手性藥物分析方法研究進(jìn)展

楊沐，鐘文英，侯雯

(1. 中國(guó)藥科大學(xué)分析化學(xué)教研室，江蘇 南京 210009；2. 南京卡文迪許生物工程技術(shù)有限公司，江蘇 南京 210033)

手性藥物分析方法研究進(jìn)展

楊沐1,2，鐘文英1*，侯雯2

(1. 中國(guó)藥科大學(xué)分析化學(xué)教研室，江蘇 南京 210009；2. 南京卡文迪許生物工程技術(shù)有限公司，江蘇 南京 210033)

綜述了近10年來(lái)手性藥物分離檢測(cè)方法的發(fā)展，包括高效液相色譜法、氣相色譜法、毛細(xì)管電泳法，以及超臨界流體色譜法等，旨在為該領(lǐng)域的進(jìn)一步發(fā)展提供參考。

手性藥物；手性分析；對(duì)映異構(gòu)體

組成生物體的重要分子多為手性物質(zhì)，如氨基酸、糖、蛋白質(zhì)以及核酸等，然而實(shí)際上它們多以單一對(duì)映體形式存在，因此在疾病治療中開(kāi)啟該“鎖”需要與之唯一匹配的“鑰匙”，即單一對(duì)映體的手性藥物分子。

目前世界范圍內(nèi)市售藥物中逾三分之一具有手性結(jié)構(gòu)，新藥多傾向于以單一對(duì)映體形式申報(bào)[1]。手性藥物對(duì)映體多呈不同的藥理活性，代謝動(dòng)力學(xué)過(guò)程以及毒性方面也存在著顯著的差異。如(S , S)-乙胺丁醇具有抗結(jié)核作用，而(R , R)-型異構(gòu)體則會(huì)導(dǎo)致失明。因此，手性藥物需更加關(guān)注其用藥的安全性。

為了深入探尋手性藥物對(duì)映異構(gòu)體的生理活性與藥理作用，手性藥物分析得到迅速發(fā)展，成為藥學(xué)研究的重要領(lǐng)域之一。近年來(lái)，針對(duì)手性藥物分析方法的較為全面的綜述報(bào)道僅有1篇[2]，且側(cè)重于手性拆分，其他有關(guān)手性藥物分析方法的綜述大多是單獨(dú)對(duì)某一種分析方法進(jìn)行介紹，如氣相色譜（GC）法[3]、液相色譜法[4-5]、毛細(xì)管電泳法（CE）[6]以及超臨界流體色譜（SFC）法[7-8]等。本文全面地綜述手性藥物的常用分離分析方法，旨在為該領(lǐng)域的進(jìn)一步發(fā)展提供參考。

1 手性HPLC法

手性HPLC法是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來(lái)的，適用于極性強(qiáng)及熱穩(wěn)定性差的手性藥物分析。HPLC法拆分對(duì)映體有直接法和間接法2種方法，其中前者又分為手性流動(dòng)相添加劑法和手性固定相法，后者即為手性衍生化試劑法（CDR）[2]。

1.1 手性流動(dòng)相添加劑法

手性流動(dòng)相添加劑法分離測(cè)定手性異構(gòu)體分為2種途徑：1)添加的手性試劑與對(duì)映體作用形成非對(duì)映配合物，表現(xiàn)出不同的色譜行為從而實(shí)現(xiàn)分離檢測(cè)；2）手性添加劑與固定相作用形成動(dòng)態(tài)修飾的手性固定相，其與對(duì)映異構(gòu)體之間的吸附作用有明顯差異，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)映異構(gòu)體的拆分。該法的優(yōu)點(diǎn)是無(wú)需柱前衍生化，對(duì)固定相無(wú)特殊要求，且樣品可進(jìn)行可逆的非對(duì)映異構(gòu)體化配位，利于制備；缺點(diǎn)是應(yīng)用范圍有一定局限性，某些手性流動(dòng)相添加劑可能不穩(wěn)定，會(huì)干擾檢測(cè)。

