云南金錢槭(Dipteronia dyeriana)果實的化學成分

石亞娜，劉大會，金 航，楊 雁，趙大克，王躍虎，龍春林，4*

1云南省農(nóng)業(yè)科學院藥用植物研究所，昆明 650223;2 云南大學農(nóng)學院，昆明 650091;3 中國科學院昆明植物研究所資源植物與生物技術(shù)重點實驗室，昆明 650201;4 中央民族大學生命與環(huán)境科學學院，北京 100081

金錢槭屬植物(Dipteronia)隸屬槭樹科(Aceraceae)，屬下僅云南金錢槭(D.dyeriana Henry)與金錢槭(D.sinensis Oliv.)兩個種，分別被列為國家二級和三級保護的珍稀瀕危植物［1-3］。我們此前對云南金錢槭的化學成分進行了系統(tǒng)的研究，從中發(fā)現(xiàn)了罕見的環(huán)己酰亞胺成分，以及一系列的三萜酯皂苷及酚性成分，其中部分化合物具有弱的細胞毒活性［4-7］。

本研究組已開展了云南金錢槭枝條及葉片部分的化學成分研究。從云南金錢槭葉片中分離得到13個化合物［8］，從其枝條部分90%乙醇提取物中共分離鑒定了24個化合物，化合物結(jié)構(gòu)類型涉及木脂素、三萜、生物堿和香豆素等，其中新化合物7個［4，5］。

從云南金錢槭果實部分90%乙醇提取物已經(jīng)分離鑒定了3個新的戊二酰亞胺類生物堿成分［6］，為了繼續(xù)尋找云南金錢槭果實中的抗腫瘤活性成分，我們陸續(xù)在果實的90%乙醇提取物中分離、鑒定了12個化合物，化合物結(jié)構(gòu)類型涉及單萜、倍半萜和酚性成分:8個酚性成分即訶子裂酸11，12-二乙酯(1)，訶子裂酸12，13-二乙酯(2)，訶子裂酸11-甲酯-12，13-二乙酯(3)，訶子裂酸(4)，3，4，8，9，10-Pentahydroxy-dibenzo［b，d］pyran-6-one (8)，3，4，5-三羥基苯甲酸乙酯(9)，對羥基苯甲醛(10)，3，4-二羥基苯甲酸甲酯(11);2個倍半萜即二氫紅花菜豆酸(5)，紅花菜豆酸(6);1個單萜即7-Carboxyl-8-carveol (7);糖的氧化產(chǎn)物5-羥甲基糠醛(12)。由于提取、分離過程中使用了乙醇及甲醇，化合物1～3 可能是人工產(chǎn)物。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

供實驗用的云南金錢槭果實于2008 年10 月采自云南省屏邊縣;植物標本由中國科學院昆明植物研究所龍春林研究員鑒定;標本存放于中國科學院昆明植物研究所民族藥物化學實驗室。

1.2 實驗儀器及材料

1H 和13C NMR 譜在Bruker AM-400 或DRX-500 核磁共振儀上測定(TMS 為內(nèi)標);柱層析用硅膠G (80～100 目，200～300 目，300～400 目)或硅膠H (10–40 μm)及薄層層析板均為青島海洋化工廠產(chǎn)品;薄層層析通過5%硫酸-乙醇溶液加熱觀察其斑點;MCI 大孔樹脂(70～150 μm，三菱化學公司);Sephadex LH-20 為Pharmcia 公司產(chǎn)品;反向材料RP-18 為Merck 公司產(chǎn)品;高效液相色譜儀(Agilent 1200，色譜柱:Zorbax SB-C18，φ 9.4 (250 mm，5 μm)。

