中藥牛大力抗疲勞抗應(yīng)激作用的實驗研究

□黃 翔，王曉平，陳曉白

（1.玉林師范學(xué)院 體育學(xué)院，廣西 玉林 537000；2.玉林師范學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，廣西 玉林 537000）

中藥牛大力抗疲勞抗應(yīng)激作用的實驗研究

□黃 翔1，王曉平2，陳曉白2

（1.玉林師范學(xué)院 體育學(xué)院，廣西 玉林 537000；2.玉林師范學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，廣西 玉林 537000）

目的：探討中藥牛大力的抗運動性疲勞和抗應(yīng)激作用.方法：采用SPF級昆明雄性小鼠作為實驗對象，設(shè)立牛大力低（5g·kg-1）、中（10g·kg-1)、高（20g·kg-1）劑量組和陰性對照組.適應(yīng)性飼養(yǎng)7d后，每天固定時間內(nèi)用牛大力水煎液給各劑量組小鼠灌胃，陰性對照組給予生理鹽水，連續(xù)14 d.末次給藥1h后分別對小鼠進行負重游泳試驗、耐缺氧試驗、耐低溫試驗以及耐高溫試驗，并統(tǒng)計各實驗中小鼠的平均存活時間.結(jié)果：牛大力能夠顯著延長小鼠在負重游泳試驗，耐缺氧試驗，耐低溫試驗，耐高溫試驗中的存活時間(P＜0.01)；且隨著牛大力水煎液濃度的增大，小鼠的存活時間也相對延長，呈劑量-反應(yīng)關(guān)系.結(jié)論：牛大力具有一定的抗運動性疲勞和抗應(yīng)激作用.

牛大力；抗疲勞；抗應(yīng)激；中藥

牛大力(Radix Millettiae Speciosae, RMS) 又稱大力牛、扒山虎、山蓮藕、血風(fēng)藤等,為豆科崖豆藤屬植物美麗崖豆藤（Millettia?speciosaChamp.)的根[1]，主要分布于兩廣地區(qū).其味甘、性平,具補肺滋腎、清熱止咳、舒筋活絡(luò)等功效[2].壯族民間常用于腰膝酸痛、跌打損傷、肺虛咳嗽、風(fēng)濕痹痛、慢性肝炎的治療[3].據(jù)文獻報道，該植物含有生物堿、香豆素類、多糖類、三萜類及植物甾醇等多種活性成分[4-5]，具有調(diào)節(jié)免疫、護肝及祛痰、鎮(zhèn)咳和平喘等[6-8]作用.目前尚未見到關(guān)于其在抗運動性疲勞、抗應(yīng)激方面的報道.本文應(yīng)用小鼠負重游泳試驗、耐缺氧試驗、耐低溫試驗以及耐高溫試驗，對牛大力進行了抗運動性疲勞、抗應(yīng)激作用的研究，現(xiàn)報道如下.

1 材料與儀器

1.1 實驗動物 SPF級雄性昆明小鼠80只，體質(zhì)量：（20±2）g，購自廣西醫(yī)科大學(xué)動物研究中心，許可證號為：SCXK桂 2009-0002.

1.2 藥物與儀器 牛大力藥材（購于廣西玉林市中藥材公司，經(jīng)玉林師范學(xué)院王曉平教授鑒定為真品）；FA1104N型電子分析天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；HH-S數(shù)顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠）；BD-326型海爾臥式冷凍柜(青島海爾冷凍總公司)；小鼠游泳池（80cm×60cm×60cm）；錐形瓶（250 mL）；廣口瓶(250mL)等.

2 方法

2.1 牛大力灌胃液的制備 取牛大力干燥藥材，用10倍體積的蒸餾水浸泡1h，加熱煮沸2h，趁熱過濾，殘渣再加6倍體積的蒸餾水，加熱煮沸1h，合并2次濾液，濃縮至1g/mL濃度備用，使用時加蒸餾水稀釋至所需濃度[9].

