginistemon genus)植物,是廣西特有的藥用植物[1]。三寶木屬植物在泰國(guó)和我國(guó)是常用的民間藥[2],在泰國(guó),Trigonostemon reidioides已用作解毒劑、祛痰、潤(rùn)腸通便劑以及外用防腐劑[3],孟侖三寶木(Trigonostemon lutescens.Lii Y.T. Chang)在云南被當(dāng)作草藥用于治療哮喘、腹瀉等[4]。從三寶木屬植物分離出多種化合物,如生物堿類[5]、二萜類[2,6]、菲類[7]等。研究表明,三寶木屬植物具有多種藥理活性,如細(xì)胞毒活性[6]、抗病毒活性[8]、滅蚤殺螨活性[6,9]、抑菌活性[7]等。筆者對(duì)黃花三寶木枝葉乙醇提取物的石油醚萃取部分進(jìn)行分離、鑒定得到10種化合物,均為首次從該屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

1.1 儀器 VNMRS 600MHz磁共振光譜儀(美國(guó)Varian公司),ESQUIRE HCT質(zhì)譜儀(美國(guó)Bruker. Daltonics公司),ABOROTA 4000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(德國(guó)Heidolph儀器公司),薄層色譜用熒光硅膠板GF254、200～300 μm柱層析硅膠(青島海洋化工廠),RP-18 40～60 μm反相硅膠(Merck公司),凝膠柱層析材料Sephadex LH-20(Pharmacia公司)。

1.2 材料 黃花三寶木的新鮮枝葉于2011年4月采于廣西壯族自治區(qū)崇左市,經(jīng)廣西植物研究所劉演研究員鑒定為大戟科三寶木屬植物黃花三寶木(Trigonostemon lutescensY.T.Chang et J.Y.Liang)。植物標(biāo)本保存于廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取分離 取風(fēng)干、粉碎黃花三寶木枝葉30 kg,用工業(yè)乙醇回流提取3次,每次1 h,過(guò)濾、減壓濃縮,得到濃縮膏加水懸浮后分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,減壓濃縮得到石油醚萃取物475 g。將石油醚萃取物經(jīng)硅膠柱層析,以石油醚-乙酸乙酯[(100∶0)～(0∶100)]梯度洗脫,得到4個(gè)流分(Fr 1,Fr 2,Fr 3,Fr 4)。Fr 3(78 g)經(jīng)反相硅膠柱層析,以甲醇-水[(40∶60)～(100∶0)]梯度洗脫得到3個(gè)流分,Fr3-1、Fr3-2、Fr3-3。Fr3-1先經(jīng)反相硅膠柱層析,以甲醇-水[(30∶70)～(100∶0)]梯度洗脫,再經(jīng)硅膠柱層析,以石油醚-丙酮[(60∶1)～(0∶1)]梯度洗脫得到化合物5(80 mg)。Fr3-2先經(jīng)硅膠柱層析,以石油醚-丙酮[(500∶1)～(1∶1)]、石油醚-乙酸乙酯[(60∶1)～(10∶1)]依次梯度洗脫,再經(jīng)反相硅膠柱層析,以甲醇-水系統(tǒng)[(30∶70～100∶0)]洗脫,最后經(jīng)凝膠柱層析,以甲醇-三氯甲烷(1∶1)洗脫,得到化合物1(60 mg)、化合物2(24 mg)、化合物3(105 mg)、化合物4(43 mg)、化合物6(90 mg)、化合物7(100 mg)、化合物8(34 mg)、化合物9(40 mg)。Fr3-3先經(jīng)凝膠柱層析,以甲醇-三氯甲烷(1∶1)洗脫,再經(jīng)硅膠柱層析,以石油醚-丙酮系統(tǒng)[(100∶1)～(1∶1)]梯度洗脫,最后重結(jié)晶得到化合物10(18 mg)。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果

2.2.1 化合物1 白色細(xì)針晶,(三氯甲烷-甲醇), ESI-MS(+)m/z:215[M+H]+,結(jié)合碳?xì)渥V推測(cè)其分子式為C14H30O。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:3.57 (2 H,J=6.6 Hz,H-1),1.50(2 H,m,H-2),1.18～1.28(22 H,br),0.82(3 H,J=7.2 Hz,H-14);13CNMR(CDCl3,150 MHz)δ:62.1(t,C-1),31.8(d,C-2),24.7(t,C-3),28.9(t,C-4～C-11),31.0(t,C-12), 21.7(t,C-13),13.1(q,C-14)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道十四碳烷醇一致。

