3種檢測(cè)方法診斷喉結(jié)核42例效果評(píng)價(jià)

費(fèi)兵，殷 勇，吳 真，張布衣，閔克華，黃劍飛，吳 昊，達(dá) 鵬*，黃 云

（1金湖縣人民醫(yī)院耳鼻咽喉科，江蘇211600；2南通大學(xué)附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科；3常熟第二人民醫(yī)院耳鼻咽喉科；4浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院病理科；5金湖縣中醫(yī)院耳鼻咽喉科；6南通大學(xué)附屬醫(yī)院病理科；7南通市結(jié)核病防治所)

·論著與經(jīng)驗(yàn)交流·

3種檢測(cè)方法診斷喉結(jié)核42例效果評(píng)價(jià)

費(fèi)兵1，2，殷 勇2，吳 真3，張布衣4，閔克華5，黃劍飛6，吳 昊2，達(dá) 鵬2*，黃 云7

（1金湖縣人民醫(yī)院耳鼻咽喉科，江蘇211600；2南通大學(xué)附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科；3常熟第二人民醫(yī)院耳鼻咽喉科；4浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院病理科；5金湖縣中醫(yī)院耳鼻咽喉科；6南通大學(xué)附屬醫(yī)院病理科；7南通市結(jié)核病防治所)

目的：評(píng)價(jià)抗酸染色、血清結(jié)核抗體、結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)在喉結(jié)核診斷中的作用。方法：確診的喉結(jié)核患者42例（喉結(jié)核組）和聲帶息肉患者26例（對(duì)照組）標(biāo)本采用抗酸染色，分離外周血血清進(jìn)行結(jié)核抗體檢測(cè)，結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)，對(duì)這3種檢測(cè)方法結(jié)果進(jìn)行分析比較。結(jié)果：結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)診斷喉結(jié)核陽(yáng)性38例（90.5%），高于血清結(jié)核抗體陽(yáng)性13例（30.9%），抗酸染色陽(yáng)性7例（16.6%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論：結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)是一種具有較高敏感性和特異性的檢測(cè)結(jié)核感染的技術(shù)，對(duì)快速而準(zhǔn)確地診斷喉結(jié)核具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值。

喉結(jié)核；T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)；血清結(jié)核抗體試驗(yàn)；抗酸染色試驗(yàn)

近年來(lái)結(jié)核病疫情呈上升趨勢(shì)，喉結(jié)核的發(fā)病率也在逐年增加。與過(guò)去相比喉結(jié)核的發(fā)病形式和臨床特征等均已發(fā)生較大改變，該病的診斷更加困難[1]。因此方便、快捷的診斷該病以減少誤診極其重要。2007年8月—2012年12月，我們采用抗酸染色、分離外周血血清進(jìn)行結(jié)核抗體檢測(cè)、結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)（T-SPOT.TB）確診喉結(jié)核患者42例，本文比較這3種檢測(cè)方法對(duì)喉結(jié)核的診斷價(jià)值，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 （1）喉結(jié)核組：喉結(jié)核患者42例，男23例，女19例，年齡30~65歲，平均47.1歲。聲音嘶啞23例，咽痛、咽部異物感19例。電子喉鏡檢查：病變部位：聲帶前中部22例，聲帶后部20例；病變形態(tài)：粘膜蒼白水腫、局部點(diǎn)狀淺潰瘍10例，肉芽樣增生表面?zhèn)文じ采w17例，肉芽樣新生物11例，結(jié)節(jié)樣隆起9例。既往有肺結(jié)核病史3例，胸部X線檢查為陳舊性改變，其余患者胸部X線未見(jiàn)異常。（2）對(duì)照組：選擇同期的聲帶息肉患者26例，男14例，女12例，年齡31~66歲，平均48.3歲。均表現(xiàn)為聲音嘶啞。電子喉鏡檢查：符合息肉樣改變，手術(shù)切除后病理確診。均無(wú)結(jié)核病史和任何臨床癥狀，經(jīng)胸部X線檢查確定無(wú)異常。

1.2 方法 （1）抗酸染色：組織切片3μm厚，TO生物透明劑脫蠟2次，每次5～10 min，其余步驟按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。檢驗(yàn)結(jié)果解釋：結(jié)核菌呈紅色桿狀或螺旋狀，單個(gè)或成簇排列，其他細(xì)菌及細(xì)胞呈藍(lán)色[2]。（2）血清結(jié)核抗體檢測(cè)：采集患者靜脈血置室內(nèi)1小時(shí)以上，離心獲得待測(cè)血清，按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)區(qū)中央位置顯示紅色圓點(diǎn)為陽(yáng)性，未顯示為陰性。（3）結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)：根據(jù)T-SPOT. TB試劑盒操作：肝素抗凝管采集5mL外周靜脈血，密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞。陽(yáng)性結(jié)果定義為：測(cè)量孔點(diǎn)數(shù)是陰性對(duì)照的2倍以上或比陰性對(duì)照多5個(gè)點(diǎn)[3]。

*[通信作者]達(dá)鵬，E-mail:jdlydap@126.com

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料差異性比較使用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 抗酸染色 喉結(jié)核患者42例中抗酸染色陽(yáng)性7例，陰性35例。聲帶息肉患者26例中抗酸染色陽(yáng)性0例，陰性26例。抗酸染色檢測(cè)喉結(jié)核敏感度為16.6%，特異度為100.0%。

2.2 血清結(jié)核抗體檢測(cè) 喉結(jié)核患者42例中血清結(jié)核抗體檢測(cè)陽(yáng)性13例，陰性29例。聲帶息肉患者26例中血清結(jié)核抗體檢測(cè)陽(yáng)性8例，陰性18例。血清結(jié)核抗體檢測(cè)喉結(jié)核敏感度為30.9%，特異度為69.2%。

