天丁顆粒對(duì)乳腺增生包塊免疫組化CerbB-2、Ki-67表達(dá)的影響

陳曉英，馬占儒，郭俊芳，趙海軍

(1. 河北省懷安縣左衛(wèi)中心衛(wèi)生院，河北 懷安 076181；2. 河北省懷安縣柴溝堡鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院，河北 懷安 076150；3. 河北省石家莊市第四醫(yī)院，河北 石家莊 050011)

天丁顆粒對(duì)乳腺增生包塊免疫組化CerbB-2、Ki-67表達(dá)的影響

陳曉英1，馬占儒1，郭俊芳2，趙海軍3

(1. 河北省懷安縣左衛(wèi)中心衛(wèi)生院，河北 懷安 076181；2. 河北省懷安縣柴溝堡鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院，河北 懷安 076150；3. 河北省石家莊市第四醫(yī)院，河北 石家莊 050011)

目的 探討天丁顆粒對(duì)乳腺增生惡性病變組織CerbB-2、Ki-67表達(dá)的影響。方法 26例乳腺增生包塊患者均給予天丁顆粒治療，治療前后對(duì)病變組織進(jìn)行免疫組化檢查，觀察CerbB-2和Ki-67的表達(dá)情況。結(jié)果多數(shù)患者CerbB-2和Ki-67由高表達(dá)變?yōu)榈捅磉_(dá)。結(jié)論 天丁顆粒對(duì)乳腺增生包塊可能有預(yù)防惡變效果。

天丁顆粒；乳腺增生；CerbB-2；Ki-67

腫瘤分子標(biāo)志物是指腫瘤組織和細(xì)胞產(chǎn)生的異常表達(dá)的生物活性物質(zhì)，能反映腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及發(fā)生發(fā)展等方面的惡性生物學(xué)行為。ER、PR、CerbB-2和Ki-67是具有經(jīng)典意義的一類標(biāo)志，其表達(dá)狀態(tài)對(duì)乳腺癌內(nèi)分泌治療、化療的選擇及預(yù)后有重要意義，其中CerbB-2和Ki-67的表達(dá)反映了腫瘤組織的惡性程度，對(duì)預(yù)后的判斷非常重要。天丁顆粒是皂角刺提取的中藥免煎顆粒，臨床上常作為治療癌癥的配伍藥之一，被用來(lái)治療乳腺癌、肺癌、食管癌、腸癌和宮頸癌等多種癌癥[1]。目前，天丁顆粒在臨床上應(yīng)用廣泛，效果好，而且不良反應(yīng)少[2]。筆者觀察了天丁顆粒治療乳腺增生包塊對(duì)免疫組化CerbB-2和Ki-67表達(dá)的影響，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2008年2月—2013年6月經(jīng)治的乳腺增生包塊患者26例，年齡22～53(29.28±9.82)歲。均以乳腺腫塊主訴就診，并經(jīng)過(guò)上級(jí)醫(yī)院做針吸報(bào)告為乳腺增生，同時(shí)做了免疫組化。所有患者能夠追蹤隨訪，并能配合治療。

1.2 治療方法 患者就診初期，給予天丁顆粒(廣東天一制藥有限公司生產(chǎn)，許可證號(hào)20110214)30 g口服(可以一次服用，也可以分次服用)，經(jīng)期不停，治療3～5個(gè)月，治療后患者再次到上級(jí)醫(yī)院做手術(shù)或麥默通治療后，對(duì)其標(biāo)本免疫組化結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。

1.3 Ki-67表達(dá)判定標(biāo)準(zhǔn) 低表達(dá):<30%；高表達(dá):>30%。

1.4 CerbB-2表達(dá)判定標(biāo)準(zhǔn) 低表達(dá)(±)～(+)，高表達(dá)()～() 。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，采用2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 治療前后Ki-67表達(dá)情況 治療前低表達(dá)6例,高表達(dá)20例；治療后低表達(dá)16例,高表達(dá)10例。有12例由治療前的高表達(dá)變?yōu)橹委熀蟮牡捅磉_(dá)，有2例患者從治療低表達(dá)變?yōu)楦弑磉_(dá)。