Huang等[9]以磺丁基醚-β-環(huán)糊精（SBE-β-CD）為手性流動(dòng)相添加劑，采用反相HPLC法對(duì)4種分子中含有N-烷基結(jié)構(gòu)的外消旋體藥物（鹽酸昂丹司瓊、舒必利、鹽酸克倫特羅和奧美拉唑）進(jìn)行了手性拆分，分離效果良好。該課題組同樣也研究了環(huán)糊精的類型以及濃度對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，即分別以β-CD、羥丙基-β-環(huán)糊精（HP-β-CD）以及SBE-β-CD為手性流動(dòng)相添加劑檢測(cè)上述4種藥物的對(duì)映異構(gòu)體，結(jié)果表明只有SBE-β-CD體系能夠到達(dá)有效分離；隨著SBE-β-CD濃度的增加，對(duì)映體的分離度逐漸增加，但是增加至一定濃度后即達(dá)到飽和，且隨著手性添加劑的濃度增加，柱壓隨之增加，柱效降低，因此需選擇一個(gè)較為合適的濃度。該方法適用性良好，可用于大部分含有N-烷基結(jié)構(gòu)的重要生物手性對(duì)映體的分離分析。

Keunchkarian等[10]將手性配體交換試劑——金雞納生物堿與2價(jià)銅離子的配合物添加到流動(dòng)相中，采用傳統(tǒng)非手性色譜柱對(duì)α-氨基酸消旋體進(jìn)行了手性拆分。試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在流動(dòng)相中添加等物質(zhì)的量的2價(jià)銅離子與金雞納生物堿如辛可尼丁、奎寧或奎尼丁時(shí)，α-氨基酸與2價(jià)銅離子形成非對(duì)映體后可在該體系下得到分離；此外，應(yīng)用該方法時(shí)，可通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相中某些因素如pH值和甲醇的比例來(lái)得到適宜的保留時(shí)間和對(duì)映選擇性。

此外，Alizadeh[11]利用L-丙氨酸與Cu2+形成的手性配體試劑在C8柱（250 mm×4.6 mm，10 μm）上對(duì)阿替洛爾對(duì)映異構(gòu)體進(jìn)行了手性分離分析。試驗(yàn)中流動(dòng)相為水-甲醇（70∶30），其中L-丙氨酸與Cu2+的比例為2∶1，檢測(cè)波長(zhǎng)275 nm，進(jìn)樣體積15 μL。研究還發(fā)現(xiàn)待測(cè)樣品在C8色譜柱中的分離效果優(yōu)于C18色譜柱。該方法可用于分析合成樣品或人體血漿樣品。

1.2 手性固定相法

手性固定相法應(yīng)用較為廣泛，適用于各類化合物，可用于常規(guī)樣品及生物樣品的分析測(cè)定，定量分析方便可靠，然而有時(shí)樣品仍需柱前衍生化，對(duì)樣品結(jié)構(gòu)有一定要求，且價(jià)格昂貴。

Wang等[12]利用HPLC法對(duì)2010年版中國(guó)藥典收錄的8種外消旋藥物（尼群地平、非洛地平、奧美拉唑、吡喹酮、舒必利、鹽酸克倫特羅、鹽酸維拉帕米、馬來(lái)酸氯苯那敏）進(jìn)行了分離分析。實(shí)驗(yàn)中采用的條件如下：以直鏈淀粉衍生物為手性固定相的Chiralpak AD-H色譜柱或Chiralpak AS-H色譜柱，流動(dòng)相為正己烷與異丙醇的混合溶液，流速為0.7 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm，柱溫為25 ℃。堿性有機(jī)改性劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%時(shí)分離度最佳。

