u NTx、s BAP、BMD檢測在惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移中的診斷價值＊

王凌云，劉小芳，杜 濤，李俐佳，胡曉彥，劉 蕾，李 茗

（貴州省貴陽市第一人民醫(yī)院血液腫瘤科 550002）

惡性腫瘤患者晚期因易于血行播散常發(fā)生骨轉(zhuǎn)移。臨床診斷骨轉(zhuǎn)移主要依靠放射性核素骨掃描和影像學(xué)檢查，前者特異性差，后者反映骨病變的變化較慢，不能及時動態(tài)了解骨轉(zhuǎn)移變化，制約了對疾病進(jìn)展和療效的監(jiān)測［1-2］。腫瘤發(fā)生骨轉(zhuǎn)移引起骨質(zhì)破壞，會產(chǎn)生大量的骨代謝產(chǎn)物，骨代謝生化指標(biāo)是近年來探索用于骨轉(zhuǎn)移診斷及病情監(jiān)測的新方法，其改變明顯早于影像學(xué)所發(fā)現(xiàn)的形態(tài)學(xué)改變，且能夠了解骨破壞的情況，微觀地評價骨損害的程度，從而判斷骨轉(zhuǎn)移的進(jìn)展情況［3］。本研究通過檢測惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移患者的尿Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基末端肽（u NTx）和血清骨源性堿性磷酸酶（s BAP）水平，以探討骨代謝生化指標(biāo)對惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移的診斷價值；同時檢測惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移患者骨密度（BMD），探討骨密度的改變與骨代謝生化指標(biāo)的關(guān)系。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選擇2010年9月至2012年10月住院，經(jīng)組織病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查確診的各種惡性腫瘤患者。經(jīng)X線片／CT／磁共振成像檢查診斷為惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移的患者有53例（骨轉(zhuǎn)移組），惡性腫瘤無骨轉(zhuǎn)移患者40例（無骨轉(zhuǎn)移組）。骨轉(zhuǎn)移組，男32例，女21例；年齡49～91歲，中位年齡70．4歲；肺癌28例，乳腺癌13例，消化道癌3例，多發(fā)性骨髓瘤2例，前列腺癌4例，腎癌2例，鼻咽癌1例。無骨轉(zhuǎn)移組，男23例，女17例；年齡36～85歲，中位年齡67．0歲；肺癌18例，乳腺癌12例，消化道癌10例。用VAS主訴疼痛分級法評價骨轉(zhuǎn)移組患者骨痛程度（0～10分），分為4個亞組：無痛組，VAS評分0分；輕度骨痛組，VAS評分1～3分；中度骨痛組，VAS評分4～6分；重度骨痛組，VAS評分7～10分。骨轉(zhuǎn)移組根據(jù)骨轉(zhuǎn)移范圍（累及骨數(shù)目）分為2個亞組：1處骨轉(zhuǎn)移組和2處及以上骨轉(zhuǎn)移組（肋骨和肩胛骨為1處，頭顱、脊椎、骨盆、長骨各為1處）。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）患有影響骨代謝的疾病，如甲狀腺和甲狀旁腺功能改變、控制不良的糖尿病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)?。唬?）過去3個月內(nèi)使用過雙磷酸鹽、雌激素、糖皮質(zhì)激素、降鈣素等影響骨代謝藥物者；（3）入組前4周內(nèi)曾接受過放射治療；（4）合并心血管、腦血管、肝腎功能異常等嚴(yán)重原發(fā)性疾病者；（5）1年內(nèi)有外傷性骨折者。

1．2 檢測方法 （1）留取空腹靜脈血3 mL和晨起中段尿5 mL，靜置后離心10 min，分離血清和尿標(biāo)本，隨之立即置于-70℃保存待測。u NTx檢測試劑盒購自美國Ostex International公司，按試劑盒操作說明，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測u NTx。用UA400 Oly mpas全自動生化分析儀測定同一標(biāo)本尿肌酐（Cr），u NTx結(jié)果經(jīng)Cr校正（u NTx／Cr）。s BAP檢測采用Quidel公司的酶免疫分析試劑盒測定。（2）BMD測量：采用美國GE公司Prodigy雙能X線骨密度儀，測量部位為腰椎2～4（L2～4）正位，股骨近端正位（股骨頸、Ward′s區(qū)、大轉(zhuǎn)子）。測量股骨頸時以股骨內(nèi)旋15℃為標(biāo)準(zhǔn)位置，測量時室溫控制在20～26℃。臨界值確定：u NTx／Cr正常值［4］：成年人“＜65 n mol／L BCE／mmol／L Cr”；s BAP正 常 值：成 年 男 性“≤73 IU／L”，成年女性“≤44 IU／L”。