2.2 動物分組和處理 80只小鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)7d后，隨機分為陰性對照組、牛大力低、中、高劑量組，每組20只.每天上午9：00-10：00，牛大力各劑量組分別以牛大力水煎液5、10、20 g/(kg·d)灌胃，陰性對照組給予等量生理鹽水.連續(xù)14d，末次灌胃1h后進行各項實驗[9].

2.3 負重游泳試驗 取小鼠20只（陰性對照組、牛大力低、中、高劑量組各5只），每只小鼠尾部負荷其體重5%的重物，置于水溫為（25±1）℃，水深為40cm的小鼠游泳池內(nèi)，以小鼠游泳至頭部沉入水中15s不再浮出水面為體力耗竭，觀察記錄從投入水中至體力耗竭的時間為游泳時間.

2.4 耐缺氧試驗 取小鼠20只（陰性對照組、牛大力低、中、高劑量組各5只），分別放入裝有15g鈉石灰的250mL廣口瓶中，瓶口用凡士林密閉，以小鼠呼吸停止為死亡指標(biāo)，觀察記錄各組小鼠在缺氧條件下的存活時間.

2.5 耐低溫試驗 取小鼠20只（陰性對照組、牛大力低、中、高劑量組各5只），裝入250mL燒杯中，用紗布封口.置于-4℃的低溫冷凍柜中，觀察記錄小鼠的存活時間.

2.6 耐高溫試驗 取小鼠20只（陰性對照組、牛大力低、中、高劑量組各5只），分別放入250mL錐形瓶中，用紗布封住瓶口，然后將錐形瓶置于溫度為(42±0.5)℃的恒溫水浴鍋內(nèi)，觀察記錄小鼠在高溫條件下存活的時間.

2.7 統(tǒng)計學(xué)處理 將實驗測得的數(shù)據(jù)輸入Origin 7.5統(tǒng)計分析軟件，進行雙尾t檢驗，結(jié)果以x±s表示.

3 結(jié)果

在小鼠負重游泳試驗、耐缺氧試驗、耐低溫試驗、耐高溫試驗中，牛大力各劑量組小鼠存活的時間與陰性對照組小鼠的存活時間相比均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），且隨著牛大力水煎液濃度的增大而相對延長，并呈一定的劑量-反應(yīng)關(guān)系.結(jié)果見表1.

表1 牛大力對小鼠耐疲勞、耐缺氧、耐低溫、耐高溫能力的影響

4 討論

4.1 牛大力抗運動性疲勞的作用 有關(guān)消除運動性疲勞方法的研究一直是運動訓(xùn)練和運動醫(yī)學(xué)領(lǐng)域倍受關(guān)注的課題.在競技體育飛速發(fā)展的今天，運動員運動能力的競爭日益激烈，能否安全有效的預(yù)防和消除運動性疲勞直接關(guān)系著運動員的成績.目前，許多學(xué)者都在尋找能提高運動員體質(zhì)和運動能力，盡快消除疲勞，不含違禁成份，無副作用的藥物和食物.盡管西醫(yī)中許多藥物在提高運動能力、延緩疲勞發(fā)生和消除疲勞方面確有較好的效果，但由于其副作用給機體造成的危害、以及某些藥物中含有興奮劑成分等不利因素，而致使許多謹(jǐn)慎的專家望而卻步.因此，自20世紀(jì)80年代起，我國運動醫(yī)學(xué)界已開始重視并致力于借助中藥來消除運動性疲勞，提高運動能力，且已逐漸成為中國運動醫(yī)學(xué)研究中的一個熱點.縱觀消除疲勞的中藥，多以補益類藥物為主，大量研究已證實[10-13]，補益類中藥能促進運動性疲勞的消除，有效地改善運動能力，對運動員恢復(fù)體能，防治疲勞綜合征有著重要而深遠的意義.本課題研究的中藥牛大力，具有補虛潤肺、舒筋活絡(luò)等功效，藥性屬補益類.本實驗采用小鼠負重力竭游泳，檢測牛大力的抗疲勞作用，結(jié)果顯示，牛大力水煎液的三個劑量組均能顯著延長小鼠負重力竭游泳的時間，呈一定的量-效關(guān)系，說明牛大力有較好的抗運動疲勞功效.

