幽門螺桿菌感染和p53表達(dá)與胃癌及胃癌前病變關(guān)系的臨床研究

于金林　孟衛(wèi)東　初瑞雪

[摘要] 目的 探討幽門螺桿菌（Hp）感染、p53表達(dá)與胃癌及胃癌前病變的關(guān)系。 方法 收集聊城市人民醫(yī)院疑似胃癌患者手術(shù)切除的胃黏膜標(biāo)本及胃鏡活檢采取的胃黏膜標(biāo)本140例，分為胃良性病變（BGL）組29例、胃癌前病變（GPL）組47例和胃癌（GC）組64例，采用Warthin-Starry染色法和快速尿素酶試驗(yàn)觀察不同胃黏膜組織中Hp的感染情況，采用免疫組化S-P法檢測p53。 結(jié)果 GC組和GPL組Hp感染率、p53陽性表達(dá)率高于BGL組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。3組Hp陽性患者p53陽性表達(dá)率均高于Hp陰性患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 Hp感染與胃癌的發(fā)生密切相關(guān)，與細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白p53可能存在相互協(xié)同的關(guān)系。

[關(guān)鍵詞] 胃癌；幽門螺桿菌；p53

[中圖分類號] R735.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）01（b）-0038-03

胃癌（gastric cancer，GC）是高發(fā)惡性腫瘤，死因位居癌癥第二位。細(xì)胞的過度增殖、異常凋亡是引起GC發(fā)生的主要原因，GC的發(fā)生是一個由多種因素引起、多個階段組成的復(fù)雜發(fā)展過程[1]。文獻(xiàn)證實(shí)，GC的發(fā)生、發(fā)展與基因的眾多相關(guān)分子密切相關(guān)，p53基因是一種重要的抑癌基因，但野生型p53仍存在發(fā)生腫瘤的可能[2-4]。幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）已被世界衛(wèi)生組織列為Ⅰ類致癌物，其是慢性胃炎和胃潰瘍發(fā)生、發(fā)展的主要致病因子，且Hp感染與GC的發(fā)生密切相關(guān)。本文探討Hp感染和p53表達(dá)與GC發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為研究GC的發(fā)生、發(fā)展提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般材料

收集聊城市人民醫(yī)院GC患者手術(shù)切除的胃黏膜標(biāo)本及胃鏡活檢采取的胃黏膜標(biāo)本140例，其中男83例，女57例；年齡38～69歲，平均52.5歲；經(jīng)病理檢查證實(shí)，胃良性病變（benign gastric lesion，BGL）組29例（慢性淺表性胃炎18例，胃息肉11例）；胃癌前病變（gastric precancerous lesion，GPL）組47例（慢性萎縮性胃炎12例，腸上皮化生14例，不典型增生21例）；GC組64例。所有患者均未進(jìn)行放、化療及生物治療。3組患者的年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 Hp檢測 采用快速尿素酶試驗(yàn)和Warthin-Starry染色法聯(lián)合檢測Hp，兩者檢測結(jié)果均陽性者為陽性，均陰性者為陰性，兩種方法檢測結(jié)果中有一項(xiàng)陽性者退出試驗(yàn)。Warthin-Starry染色法結(jié)果顯示，Hp呈棕褐色彎曲狀，常位于胃黏膜表面或（和）胃小凹及腫瘤性腺腔內(nèi)呈散在、密集或成堆分布。

1.2.2 p53檢測 試劑由Dako公司提供，采用免疫組織化學(xué)（S-P）法，嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行操作。S-P染色結(jié)果顯示，p53陽性細(xì)胞為細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕褐色顯色。每例隨機(jī)觀察10個高倍（×400）視野，計算陽性細(xì)胞率。陽性細(xì)胞數(shù)>10%者定為陽性，≤10%或缺乏者為陰性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組患者Hp感染率和p53陽性表達(dá)率的比較

GC組和GPL組Hp感染率、p53陽性表達(dá)率高于BGL組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

表1 3組患者Hp感染率和p53陽性表達(dá)率的比較[n（%）]

與BGL組比較，*P<0.05

2.2 3組Hp陽性患者p53陽性表達(dá)率的比較

3組Hp陽性患者p53陽性表達(dá)率均高于Hp陰性患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

表2 3組Hp陽性患者p53陽性表達(dá)率的比較[n（%）]