1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS10．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料正態(tài)數(shù)據(jù)以±s表示，兩組均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析；不滿足正態(tài)分布資料進(jìn)行秩和檢驗(yàn)；相關(guān)性采用Person相關(guān)分析，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2．1 u NTx和s BAP水平 骨轉(zhuǎn)移組血清u NTx／Cr和s BAP水平顯著高于無骨轉(zhuǎn)移組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。見表1。

表1 u NTx和sBAP在兩組中的比較（±s）

表1 u NTx和sBAP在兩組中的比較（±s）

組別 n u NTx／Cr（nmol／L BCE／mmol／L Cr）sBAP（IU／L）骨轉(zhuǎn)移組 53 109．3±57．9 138．2±91．9無骨轉(zhuǎn)移組40 55．6±28．2 88．0±58．5 t 2．079 1．907 P 0．033 0．047

2．2 u NTx和sBAP與骨痛程度關(guān)系 骨轉(zhuǎn)移組u NTx／Cr和s BAP水平隨骨痛程度的加重而增加，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）。見表2。

表2 不同程度骨痛患者的u NTx和s BAP比較（±s）

表2 不同程度骨痛患者的u NTx和s BAP比較（±s）

骨痛程度 n u NTx／Cr（nmol／L BCE／mmol／L Cr）sBAP（IU／L）無痛／輕度骨痛18 98．2±57．8 125．8±82．2中度骨痛 19 102．1±68．2 136．3±89．1重度骨痛16 134．7±72．6 153．6±108．5

2．3 u NTx和s BAP與骨轉(zhuǎn)移數(shù)目的關(guān)系 骨轉(zhuǎn)移數(shù)目2處及以上的患者，u NTx／Cr和s BAP水平明顯高于1處骨轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。u NTx／Cr和s BAP水平與骨轉(zhuǎn)移累及數(shù)目呈正相關(guān)（r＝0．437，r＝0．451）。見表3。

表3 骨轉(zhuǎn)移數(shù)目不同的患者u NTx和s BAP比較（±s）

表3 骨轉(zhuǎn)移數(shù)目不同的患者u NTx和s BAP比較（±s）

骨轉(zhuǎn)移數(shù)目n u NTx／Cr（nmol／L BCE／mmol／L Cr）sBAP（IU／L）1處22 84．5±36．7 113．3±63．1≥2處 31 114．8±64．3 149．4±81．8 t 2．064 2．060 P 0．028 0．038 r 0．437 0．451

2．4 BMD狀況 骨轉(zhuǎn)移組各部位BMD值低于無骨轉(zhuǎn)移組，但兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）。見表4。

表4 BMD在兩組間的比較（±s，g／c m2）

表4 BMD在兩組間的比較（±s，g／c m2）

組別 n L 2～4 股骨頸 War d′s區(qū)骨轉(zhuǎn)移組53 0．803±0．132 0．614±0．117 0．427±0．106無骨轉(zhuǎn)移組40 0．860±0．128 0．725±0．124 0．495±0．117

3 討 論

近年來，骨骼生成和破壞的特異性標(biāo)志物在骨轉(zhuǎn)移癌的早期診斷和預(yù)測中的價值備受關(guān)注［5］。惡性腫瘤細(xì)胞在骨轉(zhuǎn)移時分泌一系列因子激活破骨細(xì)胞產(chǎn)生骨破壞，伴隨這一過程骨組織亦釋放出大量的生長因子，刺激腫瘤生長和骨繼續(xù)破壞［6］。骨質(zhì)破壞產(chǎn)生大量的骨代謝產(chǎn)物，可作為骨代謝生化指標(biāo)反映骨與腫瘤的相互作用［7］。

u NTx為含有獨(dú)特氨基酸序列的Ⅰ型膠原N末端肽，由破骨細(xì)胞活性增加導(dǎo)致骨膠原降解產(chǎn)生，釋放至血循環(huán)并經(jīng)尿排泄，其代謝受食物影響小，是尿中穩(wěn)定的骨質(zhì)溶解最終產(chǎn)物，能特異性反映破骨細(xì)胞的活性，是敏感而特異的骨吸收指標(biāo)［8］。

s BAP屬于堿性磷酸酶6種同工酶之一，由成骨細(xì)胞合成的特異性細(xì)胞外酶，其通過多糖鏈與磷脂酰肌醇固定在細(xì)胞膜表面，在多糖-肌醇磷酸特異性水解酶作用下進(jìn)入血循環(huán)。sBAP在成骨過程中為羥磷灰石的沉積提供必需的磷酸，同時解除焦磷酸鹽對骨鹽形成的抑制作用。當(dāng)血中s BAP水平上升可認(rèn)為是骨形成速率加快，為反映成骨細(xì)胞活性和骨形成特異性較強(qiáng)的標(biāo)志物。