α-糖酸蛋白（AGP）非常穩(wěn)定，可作為手性選擇劑制備得到反相手性色譜柱，用途廣泛。Dubey等[13]采用手性AGP色譜柱對(duì)非麻醉性鎮(zhèn)痛劑酮咯酸外消旋體進(jìn)行了手性拆分以及檢測(cè)。優(yōu)化后的實(shí)驗(yàn)條件為：流動(dòng)相為0.1 mol·L-1磷酸鈉緩沖液（pH 4.5）-異丙醇（98 : 2），流速為1.0 mL·min-1，樣品采集時(shí)間為15 min，紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為322 nm。在該條件下，對(duì)映異構(gòu)體之間可達(dá)到基線分離（R=2.3）。該方法簡(jiǎn)便、選擇性強(qiáng)、精密度高，適用于酮咯酸的檢測(cè)。

研究人員對(duì)直鏈淀粉的苯基氨基甲酸酯衍生物中苯基的鄰位和間位分別進(jìn)行取代，制得不同的手性固定相，通過(guò)考察發(fā)現(xiàn)間位取代物對(duì)對(duì)映體的分離效果優(yōu)于鄰位取代物，且間位取代基不論是吸電子基團(tuán)還是供電子基團(tuán)均可改善對(duì)對(duì)映異構(gòu)體的分離效果。此外，取代基的性質(zhì)和數(shù)量同樣也對(duì)分離有影響[14]。

1.3 手性衍生化試劑法

當(dāng)某些樣品不宜直接拆分，或需提高其檢測(cè)靈敏度，以及需增加色譜體系的對(duì)映選擇性時(shí)，可選用手性衍生化試劑法。其應(yīng)用條件較為簡(jiǎn)便，可采用普通固定相與流動(dòng)相，且該法有助于增加紫外或熒光檢測(cè)器的檢測(cè)靈敏度。然而手性衍生化試劑法的局限性在于，其對(duì)衍生化試劑的光學(xué)純度要求較高，且各異構(gòu)體衍生化速率可能不同，從而影響到檢測(cè)效果。

研究人員建立了粟酒裂殖酵母的D-氨基酸氧化酶測(cè)定系統(tǒng)[15]。D-氨基酸在D-氨基酸氧化酶的催化作用下生成相應(yīng)的α-酮酸后再與1,3-苯并二茂-5,6-二胺（DMB）在有機(jī)溶劑中反應(yīng)，所得到的熒光化合物可在HPLC中分離定量，同時(shí)L-氨基酸的非酶促脫氨被抑制，避免了對(duì)D-氨基酸檢測(cè)的干擾。該方法解決了傳統(tǒng)HPLC方法中L-氨基酸信號(hào)峰掩蔽D-氨基酸信號(hào)峰的問(wèn)題。

Eto等[16]建立了一種超高效液相色譜法，可快速全面檢測(cè)分析蛋白質(zhì)氨基酸的D-型及L-型對(duì)映異構(gòu)體。在該方法中，手性衍生化試劑為4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜二唑（NBD-F），檢測(cè)器為圓二色譜，分析時(shí)間可縮減到5.5 min，且靈敏度高。該法可有效地分析及控制食品中D-氨基酸的含量。

2 毛細(xì)管電泳法

高效毛細(xì)管電泳（CE）法與其他方法相比，具有分離效能高、拆分模式多、成本較低的優(yōu)點(diǎn)[17-18]，因而成為目前手性分離分析的重要方法之一。

對(duì)于復(fù)雜樣品的分析，近年來(lái)二維毛細(xì)管電泳（2DCE）備受關(guān)注。張效偉等[19]將區(qū)帶電泳毛細(xì)管和膠束電動(dòng)毛細(xì)管通過(guò)一段帶微孔的聚四氟乙烯套管固定，搭建成二維毛細(xì)管電泳分離平臺(tái)。該方法用于分離分析鼠尿樣品中吲哚洛爾、普萘洛爾、尼莫地平和尼群地平4種手性藥物及其對(duì)映體，靈敏度高、重復(fù)性好、分離度佳，實(shí)現(xiàn)了尿樣中多種藥物及其對(duì)映體的同時(shí)分離。