2.2.2 化合物2 白色細(xì)針晶(三氯甲烷-甲醇),ESIMS(+)m/z:453[M+H]+,分子式為C31H46O3。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:6.67(1 H,m,H-2), 5.53(1H,d,J=10.8 Hz,H-1),4.86(2 H,m,H-29), 3.57(3 H,s,H-OCH3),0.73(3 H,s,H-23),0.77 (3 H,s,H-24),0.83(3 H,s,H-25),0.90(3 H,s,H-26),0.93(3 H,s,H-27),0.99(3 H,s,H-29);13C-NMR (CDCl3,150 MHz)δ:135.1(d,C-1),135.0(d,C-2), 200.8(s,C-3),40.8(s,C-4),36.2(d,C-5),52.4(t,C-6),40.0(t,C-7),42.6(s,C-8),39.0(d,C-9),41.7 (s,C-10),36.3(t,C-11),34.6(t,C-12),48.0(d,C-13),44.6(s,C-14),34.0(t,C-15),26.9(t,C-16),56. 5(s,C-17),49.9(d,C-18),56.9(d,C-19),149.6(s, C-20),20.4(t,C-21),16.9(q,C-22),14.7(q,C-23), 16.1(q,C-24),16.3(q,C-25),17.0(q,C-26),24.9 (q,C-27),173.1(s,C-28),31.3(q,C-29),110.1(t, C-30),50.4(q,C-OCH3)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道1-烯-3-酮-白樺脂酸甲酯一致。

2.2.3 化合物3 白色細(xì)長(zhǎng)針晶(三氯甲烷-甲醇), ESI-MS(+)m/z:385[M+H]+,分子式為C27H44O。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:5.69(1 H,s),0.91(6 H,d,J=7.2 Hz),0.96(3 H,d,J=7.2 Hz),1.02(3 H, s),1.04(3 H,s);13C NMR(CDCl3,150 MHz)δ:34.7 (t,C-1),38.6(t,C-2),198.7(s,C-3),122.7(d,C-4), 170.8(s,C-5),33.0(t,C-6),31.9(t,C-7),55.8(d,C-8),56.0(d,C-9),42.6(s,C-10),31.0(t,C-11),27.2 (t,C-12),38.6(s,C-13),53.8(d,C-14),25.0(t,C-15),23.2(t,C-16),45.8(d,C-17),17.7(q,C-18), 18.8(q,C-19),36.1(d,C-20),16.4(q,C-21),22.0 (t,C-22),20.0(t,C-23)32.8(t,C-24),35.6(d,C-25),11.0(q,C-26,27)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道中膽甾烷-4-烯-3-酮一致。

2.2.4 化合物4 無(wú)色細(xì)針晶(三氯甲烷-甲醇),ESIMS(+)m/z:387[M+H]+,分子式為C27H46O。1H-NMR (CDCl3,600 MHz)δ:5.18(1 H,d,J=7.8 Hz),0.91 (6 H,d,J=7.2 Hz),0.96(3 H,d,J=7.2 Hz),1.02 (3 H,s),1.04(3 H,s);13C-NMR(CDCl3,150 MHz) δ:42.4(t,C-1),39.8(t,C-2),70.7(d,C-3),120.6 (d,C-4),141.4(s,C-5),37.3(t,C-6),33.8(t,C-7), 55.8(d,C-8),56.0(d,C-9),42.6(s,C-10),28.1(t, C-11),25.8(t,C-12),38.6(s,C-13),53.8(d,C-14), 22.8(t,C-15),23.2(t,C-16),45.8(d,C-17),19.0(q, C-18),19.1(q,C-19),36.1(d,C-20),18.4(q,C-21), 22.0(t,C-22),20.0(t,C-23)32.8(t,C-24),35.6(d, C-25),11.3(q,C-26,27)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道中3β-羥基-4-烯-膽甾烷一致。