1.3 實驗方法

將云南金錢槭果實曬干后(6 kg)粉碎，用90%乙醇加熱回流提取三次，合并提取液，濃縮得浸膏900 g。再依次用石油醚和乙酸乙酯各萃取三次，回收溶劑得石油醚萃取物588 g，乙酸乙酯萃取物17 g，水部分250 g。乙酸乙酯部分過MCI 大孔樹脂(甲醇–水，70∶30)洗脫，再經(jīng)反相中壓液相色譜按梯度5%、15%、30%、35%、45%、55%洗脫，分別得到:Fr.1 (300 mg)、Fr.2 (481.3 mg)、Fr.3 (1.07 g)、Fr.4 (1.05 g)、Fr.5 (2.15 g)、Fr.6 (349.6 mg)。Fr.1 經(jīng)過Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)得到化合物4 (23.3 mg)。Fr.2 經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)、硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 30∶1)、制備TLC(CHCl3-MeOH-H2O，40∶5∶0.45)后得到化合物12 (50.4 mg)。Fr.3 經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)后得到Fr.3-1(35.1 mg)，F(xiàn)r.3-2(72.3 mg)。Fr.3-1 經(jīng)過硅膠柱層析(CHCl3-EtOAc 1 ∶1)、制 備 TLC (CHCl3-MeOHEt2NH，35∶7∶0.42)后得到化合物5 (6.5mg)。Fr.3-2 經(jīng)制備TLC(CHCl3-MeOH，5∶1)后得到化合物10 (9.0 mg)及Fr.3-2-1(42.2 mg)經(jīng)制備HPLC(MeOH-H2O，65∶35)后得到化合物10 (9.0 mg)和11(16.3 mg)。Fr.4 經(jīng)過硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 20∶1)后得到Fr.4-1(92.2 mg)和Fr.4-2(78.3 mg)。Fr.4-1 經(jīng)過硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 10∶1)、Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)、制備TLC (CHCl3-MeOH，7∶1)后得到化合物9 (25.5 mg)。Fr.4-2 經(jīng)過Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)、制備HPLC (MeOH-H2O，60∶40)后得到化合物1 (21.4 mg)和2 (9.0 mg)。Fr.5 經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱(MeOH 洗脫)、硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 30∶1)后得到Fr.5-1 (48.2 mg)和Fr.5-2 (70.3 mg)，F(xiàn)r.5-1 經(jīng)制備HPLC (MeOH-0.05%TFA，60∶40)后得到化合物7 (3.8 mg)和6 (7.0 mg)。Fr.5-2 經(jīng)過硅膠柱層析(CHCl3-MeOH 5∶1)后得到化合物3 (23.4 mg)。Fr.6 經(jīng)過反復硅膠柱層析(EtOAc-MeOH 10∶1)、(CHCl3-Me2CO-H2O 15∶30∶0.45)后得到化合物8 (72 mg)。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 無色固體(MeOH)，C18H20O11;1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:5.29 (1H，d，J=1.2 Hz，H-3)，3.88 (1H，dd，J=9.2，1.2 Hz，H-4)，7.01 (1H，s，H-8)，3.16 (1H，ddd，J=9.2，8.8，5.6 Hz，H-9)，2.78 (1H，dd，J=17.2，8.8 Hz，H-10a)，2.44 (1H，dd，J=17.2，5.6 Hz，H-10b)，4.02 (2H，m)，3.93 (2H，m)，1.14 (3H，t，J=7.2 Hz)，1.07 (3H，t，J=7.2 Hz);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:166.4 (C-1，qC)，78.8 (C-3，CH)，37.1 (C-4，CH)，117.3 (C-4a，qC)，144.1 (C-5，qC)，140.6 (C-6，qC)，146.8 (C-7，qC)，109.2 (C-8，CH)，116.2 (C-8a，qC)，44.9 (C-9，CH)，35.2(C-10，CH2)，173.4 (C-11，qC)，170.7 (C-12，qC)，176.6 (C-13，qC)，63.0 (CH2)，61.8 (CH2)，14.3(CH3)，14.2 (CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［8］，可以確定化合物1 為訶子裂酸11，12-二乙酯。

化合物2 無色固體(MeOH)，C18H20O11;1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:5.24 (1H，br s，H-3)，3.88 (1H，m，H-4)，7.03 (1H，s，H-8)，3.16 (1H，m，H-9)，2.87 (1H，dd，J=17.2 Hz，10.8，H-10a)，2.42 (1H，dd，J=17.2，4.4 Hz，H-10b)，4.12(2H，m)，4.09 (2H，m)，1.19 (3H，t，J=7.2 Hz)，1.09 (3H，t，J=7.2 Hz);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:166.4 (C-1，qC)，78.3 (C-3，CH)，37.5(C-4，CH)，117.6 (C-4a，qC)，143.9 (C-5，qC)，140.7 (C-6，qC)，146.9 (C-7，qC)，108.9 (C-8，CH)，116.1 (C-8a，qC)，45.3 (C-9，CH)，35.1 (C-10，CH2)，174.8 (C-11，qC)，170.8 (C-12，qC)，174.8 (C-13，qC)，63.1 (CH2)，62.4 (CH2)，14.4(CH3)，14.2 (CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［8］，可以確定化合物2 為訶子裂酸12，13-二乙酯。

化合物3 無色固體(MeOH)，C19H22O11;1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:5.28 (1H，d，J=1.2 Hz，H-3)，4.10 (1H，dd，J=7.2，1.2 Hz，H-4)，7.02 (1H，s，H-8)，3.30 (1H，m，H-9)，2.83 (1H，dd，J=18.0，10.8 Hz，H-10a)，2.51 (1H，dd，J=16.4，4.8 Hz，H-10b)，4.11 (2H，m)，4.06 (2H，m)，3.62 (3H，s)，1.20 (3H，t，J=7.2 Hz)，1.08(3H，t，J=7.2 Hz);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:166.3 (C-1，qC)，78.4 (C-3，CH)，37.3 (C-4，CH)，117.4 (C-4a，qC)，144.0 (C-5，qC)，140.7(C-6，qC)，146.9 (C-7，qC)，109.0 (C-8，CH)，116.2 (C-8a，qC)，45.0 (C-9，CH)，34.9 (C-10，CH2)，173.7 (C-11，qC)，170.7 (C-12，qC)，174.6(C-13，qC)，63.1 (CH2)，62.4 (CH2)，52.3(CH3)，14.3 (CH3)，14.2 (CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［8］，可以確定化合物3 為訶子裂酸11-甲酯-12，13 二乙酯。