本研究結(jié)果顯示，骨轉(zhuǎn)移組患者u NTx和s BAP水平明顯高于無骨轉(zhuǎn)移組（P＜0．05），表明惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移患者存在骨代謝紊亂，u NTx和s BAP水平增高對協(xié)助診斷骨轉(zhuǎn)移有一定的價值。骨轉(zhuǎn)移發(fā)生過程中破骨細(xì)胞活性和成骨細(xì)胞活性一起增加，骨吸收指標(biāo)之間、骨形成指標(biāo)之間有一定的相關(guān)性。通過監(jiān)測u NTx和sBAP水平的動態(tài)變化，可以了解成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞活性情況，有助于判斷骨轉(zhuǎn)移病情。

本研究發(fā)現(xiàn)，≥2處骨轉(zhuǎn)移組較1處骨轉(zhuǎn)移組的u NTx和s BAP水平高（P＜0．05），提示骨吸收和骨形成指標(biāo)與骨轉(zhuǎn)移程度、數(shù)目相關(guān)。一般認(rèn)為骨轉(zhuǎn)移程度反映腫瘤在骨骼的負(fù)荷，u NTx和s BAP水平可作為評價骨腫瘤負(fù)荷的參考指標(biāo)之一。

本研究結(jié)果表明，骨轉(zhuǎn)移組患者隨著骨痛程度增加，u NTx和s BAP水平也升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05），提示u NTx和s BAP不能作為觀察骨轉(zhuǎn)移主要臨床癥狀——骨痛的有效指標(biāo)。

雙能X線吸收法測定BMD是骨量減少、骨質(zhì)疏松的特異性、敏感性指標(biāo)，BMD反映骨量丟失的情況。本研究結(jié)果提示，無論有無骨轉(zhuǎn)移，惡性腫瘤患者BMD均降低，表明這些患者存在骨質(zhì)溶解，導(dǎo)致骨骼脆性增加，容易造成骨折。惡性腫瘤患者骨質(zhì)減少的原因尚未完全清楚，一般認(rèn)為與腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的一些溶骨性物質(zhì)相關(guān)，它們能引起破骨細(xì)胞增加和骨質(zhì)溶解。

本研究發(fā)現(xiàn)，骨轉(zhuǎn)移組患者u NTx和s BAP水平明顯高于無骨轉(zhuǎn)移組，而BMD低于無骨轉(zhuǎn)移組，可見，骨轉(zhuǎn)移患者由于骨轉(zhuǎn)換生化指標(biāo)升高，骨轉(zhuǎn)換率增高，骨量丟失加快，從而導(dǎo)致BMD降低。BMD測量只能反映機(jī)體局部的骨量變化，不能及時地反映骨骼正在進(jìn)行的代謝活動和骨轉(zhuǎn)換的速率。而u NTx和s BAP反映整體的骨丟失情況，在骨量明顯丟失之前反映患者的骨轉(zhuǎn)換水平，可以作為預(yù)測骨丟失速率的指標(biāo)之一，有助于預(yù)測骨折風(fēng)險。本研究發(fā)現(xiàn)BMD在惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移與無骨轉(zhuǎn)移二組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05），考慮與選擇的患者大多為老年人有關(guān)。

綜上所述，u NTx和s BAP的水平可以作為臨床輔助診斷腫瘤骨轉(zhuǎn)移的參考指標(biāo)，從而彌補(bǔ)傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)記物和影像學(xué)檢查對骨轉(zhuǎn)移病灶診斷和評價的不足。惡性腫瘤患者中，將骨生化指標(biāo)與BMD檢測聯(lián)合應(yīng)用，可及時監(jiān)測骨量的降低并予以干預(yù)，減少骨質(zhì)疏松及骨折的發(fā)生。本研究中，由于觀察例數(shù)和隨訪時間有限，骨代謝生化指標(biāo)與骨相關(guān)事件的風(fēng)險和腫瘤相關(guān)死亡風(fēng)險的關(guān)系還有待進(jìn)一步追蹤研究。

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