毛細(xì)管電色譜近些年發(fā)展較為迅速，尤其是整體柱的制備，克服了傳統(tǒng)填充柱制備過(guò)程復(fù)雜等缺陷。雷雯等[20]將伊瑞霉素鍵合到甲基丙烯酸酯整體柱表面，制備得到手性毛細(xì)管整體柱，并在電色譜模式下考察了其拆分性能。課題組通過(guò)對(duì)有機(jī)改性劑種類、緩沖液pH值以及緩沖液濃度等條件進(jìn)行考察后得到優(yōu)化的色譜條件，并在該條件下對(duì)羅格列酮和5種氨基酸進(jìn)行了手性拆分，均達(dá)到基線分離，結(jié)果表明該手性毛細(xì)管柱拆分能力強(qiáng)，分析速度快。

文拉法辛分子中含有電化學(xué)發(fā)光（ECL）最強(qiáng)的叔胺基團(tuán)，因而有還原性，適于電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。研究人員優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，并在此條件下對(duì)文拉法辛對(duì)映異構(gòu)體進(jìn)行了檢測(cè)，條件為：檢測(cè)電位1.15 V，三聯(lián)吡啶釕濃度為5 mmol·L-1，檢測(cè)池pH值為9.0，檢測(cè)池緩沖液濃度為80 mmol·L-1，手性選擇劑為磺化-β-環(huán)糊精（S-β-CD，濃度為12 mmol·L-1），分離緩沖液濃度為30 mmol·L-1（pH3.0），進(jìn)樣電壓為13 kV，進(jìn)樣時(shí)間為12 s，分離電壓為15 kV。結(jié)果發(fā)現(xiàn)這2種對(duì)映異構(gòu)體在0.1～1 000 μg·L-1質(zhì)量濃度范圍內(nèi)與發(fā)光強(qiáng)度均呈良好線性關(guān)系，檢測(cè)限分別為0.01和0.05 μg·L-1，平均回收率為94%～100%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于3.2%，該方法靈敏度高、快速、經(jīng)濟(jì)[21]。

研究人員以雙（6-氧-β-羧甲基-1,4-丁烯二酸單酯）-β-環(huán)糊精（DOCB-β-CD）為CE法手性添加劑，對(duì)2種藥物手性對(duì)映體和4種氨基酸進(jìn)行分離研究。實(shí)驗(yàn)中分別考察了各物質(zhì)獲得最佳分離效果的緩沖液濃度、pH大小以及電壓大小。結(jié)果表明，對(duì)于D-和L-苯丙氨酸、D-和L-色氨酸，D-和L-酪氨酸、D-和L-組氨酸、羅格列酮和酮洛芬獲得最佳分離度的條件如下：緩沖液質(zhì)量濃度分別為24、20、18、20、24及24 g·L-1，緩沖液pH值分別為3.5、3.5、4.0、3.5、6.5及5.5，分離電壓分別為20、15、15、20、25及25 kV。此外，最佳毛細(xì)管分離溫度為15 ℃。該方法操作簡(jiǎn)單，分析時(shí)間短，待分離物質(zhì)可達(dá)到基線分離，適用于手性藥物的分離分析[22]。

3 氣相色譜法

氣相色譜（GC）法較早用于分離手性藥物，與其他分析方法相比具有精確、快捷、識(shí)別能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，但是所測(cè)樣品必須具有熱穩(wěn)定性和高度揮發(fā)性，因而限制了適用樣品的種類[23]。

GC法同樣可分為直接和間接分析2種方式。直接法即用裝有對(duì)映體拆分試劑的手性固定相色譜柱拆分對(duì)映異構(gòu)體，間接法為使用手性拆分試劑將對(duì)映體轉(zhuǎn)化成非對(duì)映異構(gòu)體后進(jìn)行分析。