2.2 治療前后CerbB-2表達(dá)情況 治療前低表達(dá)8例,高表達(dá)18例；治療后低表達(dá)19例,高表達(dá)7例。有14例由治療前的高表達(dá)變?yōu)橹委熀蟮牡捅磉_(dá)，有1例從低表達(dá)(±)變?yōu)楦弑磉_(dá)()，治療前后比較有顯著性差異(P<0.05)。

3 討 論

近年來(lái)，免疫組化技術(shù)發(fā)展迅速，從惡性腫瘤的診斷發(fā)展到預(yù)后評(píng)估，而乳腺惡性腫瘤的免疫組化檢測(cè)，不僅對(duì)腫瘤組織的生物學(xué)行為能做出準(zhǔn)確判斷，還為乳腺腫瘤的治療提供了可靠的依據(jù)。乳腺惡性腫瘤的內(nèi)分泌治療、靶向治療，依靠免疫組化的檢測(cè)，挽救了無(wú)數(shù)患者的生命。隨著醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，對(duì)良性疾病也開(kāi)始進(jìn)行免疫組化檢測(cè)，使惡性腫瘤的三級(jí)預(yù)防更加可靠，特別是乳腺增生包塊，通過(guò)免疫組化檢測(cè)，找到充分的依據(jù)，為打斷增生—不典型增生—癌變提供了切實(shí)可靠的方案，為廣大乳腺增生患者帶來(lái)了保障。中醫(yī)中藥一直在抗腫瘤中起著不可磨滅的作用，將免疫組化檢測(cè)應(yīng)用于中藥治療腫瘤中，大大豐富了中西醫(yī)結(jié)合治療腫瘤的內(nèi)涵。CerbB-2和Ki-67在乳腺增生組織中的表達(dá)，對(duì)乳腺增生的發(fā)展有明確的評(píng)估價(jià)值，把中藥治療引入對(duì)這些指標(biāo)的檢測(cè)，對(duì)開(kāi)發(fā)中西醫(yī)結(jié)合治療乳腺增生找到更好的藥物做出了積極貢獻(xiàn)。

Ki-67由Gerdes等于1983年發(fā)現(xiàn)，在增殖細(xì)胞中表達(dá)，常在有絲分裂期表達(dá)增加，尤其在腫瘤活躍階段的M期達(dá)高峰，而渡過(guò)有絲分裂周期后迅速下降[3]。腫瘤組織免疫組化高表達(dá)能反映出腫瘤細(xì)胞的有絲分裂增殖活性增高，與細(xì)胞有絲分裂增殖程度成正相關(guān)，是已經(jīng)被公認(rèn)的細(xì)胞有絲分裂增殖活性表達(dá)標(biāo)志物。本研究結(jié)果顯示，Ki-67在天丁顆粒治療后表達(dá)下調(diào)，提示天丁顆粒顯著抑制了腫瘤細(xì)胞的有絲分裂增殖。通過(guò)對(duì)乳腺腫瘤組織增殖細(xì)胞核抗原Ki-67生物學(xué)行為的研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、年齡、乳腺癌組織分級(jí)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等關(guān)系密切，是目前判斷乳腺癌預(yù)后的重要指標(biāo)[4]。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，通過(guò)中藥治療對(duì)Ki-67生物學(xué)行為影響的研究也越來(lái)越多，很多研究發(fā)現(xiàn)乳腺增生包塊組織的Ki-67高表達(dá)，則其痰、濕、瘀的凝結(jié)癥候表現(xiàn)也明顯，當(dāng)病證變化按照氣滯→痰凝→血瘀的規(guī)律演進(jìn)時(shí)，Ki-67表達(dá)也增高，“血瘀”是病證演變的最終階段，而動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，此階段Ki-67表達(dá)最高[5]，給予活血化瘀、消腫散結(jié)治療后，動(dòng)物乳腺組織Ki-67表達(dá)會(huì)降低，所以化痰消腫、散結(jié)祛瘀是治療乳腺增生的關(guān)鍵。