2.3 T-SPOT．TB檢測(cè) 喉結(jié)核患者42例中TSPOT．TB陽(yáng)性38例，陰性4例。26例聲帶息肉患者中T-SPOT．TB陽(yáng)性2例，陰性24例。T-SPOT．TB檢測(cè)喉結(jié)核敏感度為90.5%，特異度為92.3%。

2.4 喉結(jié)核組3種檢測(cè)方法結(jié)果比較 喉結(jié)核患者42例標(biāo)本采用抗酸染色，分離外周血血清進(jìn)行結(jié)核抗體檢測(cè)，結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)，使用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行分析比較后發(fā)現(xiàn)，結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)診斷喉結(jié)核的陽(yáng)性率顯著高于血清結(jié)核抗體和抗酸染色，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見(jiàn)表1。

表1 3種檢測(cè)方法對(duì)兩組臨床標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果比較（例）

3 討 論

喉結(jié)核是呼吸系統(tǒng)結(jié)核病中最常見(jiàn)的肺外結(jié)核，也是目前喉部發(fā)病率最高的肉芽腫性疾病之一。自20世紀(jì)50年代以來(lái)喉結(jié)核已很少見(jiàn)，但隨著近年結(jié)核病發(fā)病率的上升，喉結(jié)核的發(fā)病率在逐年增多[4]。喉結(jié)核的病變部位，特征也在發(fā)生改變，臨床易造成誤診誤治。

實(shí)驗(yàn)室檢查是確診喉結(jié)核的主要依據(jù)，病理檢查是確診疾病的“金標(biāo)準(zhǔn)”。但由于喉部解剖的特殊,標(biāo)本獲取相對(duì)較少。有時(shí)可能需要多次或深部活檢才能確診，無(wú)形中增加了患者負(fù)擔(dān)，延長(zhǎng)了確診時(shí)間?？顾崛旧舾卸认鄬?duì)較低，本組陽(yáng)性率為15.7%，低于文獻(xiàn)報(bào)道的30.5%[2]，分析原因可能與實(shí)驗(yàn)取材有關(guān)。血清結(jié)核抗體檢測(cè)是利用結(jié)核分枝桿菌抗原，檢測(cè)血清或體液中的結(jié)核分枝桿菌特異性抗體。但由于人群中感染結(jié)核分枝桿菌十分普遍，廣泛的卡介苗接種及結(jié)核病患者個(gè)體的免疫功能影響等因素，使血清結(jié)核抗體測(cè)定存在一定的假陽(yáng)性和假陰性[5]。

T-SPOT．TB以ESAT-6和CFP-10作為刺激抗原，刺激機(jī)體外周血單個(gè)核細(xì)胞 (peripheral blood mononuclear cell，PBMC)，再通過(guò)ELISPOT技術(shù)檢測(cè)結(jié)核感染后，特異度細(xì)胞因子IFN-7分泌T細(xì)胞水平來(lái)證實(shí)存在結(jié)核感染，從理論上保證該實(shí)驗(yàn)的高特異性和敏感性[6]。結(jié)核分枝桿菌感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)，同時(shí)可對(duì)臨床肉芽腫病變?nèi)缃Y(jié)節(jié)病或Wegenen肉芽腫與結(jié)核病進(jìn)行鑒別。結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)的“全或無(wú)”使檢測(cè)結(jié)果更加直觀，且檢測(cè)時(shí)間一般不超過(guò)24h。Lalvani[7]研究顯示T-SPOT.TB對(duì)免疫正常成年人活動(dòng)性結(jié)核敏感度83.0%~97.0%，綜合敏感度為90.0%；本研究運(yùn)用結(jié)核分枝桿菌感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)方法檢測(cè)喉結(jié)核42例患者中38例陽(yáng)性，敏感度為90.5%，在非結(jié)核組的特異性為92.3%，接近上述文獻(xiàn)報(bào)道。

目前結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)已在呼吸，消化，骨科等?？频玫竭\(yùn)用，并獲得較滿意的效果。本項(xiàng)研究顯示其對(duì)于早期，快速地診斷喉結(jié)核具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[1]白玉萍，劉紅剛．喉結(jié)核的研究現(xiàn)狀[J]．國(guó)際耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2006，30（5）：309-312．

[2]羅春英，王建東，王璇，等．熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)石蠟包埋組織結(jié)核桿菌的應(yīng)用價(jià)值 [J]．中華病理學(xué)雜志，2012，41（8）：562-563．

[3]謝希，陳進(jìn)偉，高潔生，等．結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核診斷中的應(yīng)用[J]．臨床內(nèi)科雜志，2010，27（6）：396-399．

[4]白玉萍，劉紅剛，韓一丁．近年喉結(jié)核的臨床病理特征[J]．診斷病理學(xué)雜志，2007，14（5）：329-332．

[5]袁麗娜，黨霞，史慧敏，等．不同檢測(cè)方法對(duì)結(jié)核病的診斷價(jià)值[J]．鄭州大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2011，46（6）：945-947．

[6]吳海露，張振玉，袁捷，等．結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核性腹膜炎診斷中的臨床應(yīng)用 [J]．臨床薈萃，2012，27 （23）：2046-2049．

[7]Lalvani A.Diagnosing tuberculosis infection in the 21st century:new tools to tackle an old enemy[J].Chest,2007,131 (6):1898-1906.

R529.8

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2014-01-13

1006-2440（2014）01-0079-02