與同組Hp（-）比較，*P<0.05

3 討論

GC最早生物學(xué)改變是胃黏膜細(xì)胞過度增殖和異常凋亡間的平衡失調(diào)。GC發(fā)生、發(fā)展的一般規(guī)律為正常胃黏膜因某些因素刺激引起淺表性胃炎，隨著刺激加深逐漸發(fā)展為慢性萎縮性胃炎，然后慢性萎縮性胃炎的不斷發(fā)展引起腸上皮化生，進(jìn)而發(fā)展為不典型增生，最后導(dǎo)致GC發(fā)生。自1983年Hp從胃黏膜上培養(yǎng)、分離出來，Hp感染與胃黏膜上皮細(xì)胞凋亡、GC發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系引起有關(guān)學(xué)者的關(guān)注[5-6]。本研究結(jié)果顯示，GC和GPL的發(fā)生與Hp感染有密切關(guān)系。GC和GPL發(fā)生的原因可能是Hp感染后直接侵襲胃黏膜，局部組織出現(xiàn)損傷，誘發(fā)組織發(fā)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，促使組織細(xì)胞產(chǎn)生各種毒素及多種酶，引起胃黏膜出現(xiàn)萎縮、胃黏膜上皮細(xì)胞出現(xiàn)化生、不典型增生等改變，胃黏膜上皮細(xì)胞的不穩(wěn)定性增加，黏膜上皮細(xì)胞的凋亡和增殖調(diào)節(jié)功能發(fā)生紊亂，胃黏膜上皮細(xì)胞發(fā)生癌變，最終發(fā)展成GC。

腫瘤發(fā)生、發(fā)展的主要原因是上皮細(xì)胞凋亡功能出現(xiàn)異常，進(jìn)而引起細(xì)胞過度增殖。p53是人體內(nèi)重要的腫瘤抑制因子，調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵因子，對機(jī)體組織上皮細(xì)胞的生長及分化具有重要作用[2]。本研究結(jié)果顯示，p53基因參與GC的發(fā)生，p53基因突變與Hp感染密切相關(guān)。胃黏膜上皮細(xì)胞感染Hp后，Hp誘導(dǎo)胃黏膜上皮細(xì)胞野生型p53基因發(fā)生突變、失活，抑制上皮細(xì)胞的凋亡功能，細(xì)胞轉(zhuǎn)化增強(qiáng)，引起上皮細(xì)胞過度增殖，導(dǎo)致GC的發(fā)生。在p53基因突變的GC中，腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與p53基因突變導(dǎo)致胃黏膜上皮細(xì)胞喪失凋亡功能密切相關(guān)。

黏膜上皮細(xì)胞凋亡及增殖功能的紊亂是引發(fā)GC的重要原因。細(xì)胞凋亡是一種受基因調(diào)控的生理性死亡，當(dāng)促凋亡基因受到抑制，導(dǎo)致細(xì)胞不能凋亡；抗凋亡基因被激活后，引起細(xì)胞長期存活，同時因?yàn)榘┗虻母弋惓１磉_(dá)及抑癌基因受到抑制，細(xì)胞癌變，形成腫瘤[7-8]。Hp持續(xù)感染導(dǎo)致胃黏膜上皮細(xì)胞發(fā)生慢性炎性反應(yīng)，引起胃黏膜上皮細(xì)胞損傷，促進(jìn)p53基因突變，黏膜上皮細(xì)胞凋亡功能下調(diào)，上皮細(xì)胞增殖與凋亡功能紊亂，促使細(xì)胞堆積，形成腫瘤[9-10]。

綜上所述，Hp感染與GC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，與細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白p53可能存在相互協(xié)同關(guān)系。Hp和p53檢測對GC早期診斷和治療具有重要價值。

[參考文獻(xiàn)]

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[3] Breen L，Heenan M，Amberger-Murphy V，et al.Investigation of the role of p53 in chemotherapy resistance of lung cancer cell lines[J].Anticancer Res，2007，27（3A）：1361-1364.

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[9] Xu AG，Li SG，Liu JH，et al.Function of apoptosis and expression of the proteins Bcl-2，p53 and C-myc in the development of gastric cancer[J].World J Gastroenterol，2001， 7（3）：403-406.

[10] Wei JX，Noto JM，Zaika E，et al.Sa1896 the human gastric pathogen Helicobacter pylori alters intracellular signaling by inducing truncated forms of p53 tumor suppressor[J].Gastroenterology，2013，144（5）：S-329.

（收稿日期：2013-10-10 本文編輯：李亞聰）

綜上所述，Hp感染與GC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，與細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白p53可能存在相互協(xié)同關(guān)系。Hp和p53檢測對GC早期診斷和治療具有重要價值。

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（收稿日期：2013-10-10 本文編輯：李亞聰）

綜上所述，Hp感染與GC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，與細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白p53可能存在相互協(xié)同關(guān)系。Hp和p53檢測對GC早期診斷和治療具有重要價值。

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（收稿日期：2013-10-10 本文編輯：李亞聰）