黃澤豪,郭家欣,沈賢娟
(福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,福建福州350108)
十二時辰來源于毛茛科植物重瓣鐵線蓮Clematis florida var.Plena D.Don.,其根(或帶有少量根莖)在福安民間供藥用。據(jù)《福安畬醫(yī)畬藥》記載,其性溫,味辛,具有通行十二經(jīng)脈,祛風(fēng)除濕,活血止痛,理氣通便,解毒等功效[1],是頗具地方特色的一味民族藥。據(jù)考證其最早是以“鐵線牡丹”之名收載于《滇南本草》[2],但《滇南本草》中所述之功效與《福安畬醫(yī)畬藥》中的功效并不完全相同。近年來,該藥不僅在當(dāng)?shù)貜V泛應(yīng)用,還高價銷往江浙等省區(qū),常常供不應(yīng)求。不管是從藥用價值還是從市場前景看,十二時辰都是十分值得關(guān)注的一味特色畬藥。然而迄今為止,對于十二時辰或其原植物重瓣鐵線蓮的研究都很少見報道,僅見關(guān)于重瓣鐵線蓮組織培養(yǎng)的文獻[3-4],對于十二時辰的化學(xué)成分更是一無所知。木文擬對其揮發(fā)油組分進行分析,為保證該藥臨床應(yīng)用的安全有效提供參考。
1.1 樣品及揮發(fā)油提取供試藥材采集于福建省福安市賽岐鎮(zhèn)高水筧畬族村,由該村駐村干部劉培欽提供,經(jīng)作者鑒定為毛茛科植物重瓣鐵線蓮Clematis florida var.Plena D.Don.的根及根莖,憑證標(biāo)本保存于福建中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定室。干燥的藥材粉碎得粗粉450 g,室溫下以95%乙醇反復(fù)冷浸及超聲提取數(shù)次后,減壓回收溶劑,得到浸膏,浸膏懸浮于蒸餾水中,水蒸氣蒸餾,用《中華人民共和國藥典》(2010版)規(guī)定的揮發(fā)油提取方法提取5 h,以無水硫酸鈉干燥得到揮發(fā)油部分。
1.2 儀器及分析條件6890N GC/5975 MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國安捷倫公司);色譜柱為安捷倫DB-1石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm);進樣口溫度250℃,接口溫度230℃;載氣為氮氣,流速為0.9 mL/min;柱壓為80 kPa,分流比40∶1,進樣量1.0 μL;升溫程序及柱溫如下:60℃(50℃/min)→115℃(1℃/min)→145℃(10℃/min)→230℃,可達到較好分離效果。質(zhì)譜條件:電子轟擊源EI;電子能量70 eV;雙燈絲,掃描范圍40~400 m/z,掃描間歇1.0 s。峰面積歸一法計算各化合物的相對含量。
1.3 GC-MS測定取供試品溶液1 μL,以分流方式進樣,測得其氣相色譜-質(zhì)譜總離子流色譜圖。所得各色譜峰經(jīng)純度檢查,歸一化法測得各峰的相對含量。利用Class 5000色譜軟件及NIST05.L版質(zhì)譜譜庫進行檢索,并結(jié)合圖譜解析對色譜峰進行了鑒定。
提取得到揮發(fā)油為白色固態(tài),經(jīng)GC-MS檢測,其總離子流見圖1;經(jīng)分析得其揮發(fā)油的組分構(gòu)成見表1。共鑒定出了其中的18種化合物,占總萃取物含量的69.62%。主要成分有棕櫚酸(33.46%)、十六酸乙酯(15.93%)、油酸乙酯(4.09%)、棕櫚酸甲酯(2.20%)、亞油酸乙酯(1.73%)、(Z)-6-十八烯酸(1.47%)、正二十一烷(1.37%)、十五烷酸(1.12%)。
圖1 十二時辰揮發(fā)油GC-MS總離子流圖
鐵線蓮屬植物的揮發(fā)油已有較多的研究,如柱果鐵線蓮、粗齒鐵線蓮、青海粉綠鐵線蓮等。與文獻的研究結(jié)果比較,幾種鐵線蓮屬植物的揮發(fā)性成分較為相似,如東北鐵線蓮果的揮發(fā)油主要成分為二十二烷(9.57%)、十六烷酸(8.79%)、13-二烯酸(5.89%)、酞酸二丁酯(5.89%)、十六酸乙酯(5.50%)等[5]。柱果鐵線蓮揮發(fā)油的主要成分是亞油酸(29.69%),其次是棕櫚酸(12.37%)等[6]。青海粉綠鐵線蓮的揮發(fā)油主要成分為十六酸乙酯(24.06%)、9,12,15-十八三烯酸乙酯(9.75%)、亞油酸乙酯(5.10%)等[7]。粗齒鐵線蓮揮發(fā)油主要成分有棕櫚酸(52.75%)、植醇(13.89%)、9(Z),12(Z)-十八碳二烯酸(10.20%)、亞麻酸(7.39%)等[8]??梢?,十二時辰的揮發(fā)油組分與同屬植物十分相似,以棕櫚酸等脂肪酸或酯類為主。
根據(jù)十二時辰的揮發(fā)油組分來看,主含棕櫚酸及棕櫚酸甲酯、乙酯等。據(jù)《國外醫(yī)藥:植物藥分冊》報道,棕櫚酸甲酯治療胃腸功能失調(diào),這可能是其具有治療反胃嘔吐功效[2]的有關(guān)成分。
畬醫(yī)認(rèn)為十二時辰味辛,性溫,具有通經(jīng)活絡(luò)、祛風(fēng)除濕、活血止痛之功效,用于治療跌打損傷、關(guān)節(jié)腫痛等[1]。中藥藥理研究表明,類似通經(jīng)活絡(luò)、祛風(fēng)除濕、活血止痛之功效的“辛味藥”多與所含揮發(fā)油或其它脂溶性成分有關(guān),或者其起藥效作用的成分為非揮發(fā)性成分。當(dāng)然,鑒于對十二時辰的研究才剛剛開始,其揮發(fā)性成分與其藥效的相關(guān)性還有待進一步的研究探討。
表1 十二時辰的揮發(fā)油組分
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