2.2.5 化合物5 無(wú)色短針晶(三氯甲烷-甲醇),ESIMS(+)m/z:281[M+H]+,結(jié)合碳?xì)渥V推測(cè)其分子式為C18H32O2。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:5.24(4 H,m),2.32(2 H,m),2.0(3 H,m),1.23-1.30(19 H, brs),0.80(3 H,t,J=7.2 Hz);13C-NMR(CDCl3, 150 MHz)δ:179.4(s,C-1),126.9(d),127.0(d), 128.7(d),129.0(d),33.1(t),30.9(t),30.9(t), 30.5(t),28.6(t),28.5(t),26.2(t),26.1(t),26.1 (t),24.6(t),23.6(t),21.7(t),21.6(t),14.1(q,C-18)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道中十八碳-9,12-二烯酸一致。

2.2.6 化合物6 淡黃色油狀液體,ESI-MS(+)m/z: 319[M+H]+,分子式為C21H34O2。1H-NMR(CDCl3, 600 MHz)δ:4.80(1 H,d,J=1.8 Hz),4.74(1 H,d,J=1.8 Hz),4.68(1 H,d,J=1.8 Hz),4.58(1 H,d,J=1.8 Hz),3.59(3 H,s),1.04(3 H,s),1.30(3 H, s),1.06(3 H,t,J=7.2 Hz);13C-NMR(CDCl3,150 MHz)δ:21.5(t,C-1),27.3(t,C-2),33.0(t,C-3), 154.3(s,C-4),39.8(s,C-5),31.7(t,C-6),20.1(t,C-7),54.4(d,C-8),36.0(s,C-9),49.1(d,C-10),26.4 (t,C-11),32.6(t,C-12),146.4(s,C-13),28.8(t,C-14),11.8(q,C-15),112.5(t,C-16),173.6(s,C-17), 102.2(t,C-18),19.3(q,C-19),14.3(q,C-20),49.3 (q,C-OCH3)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道中克羅烷-4,11-二烯-17-酸甲酯一致。

2.2.7 化合物7 白色細(xì)針晶(三氯甲烷-甲醇),ESIMS(+)m/z:289[M+H]+,分子式為C20H32O。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:4.73(1 H,s),4.67 (1 H,s),3.13(1 H,m),0.95(3 H,s),0.91(3 H,s), 0.70(3 H,s);13C-NMR(CDCl3,150 MHz)δ:38.7(t, C-1),18.2(t,C-2),41.1(t,C-3),37.8(s,C-4),54.8 (s,C-5),20.0(t,C-6),39.7(t,C-7),42.9(s,C-8), 54.2(d,C-9),38.0(s,C-10),78.0(d,C-11),33.2(t, C-12),43.0(d,C-13),27.3(t,C-14),48.0(t,C-15), 154.8(s,C-16),102.0(t,C-17),15.5(q,C-18),28.4 (q,C-19),17.6(q,C-20)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道中11α-羥基貝殼杉烷-16-烯一致。

2.2.8 化合物8 白色粉末,ESI-MS(+)m/z:399 [M+H]+,分子式為C28H46O。1H-NMR(CDCl3, 600 MHz)δ:6.10(1 H,s,H-6),5.17(2 H,m,H-22, 23),3.65(1 H,br s,Hax-3),2.48(1 H,m,Heq-4), 2.35(1 H,m,Hax-4),2.23(1 H,dd,J=11.0, 11.2 Hz,H-8),1.94(1 H,m,H-20),1.82(1 H,m,H-24),1.44(1 H,m,H-25),1.17(3 H,s,H-19),0.99 (3 H,d,J=6.6 Hz,H-21),0.89(3 H,d,J=6.8 Hz,H-28),0.81(3 H,d,J=6.7 Hz,H-26),0.79(3 H,d,J= 6.8 Hz,H-27),0.67(3 H,s,H-18);13C-NMR(CDCl3, 150 MHz)δ:36.3(t,C-1),31.0(t,C-2),30.4(t,C-3),41.8(t,C-4),160.4(s,C-5),125.9(d,C-6), 198.5(s,C-7),45.3(d,C-8),50.0(d,C-9),38.5(s, C-10),21.1(t,C-11),38.5(t,C-12),43.0(s,C-13), 49.9(d,C-14),26.3(t,C-15),28.6(t,C-16),54.7(d, C-17),12.2(q,C-18),17.3(q,C-19),39.9(d,C-20), 21.1(q,C-21),35.6(t,C-22),31.9(t,C-23),42.8(d, C-24),33.1(d,C-25),17.6(q,C-26),19.6(q,C-27), 20.0(q,C-28)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道中麥角甾烷-5-烯-7-酮一致。