3.1 手性固定相法

手性固定相法利用固定相的手性提供分離所需的環(huán)境，該法無(wú)需制備非對(duì)映異構(gòu)體衍生物，不會(huì)對(duì)對(duì)映體的組成造成影響，操作簡(jiǎn)便，測(cè)定結(jié)果可靠。

2004年，Ding等[24]首次將手性離子液體運(yùn)用于GC，其在GC領(lǐng)域已獲得成功應(yīng)用。李芙蓉等[25]合成了一種具有手性識(shí)別能力的手性離子液體——L-丙氨酸叔丁酯雙三氟甲烷磺酰亞胺（L-AlaC4NTf2），將其作為氣相色譜固定相（A柱），同時(shí)將L-AlaC4NTf2與OV-1701按85 : 15的質(zhì)量比混合制得B柱，按50 : 50的質(zhì)量比制得C柱，分別考察了其色譜性能。課題組對(duì)醇類、酮類、芳香族化合物、位置異構(gòu)體以及5種外消旋化合物進(jìn)行了手性拆分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有A柱能夠達(dá)到全部分離，B柱和C柱只對(duì)部分手性化合物具有分離效果。這種手性離子液體作為氣相色譜固定相具有廣泛的分離能力，有良好的應(yīng)用前景。

尹明明等[26]通過(guò)在β-環(huán)糊精的2,6-位引入乙氧乙基，3-位引入三氟乙?；铣傻玫?,6-二-O-乙氧乙基-3-O-三氟乙?；?β-環(huán)糊精作為毛細(xì)管手性固定相，并對(duì)其性能進(jìn)行考察。實(shí)驗(yàn)中測(cè)試了10種手性化合物如α-甲基對(duì)氯苯乙腈、1-(2′ -硝基苯基)-乙醇、α-取代丙酸酯化合物和丙炔醇酮乙酸酯等在該色譜柱上的分離情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該固定相對(duì)于7種α-取代丙酸酯化合物有良好的分離效果，其中2-溴丙酸、2-羥基丙酸、2-甲磺?；岬募柞パ苌锏姆蛛x效果均優(yōu)于乙酯衍生物，表明該固定相對(duì)烷基側(cè)鏈較短的對(duì)映異構(gòu)體的手性選擇性更強(qiáng)。

3.2 手性衍生化試劑法

采用手性試劑衍生化方法測(cè)定的手性藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)中應(yīng)含易于衍生化的基團(tuán)，如羥基、羧基和氨基等。手性衍生化后仍不能氣化的對(duì)映體可進(jìn)行硅烷化反應(yīng)，提高揮發(fā)性。

研究人員對(duì)堿性溶液中的β-受體阻滯劑進(jìn)行氧甲酰衍生化后進(jìn)行三甲基硅烷（TMS）衍生化[27]，使用極性不同的色譜柱DB-5和DB-17雙柱模式，采取氣相色譜法分析測(cè)定。實(shí)驗(yàn)中對(duì)15種β-受體阻滯劑進(jìn)行了測(cè)定，單次運(yùn)行33 min內(nèi)2種物質(zhì)（吲哚洛爾和卡拉洛爾）達(dá)到基線分離（Rs≥1.58），5種（丙萘洛爾、美托洛爾、普萘洛爾、比索洛爾和倍他洛爾）達(dá)到部分分離（Rs≤1.21），而另外8種未能達(dá)到有效的對(duì)映體分離。

4 超臨界流體色譜法

超臨界流體色譜（SFC）法不論是硬件系統(tǒng)還是軟件系統(tǒng)均與HPLC法相似，其流動(dòng)相是以CO2為主的三元或四元混合組分。SFC法與HPLC法相比具有平衡速度快、分析周期短、高通量、污染小、經(jīng)濟(jì)實(shí)用等優(yōu)點(diǎn)。而另一方面，SFC泵系統(tǒng)必須有冷卻泵壓頭以保證CO2的液體狀態(tài)，紫外檢測(cè)或者質(zhì)譜檢測(cè)必須保持給整個(gè)系統(tǒng)加壓[28]。