4.2 牛大力的抗應(yīng)激作用 應(yīng)激是機體受到各種刺激后產(chǎn)生的一種非特異性反應(yīng).外界環(huán)境的不良刺激以及人體自身過度情感刺激, 均可構(gòu)成應(yīng)激原, 使機體處于應(yīng)激狀態(tài)[14].祖國醫(yī)學(xué)認為，人如果長期生活在應(yīng)激狀態(tài)下可引起臟腑陰陽氣血失調(diào)，導(dǎo)致機體免疫力下降，進而引起一系列的疾病.如原發(fā)性高血壓、甲亢、消化性潰瘍、冠心病、支氣管哮喘等的發(fā)生均與應(yīng)激有關(guān).而長期應(yīng)激還可造成脂質(zhì)過氧化物在體內(nèi)積蓄，損傷生物膜，使細胞發(fā)生退行性病變，從而加速各器官的老化[15].抗應(yīng)激能力是機體對不良環(huán)境(如寒冷、高溫、缺氧、饑渴等) 適應(yīng)的體現(xiàn).具有抗應(yīng)激作用的藥物能增強機體對各種有害刺激的非特異性抵抗能力，延長機體在有害刺激下的生存時間[16].本研究對小鼠實施高溫、寒冷、常壓缺氧等應(yīng)激原刺激，以考察牛大力的抗應(yīng)激作用.實驗結(jié)果表明牛大力水煎液可以延長小鼠耐高溫、耐低溫及常壓缺氧的生存時間，提示牛大力能改善機體對應(yīng)激原刺激的適應(yīng)性，提高機體的抗應(yīng)激能力.

牛大力具有滋補強壯, 補養(yǎng)氣血之功效，多糖、生物堿、香豆素為其主要活性成分，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明這些物質(zhì)具有抗氧化、抗衰老、增強免疫、清除自由基、修復(fù)DNA損傷等作用.牛大力能抗運動疲勞、提高機體的抗應(yīng)激能力可能是通過增加能源物質(zhì)，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)，增強抗氧化，減少自由基生成，清除代謝產(chǎn)物堆積，增強免疫功能等途徑.其作用機制，本課題組將進一步進行研究. ■

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【責(zé)任編輯 謝文?！?/p>

Study on Anti-fatigue and Anti-stress Function of Radix Millettiae Speciosae in Mice

HUANG Xiang1, WANG Xiao-ping2, CHEN Xiao-bai2
(1． College of P．E, Yulin Normal University, Yulin, Guangxi 537000；2． College of Life Science & Technology, Yulin Normal University, Yulin, Guangxi 537000)

s:Objective: To study the anti-fatigue and anti-stress function of Radix Millettiae Speciosae in Mice．Methods Established 7 Radix Millettiae Speciosae dose groups with low（5g·kg-1）, medium（10g·kg-1) , high（20g·kg-1）and negative control group by the SPF male mice． The mice after adaptive raise for 3 days, the negative control group were given normal saline, and the Radix Millettiae Speciosae dose groups were given orally given aqueous extracts of 5,10,20g·kg-1from Radix Millettiae Speciosae for 14 consecutive days． After the last dosed, the mice performed weight loading swimming test, hypoxia tolerance test, low temperature resistance test and high temperature resistance test, and statistics the average survival time of mice in these test． Results: Compared with control group, the Radix Millettiae Speciosae could significantly prolong the survival time in weight loading swimming test, hypoxia tolerance test, low temperature resistance test and high temperature resistance test(P＜0．01), As the dose increased, the mice survival time was prolonged． Conclusion: The Radix Millettiae Speciosae has the effects of anti-fatigue and anti-stress．

Radix Millettiae Speciosae; anti-fatigue; anti-stress; Chinese herb

R285.5

A

1004-4671（2014）02-0055-04

2014-01-01

廣西自然科學(xué)基金面上項目（2011GXNSFA018296）；廣西教育廳2013年度廣西高校科研資助項目(2013LX108)；玉林師范學(xué)院高層次人才科研啟動基金項目（G20120017）。

黃翔（1965～），男，廣西桂平人，玉林師范學(xué)院體育學(xué)院副教授，主要研究方向：運動醫(yī)學(xué)。