2.2.9 化合物9 白色粉末,ESI-MS(+)m/z:469 [M+H]+,結(jié)合碳?xì)渥V推測(cè)其分子式為C32H52O2。1HNMR(CD3OD,600 MHz)δ:5.69(1 H,dd,J1= 10.2 Hz,J2=15.6 Hz),4.89(2 H,q,J=7.2 Hz),1.29 (3 H,t,J=7.2 Hz),2.84(1H,dd,J=3.9,13.9 Hz,H-18),2.56(1H,ddd,J=7.4,10.8,16.1Hz,H-2β),2.40 (1H,ddd,J=3.7,7.0,16.1 Hz,H-2α),1.15(3H,s,H-27),1.08(3H,s,H-23),1.05(3H,s,H-25),1.03(3H, s,H-24),0.93(3H,s,H-30),0.90(3H,s,H-29),0.80 (3H,s,H-26);13C-NMR(CD3OD,150 MHz)δ:39.1 (t,C-1),34.2(t,C-2),27.7(t,C-3),47.4(s,C-4), 55.3(d,C-5),19.4(t,C-6),32.4(t,C-7),39.3(s,C-8),151.1(s,C-9),36.8(s,C-10),110.2(d,C-11), 32.4(t,C-12),43.6(d,C-13),41.7(s,C-14),27.7(t, C-15),23.6(t,C-16),46.9(s,C-17),41.0(d,C-18), 45.8(t,C-19),30.7(s,C-20),33.7(t,C-21),32.1(t, C-22),26.4(q,C-23),21.4(q,C-24),15.0(q,C-25), 17.0(q,C-26),26.0(q,C-27),173.0(s,C-28),33.0 (q,C-29),23.5(q,C-30),62.1(t,CH2-OCH2CH3), 14.3(q,CH3-OCH2CH3)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]報(bào)道中9-烯-齊墩果酸乙酯一致。

2.2.10 化合物10 白色粉末,ESI-MS(+)m/z:499 [M+H]+,結(jié)合碳?xì)渥V推測(cè)其分子式為C32H50O4。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:5.12(1H,t,J=3.6 Hz, H-12),3.15(1H,d,J=5.0 Hz,H-3),1.06,0.92, 0.86,0.85,0.83,0.70,0.68,(each 3H,s,7×CH3);13C NMR(CDCl3,150 MHz)δ:38.4(t,C-1),34.2(t,C-2),79.0(d,C-3),38.8(s,C-4),55.2(d,C-5),18.3 (t,C-6),32.6(t,C-7),39.3(s,C-8),159.6(s,C-9), 37.1(s,C-10),115.8(d,C-11),22.6(t,C-12),34.6 (t,C-13),41.6(s,C-14),27.7(t,C-15),23.4(t,C-16),46.5(s,C-17),40.9(d,C-18),45.8(t,C-19), 30.7(s,C-20),33.7(t,C-21),32.4(t,C-22),28.1(q, C-23),15.6(q,C-24),15.5(q,C-25),17.1(q,C-26),25.9(q,C-27),183.0(s,C-28),33.1(q,C-29),23.6 (q,C-30),170.0(s,CO-COCH3),21.0(q,CH3-COCH3)。以上理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道中3-乙?；?9烯-齊墩果酸一致。

3 討論

從本研究中,鑒定了3種三萜化合物:1-烯-3-酮-白樺脂酸甲酯(化合物2)、9-烯-齊墩果酸乙酯(化合物9)、3-乙?；?9烯-齊墩果酸(化合物10);2種二萜化合物:克羅烷-4,11-二烯-17-酸甲酯(化合物6)、11α-羥基貝殼杉烷-16-烯(化合物7);3種甾體化合物:膽甾烷-4-烯-3-酮(化合物3)、3β-羥基-4-烯-膽甾烷(化合物4)、麥角甾烷-5-烯-7-酮(化合物8);1種醇類化合物:十四烷醇(化合物1);1種酸類化合物:十八碳-9,12-二烯酸(化合物5)。化合物1～10均為首次從黃花三寶木分離得到。

[1] 覃海寧,劉演.廣西植物名錄[M].北京:科學(xué)出版社, 2010:170.