吡嗪酮類藥物結(jié)構(gòu)中母核N原子所連的C原子具有手性，此類藥物是強(qiáng)效的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子-1受體（CRF1R）拮抗劑。Qian-Cutrone等[29]通過(guò)對(duì)8種結(jié)構(gòu)特征不同的吡嗪酮類物質(zhì)的分離情況來(lái)考察SFC方法對(duì)該類藥物的適用性。結(jié)果顯示，分子結(jié)構(gòu)中具有1-環(huán)丙基-2-甲氧基乙基亞基結(jié)構(gòu)的吡嗪酮類藥物在Chiralpak AD-H和Chiralcel OD-H色譜柱上都可得到有效分離，但是當(dāng)其類似物中取代基結(jié)構(gòu)為極性較低的烷基結(jié)構(gòu)時(shí)，一般方法難以適用，需進(jìn)一步優(yōu)化色譜條件。此外，吡嗪酮母核與芳族取代基團(tuán)的不同也會(huì)使手性拆分效果產(chǎn)生差異。

De Klerck等[30]在含甲醇的流動(dòng)相中同時(shí)加入堿性添加劑異丙胺（IPA）和酸性添加劑三氟乙酸（TFA），使用SFC法在4種基于多糖的手性固定相（包括Lux?Cellulose-1、Lux?Cellulose-2、Lux?Cellulose-4和Lux?Amylose-2）上分別對(duì)59種手性藥物進(jìn)行了分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在流動(dòng)相中同時(shí)加入IPA和TFA明顯較單獨(dú)添加時(shí)的分離效果好。此外，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)控制添加劑的濃度以降低所形成的鹽的濃度，如IPA和TFA的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均降至0.1%可防止鹽的析出，從而避免對(duì)峰形及儀器的不良影響。

研究人員采用SFC法對(duì)氯吡格雷手性對(duì)映體進(jìn)行分離與定量分析[31]，流動(dòng)相為含有改性劑的CO2，并在該方法下考察了不同改性劑、進(jìn)樣量、溫度、壓力以及流體密度對(duì)分離效果的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，有機(jī)改性劑的種類和含量對(duì)分離效果的影響最大，而溫度和壓力較小。試驗(yàn)中對(duì)方法的線性、精密度、準(zhǔn)確度、耐用性、檢測(cè)限與定量限等進(jìn)行了驗(yàn)證。研究結(jié)果表明，該法具有快速、準(zhǔn)確、高效的優(yōu)點(diǎn)，可用于實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)分析。

5 其他分析方法

除了上述4種方法外，手性薄層色譜法（TLC）、高速逆流色譜法（HSCCC）和核磁共振法（NMR）也可用于手性藥物分析。

氟比洛芬具有手性中心，其S_ (+) _型異構(gòu)體的抗炎活性較R_ (-) _型異構(gòu)體更高，且副作用較少。Bubba等[32]使用非商業(yè)化的三乙酸微晶纖維素（MCTA）板用來(lái)直接分離和定量分析R_ (-) _型異構(gòu)體的純度。課題組以乙醇-乙酸（60∶40，pH 3.0±0.1）為洗脫劑進(jìn)行分離，結(jié)果顯示，二者分離度為2.0，測(cè)得R_ (-) _型異構(gòu)體約占1%，定量限和檢測(cè)限分別為50和25 ng。