CerbB-2是細(xì)胞原癌基因，能參與和調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和分化，目前被公認(rèn)為腫瘤分子標(biāo)志表達(dá)物，當(dāng)過(guò)量表達(dá)時(shí)，提示惡性程度增高。對(duì)乳腺癌患者，CerbB-2高表達(dá)意味著該腫瘤對(duì)內(nèi)分泌治療反應(yīng)差，容易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，存活期較短。鑒于CerbB-2在乳腺癌中的突出價(jià)值，已經(jīng)作為判斷乳腺癌預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立指標(biāo)，廣泛應(yīng)用在乳腺腫物組織的檢測(cè)，指導(dǎo)乳腺癌患者的治療和預(yù)后評(píng)估[6]。王紅鷹等[7]認(rèn)為，如果把腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移作為乳腺惡性腫瘤的最重要檢測(cè)指標(biāo)，則CerbB-2在乳腺癌組織中的表達(dá)就是僅次于腋窩淋巴結(jié)的評(píng)估指標(biāo)。中藥治療前后CerbB-2表達(dá)的變化，也有越來(lái)越多的學(xué)者在做實(shí)驗(yàn)研究。楊舉倫等[8]通過(guò)檢測(cè)H-ras、CerbB-2、p53蛋白在乳腺增生病和乳腺癌中的表達(dá)，探討中藥治療后不同增生程度的乳腺增生病與乳腺癌的關(guān)系，結(jié)果提示，中藥治療可以降低CerbB-2在各種類型的乳腺增生病中的表達(dá)，導(dǎo)管上皮不典型增生與乳腺癌的關(guān)系密切，中藥治療可以阻斷不典型增生癌變。

一直以來(lái)，皂角刺作為廉價(jià)、實(shí)用的中藥，廣泛用于治療乳腺炎、乳腺癌，由于其具有很強(qiáng)的托里透出作用，能有效達(dá)到疏肝理氣、活血化瘀、散結(jié)通絡(luò)的效果，對(duì)減輕乳腺導(dǎo)管腫脹，縮小增生腺體塊狀組織有明確價(jià)值。隨著中醫(yī)藥現(xiàn)代化，皂角刺被提取成中藥免煎顆粒，不僅保證了其質(zhì)量的無(wú)污染性，而且患者服用方便，是很受臨床醫(yī)生和患者青睞的中藥免煎顆粒之一。多年來(lái)，經(jīng)抗腫瘤試驗(yàn)和臨床研究證實(shí)了天丁具有確切的抗癌效果，采用現(xiàn)代分離方法，對(duì)天丁進(jìn)行分離和抗腫瘤部位篩選，確定了天丁的抗腫瘤活性部位，然后對(duì)確定的有效部位進(jìn)行了提取、分離、純化，得到單體化合物，并進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，完全肯定了天丁的抗癌依據(jù)，結(jié)合腫瘤組織免疫組化因素的表達(dá)，天丁抗乳腺癌的前景樂(lè)觀。