[2] TEMPEAM A,THASANA N,DAWORNKRICHARUT A,et al.In vitro cytotoxicity of some thai medicinal plants and daphnane diterpenoid fromTrigonostemon redioides[J]. Mahidol U J Pharm Sci,2002,29(3-4):25-31.

[3] LI Y X,MEI W L,ZUO W J,et al.Two new compounds fromTrigonostemon heterophyllus[J].Phytochemistry Lett, 2012,5(1):41-44.

[4] LI S F,DI Y T,HE H P,et al.Trigonoines A and B,two novel alkaloids from the leaves ofTrigonostemon lii[J]. Tetrahedron Lett,2011,52(25):3186-3188.

[5] KANCHANAPOOM T,KASAI R,CHUMSRI P,et al. Lotthanongine,an unprecedented flavonoidal indole alkaloid from the roots of Thai medicinal plant,Trigonostemon reidioides[J].Tetrahedron Lett,2002,43(16):2941-2943.

[6] TEMPEAM A,THASANA N,PAVARO C,et al.A new cytotoxicdaphnanediterpenoid,rediocideG,fromTrigonostemon reidioides[J].Chem Pharm Bull,2005,53 (10):1321-1323.

[7] YIN S,SU Z S,ZHOU Z W,et al.Antimicrobial diterpenes fromTrigonostemon chinensis[J].J Nat Prod,2008,71(8): 1414-1417.

[8] ALLARD P M,LEYSSEN P,MARTIN M T,et al.Antiviral chlorinated daphnane diterpenoid orthoesters from the bark and wood ofTrigonostemon cherrieri.[J].Phytochemistry, 2012,84:160-168.

[9] JAYASURIYA H,ZINK D L,SINGH S B,et al.Structure and stereochemistry of rediocide A,a highly modified daphnane fromTrigonostemon reidioidesexhibiting potent insecticidal activity[J].J Am Chem Soc,2000,122(20): 4998-4999.

[10] 李笑顏.藏藥川西千里光化學(xué)成分的研究[D].蘭州:蘭州理工大學(xué),2010:42-43.

[11] SIDDIQUI S,HAFEEZ F,BEGUM S,et al.Oleanderol,a new pentacyclic triterpene from the leaves of Nerium oleander[J].J Nat Products,1988,51(2):229-233.

[12] 周淑梅,周琨,肖定軍.南海小束格海綿中的系列甾酮化合物[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2005,17(4):48-430.

[13] 王增蕾.細(xì)薄星芒海綿和美麗屬海綿Callyspongia sp.活性成分研究[D].上海:第二軍醫(yī)大學(xué),2006:19-21.

[14] 周大穎.苗藥毛子草化學(xué)成分及藥理研究[D].佳木斯:佳木斯大學(xué),2006:26-31.

[15] 于德泉.分析化學(xué)手冊(cè)(七)核磁共振波譜分析[M].2版.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2003:561.

[16] 傅予.三種藏藥材的化學(xué)成分研究[D].成都:中國(guó)科學(xué)院成都生物研究所,2009:20-27.

[17] 王安偉.大葉魚骨木和豬肚木化學(xué)成分及藥理活性研究[D].桂林:廣西師范大學(xué),2008:19-21.

DOI 10.3870/yydb.2014.10.011

R282.71

A

1004-0781(2014)10-1299-04

2013-09-26

2013-11-25

*廣西大學(xué)自然科學(xué)資助研究課題(XBZ111472)

覃其昶(1988-),男,廣西南寧人,碩士,主要從事藥用植物資源生物活性成分研究。電話:(0)18078183863, E-mail:qichang.qin@163.com。

李良波(1980-),男,湖北仙桃人,講師,博士,主要從事植物化學(xué)和藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究工作。電話:0771-3235612,E-mail:llb100@126.com。