HSCCC法無(wú)需固體載體，可避免污染，成本低，但其分離效率低，實(shí)現(xiàn)手性對(duì)映體的拆分相對(duì)較為困難[33]。Tong等[34]建立了HSCCC法對(duì)苯丁二酸（PSA）對(duì)映體進(jìn)行了手性拆分。該方法以HP-β-CD為手性選擇劑，兩相溶劑體系為正己烷-甲基叔丁基醚-0.1 mol·L-1磷酸鹽緩沖液（0.5 : 1.5 : 2，pH 2.51）。課題組在優(yōu)化色譜條件下分離了712 mg PSA外消旋體，經(jīng)HPLC法檢測(cè)顯示，各對(duì)映體的純度均在98.5%以上。

NMR法分離手性藥物的原理為將對(duì)映體轉(zhuǎn)化成非對(duì)映異構(gòu)體，或者提供手性環(huán)境使二者的核磁共振信號(hào)產(chǎn)生差異。Redondo等[35]采用1H-NMR對(duì)平喘藥物孟魯司特進(jìn)行了手性分析，并考察了9種不同的手性溶劑的分離效果，即D-二苯甲?；剖?、D-二甲苯甲酰基酒石酸、(+)-樟腦酸、S-聯(lián)萘酚、S-3,3′-二苯基-2,2′-聯(lián)萘-1,1′-二醇、R-3,3′-二-9-蒽基甲氧基-1,1′-聯(lián)-2-萘酚、R-3,3′-二-9-菲基-1,1′-聯(lián)-2-萘酚、Pirkle醇和(-) _辛可尼丁。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大部分溶劑都能使孟魯司特形成非對(duì)映異構(gòu)體，從而可檢測(cè)R-型異構(gòu)體中S-型雜質(zhì)的含量；就NMR手性識(shí)別能力和實(shí)驗(yàn)條件的易得情況而言，(-) _辛可尼丁作為手性溶劑較為合適。

6 結(jié)語(yǔ)

隨著手性藥物的需求量日益增加，人們對(duì)其重要性有了充分的認(rèn)識(shí)，從而促進(jìn)了手性藥物分析研究的迅速發(fā)展。手性藥物對(duì)映體純度測(cè)定的最快速有效的方法為手性色譜法，目前手性HPLC法和CE法應(yīng)用最廣，通過(guò)選擇不同的手性衍生化試劑、手性固定相、手性添加劑或檢測(cè)方法可分離分析各種不同結(jié)構(gòu)的化合物。不過(guò)，上述手段各有其局限性，例如，手性固定相成本太高，手性添加劑方法則較為復(fù)雜；GC法開(kāi)發(fā)較早，技術(shù)較為成熟，然而其對(duì)樣品的熱穩(wěn)定性和揮發(fā)性要求較高。目前，SFC法正處于快速發(fā)展的時(shí)期，其發(fā)展趨勢(shì)是研制粒徑更?。叫∮? μm）的填充色譜柱[36]。SFC法分離效率高，適用范圍廣，可彌補(bǔ)HPLC法與GC法的不足；此外，該法為綠色環(huán)保的藥物分析方法，且分析速度快?？梢韵嘈牛琒FC法具有廣闊的應(yīng)用前景，且今后將會(huì)在手性藥物分析中占有重要的地位。

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Advances in Research on Analytical Methods of Chiral Drugs

YANG Mu1,2, ZHONG Wenying1, HOU Wen2
(1. Department of Analytical Chemistry, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China; 2. Nanjing Cavendish Bio-Engineering Technology Co., Ltd., Nanjing 210033, China)

The advances in research on methods of separation and detection for chiral drugs in recent ten years have been reviewed in this paper, including high performance liquid chromatography (HPLC), gas chromatography (GC), capillary electrophoresis (CE), supercritical fluid chromatography (SFC), etc.. All these may provide references for the further development of the analytical methods.

chiral drug; chiral analysis; enantiomer

TQ460.72

A

1001-5094（2014）03-0209-06

接受日期：2014-01-25

*通訊作者：鐘文英，教授；

研究方向：藥物分析及分析化學(xué)；

Tel：025-86185217；E-mail：wenyingzhongnj@163.com