天丁是通過(guò)多種作用途徑達(dá)到抗腫瘤效果的，其作用可以影響腫瘤細(xì)胞間通訊，對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生抑制作用[9]，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，能特異性抑制突變型p53的表達(dá)，且這種抑制作用發(fā)生在轉(zhuǎn)錄后，防止細(xì)胞癌變，阻止細(xì)胞有絲分裂或阻斷細(xì)胞聚積在G2/M期蛋白的合成，還能抑制腫瘤血管生成，使部分腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)壞死表現(xiàn)，出現(xiàn)核固縮、核碎裂或核溶解，尤其在逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞方面，可見(jiàn)到核明顯縮小，周圍胞漿紅染，核漿比例減小，呈規(guī)則的圓或橢圓形[10]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，天丁可以改善荷瘤小鼠的生存質(zhì)量而抑制腫瘤對(duì)機(jī)體的損傷，可以通過(guò)抑制接種部位腫瘤體的大小而起到抗癌的作用，可以通過(guò)保護(hù)荷瘤小鼠的肝臟功能而起到保護(hù)正常組織的作用，天丁提取物高劑量組能通過(guò)增強(qiáng)Smad4基因的表達(dá)和下調(diào)Smad7基因的表達(dá)而啟動(dòng)抗腫瘤效果[11]。

李時(shí)珍《本草綱目》記載：“皂芙，味辛而性燥，氣浮而散。吹之導(dǎo)之。則通上下諸竅。服之則治風(fēng)濕痰喘腫滿，殺蟲(chóng)。涂之則散腫消毒，搜風(fēng)治瘡?！逼湔撌龇现委熑橄僭錾幕驹?，即疏通經(jīng)絡(luò)、祛濕散風(fēng)，被認(rèn)為是具有開(kāi)發(fā)前景的抗腫瘤藥品。研究天丁顆粒對(duì)乳腺增生組織免疫組化因素表達(dá)的影響，可以取得非?？煽康难C學(xué)依據(jù)。但由于病例少，觀察時(shí)間較短，還不足以做出結(jié)論，尚需病例資料的積累，為預(yù)防乳腺增生癌變提供合理的方案。

[1] 曾元范，顏克海. 814針劑對(duì)移植性腫瘤的抑制實(shí)驗(yàn)[J]. 暨南大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，1994，15(4):105-107

[2] 熊燕子. 中西醫(yī)結(jié)合治療中晚期肺癌32例療效觀察[J]. 湖南中醫(yī)雜志，2006，22(3):15-16

[3] Ding SL，Shen LF，Yu JC，et al. Expression of estrogen receptor-alpha and Ki-67 in relation to pathol ogical and molecular features in early-onset infiltrating ductal carcinoma[J]. J Biorned Sci，2004,11(6):911-919

[4] 于澤平，李幼生，王少華，等. 細(xì)針穿刺吸取細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值[J]. 醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào).2006，19(5)：474-475

[5] 倪依東，梁海清，田少鵬，等. 乳核散結(jié)片對(duì)乳腺增生大鼠治療作用的研究[J]. 中藥藥理與臨床，2004，20(4)：35-36

[6] 劉娟娟，王永勝. 真空輔助乳房活檢系統(tǒng)診斷、治療乳腺疾病的適應(yīng)證選擇[J]. 中華全科醫(yī)師雜志，2009，8(5)：299-300

[7] 王紅鷹，鄒強(qiáng)，周堅(jiān)，等. 超聲引導(dǎo)下Mammome微創(chuàng)旋切系統(tǒng)在乳房腫瘤診治中的應(yīng)用[J]. 外科理論與實(shí)踐，2006，11(2)：123-126

[8] 楊舉倫，劉大榮，蔡學(xué)敏，等. H-ras、CerbB-2、p53蛋白在乳腺增生病中的表達(dá)及意義[J]. 中華病理學(xué)雜志，1999，28(6)：450

[9] Ferroila PC,Cody V,Middleton EJ. Protein kinase C inhibition by plant flavonoids.Kineticmechanisms and structure-activity relationships[J]. Biochemical Pharmacology,1989，38(10)：1617-1624

[10] 劉復(fù)生，劉彤華. 腫瘤病理學(xué)[M]. 北京：北京醫(yī)科大學(xué)-中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1997：285-298

[11] 陳曉嵐，屈凌波，韓維誠(chéng)，等. 皂角皂普元化學(xué)成分研究[J]. 中草藥，2001，32(3)：195-197

10.3969/j.issn.1008-8849.2014.02.023

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