化合物4 無色固體(MeOH)，C14H12O11;1H NMR (DMSO-d6，500 MHz)δ:5.37 (1H，s，H-3)，3.59 (1H，d J=8.5 Hz，H-4)，7.39 (1H，s，H-8)，2.85 (1H，ddd J=11.4，8.5，3.3 Hz，H-9)，2.79(1H，dd，J=16.9，11.4 Hz，H-10a)，2.08 (1H，dd，J=16.9，3.3 Hz，H-10b);13C NMR (DMSO-d6，100 MHz)δ:163.5 (C-1，qC)，76.6 (C-3，CH)，35.7(C-4，CH)，116.7 (C-4a，qC)，142.8 (C-5，qC)，138.9 (C-6，qC)，145.4 (C-7，qC)，107.7 (C-8，CH)，114.9 (C-8a，qC)，43.8 (C-9，CH)，34.3 (C-10，CH2)，173.1 (C-11，qC)，171.0 (C-12，qC)，174.6 (C-13，qC)。其1H NMR 和13C NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［9，10］，可以確定化合物4 為訶子裂酸。

化合物5 無色油狀(MeOH)，C15H22O5;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:5.78 (1H，s，H-2)，7.89(1H，d，J=16.0 Hz，H-4)，6.40 (1H，d，J=16.0 Hz，H-5)，2.03 (2H，m，H-2')，1.75 (2H，dd，J=13.5，10.5 Hz，H-2')，4.09 (1H，m，H-3')，1.83(2H，ddd，J=13.5，7.0，1.5 Hz，H-4')，3.79 (2H，dd，J=7.5，2.5 Hz，H-6')，3.70 (2H，d，J=7.5 Hz，H-6')，2.03 (3H，d，J=1.0 Hz，3-CH3)，1.14(3H，s，1'-CH3)，0.92 (3H，s，5'-CH3);13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:171.6 (C-1，qC)，122.5 (C-2，CH)，147.7 (C-3，qC)，132.2 (C-4，CH)，133.4(C-5，CH)，87.8 (C-1'，qC)，46.0 (C-2'，CH2)，66.0 (C-3'，CH)，44.5 (C-4'，CH2)，49.3 (C-5'，qC)，77.3 (C-6'，CH2)，83.2 (C-8'，qC)。21.0 (3-CH3，CH3)，20.0 (1'-CH3，CH3)，16.4 (5'-CH3，CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［11］，可以確定化合物5 為二氫紅花菜豆酸。

化合物6 無色油狀(MeOH)，C15H20O5;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:5.79 (1H，s，H-2)，8.09(1H，d，J=15.9 Hz，H-4)，6.44 (1H，d，J=15.9 Hz，H-5)，2.36 (2H，m，H-2')，2.40 (2H，m，H-2')，1.83 (2H，m，H-4')，3.94 (2H，dd，J=7.63，2.87 Hz，H-6')，3.66 (2H，d，J=7.63 Hz，H-6')，2.06(3H，m，3-CH3)，1.21 (3H，s，1'-CH3)，1.00 (3H，s，5'-CH3);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:170.0 (C-1，qC)，120.2 (C-2，CH)，150.7 (C-3，qC)，133.0(C-4，CH)，133.4 (C-5，CH)，87.8 (C-1'，qC)，211.0 (C-2'，CH)，53.2 (C-3'，CH)，44.5 (C-4'，CH2)，49.3 (C-5'，qC)，78.5 (C-6'，CH2)，83.0 (C-8'，qC)，21.2 (3-CH3，CH3)，19.4 (1'-CH3，CH3)，15.8 (5'-CH3，CH3)。其1H NMR 和13C NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［12］，可以確定化合物6 為紅花菜豆酸。

化合物7 無色油狀(MeOH)，C10H16O3;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:7.00 (1H，t，J=2.63 Hz，H-2)，2.04 (2H，m，H-3)，1.79 (2H，m，H-3)，1.71 (1H，m，H-4)，1.74 (2H，m，H-5)，1.49 (2H，m，H-5)，2.01 (2H，m，H-6)，1.91 (2H，m，H-6)，1.24 (3H，s，H-9)，1.27 (2H，s，H-10);13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:167.6 (C-1，qC)，130.8 (C-2，qC)，141.0 (C-3，CH)，28.1 (C-4，CH2)，45.0(C-5，CH)，24.1 (C-6，CH2)，26.0 (C-7，CH2)，71.7 (C-8，qC)，27.3 (C-9，CH3)，26.8 (C-10，CH3)。其13C NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［13］，可以確定化合物7 為7-Carboxyl-8-carveol。

化合物8 無色針狀晶體 (MeOH)，C13H8O7;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:8.43 (1H，d，J=9.0 Hz，H-1)，6.75 (1H，d，J=9.0 Hz，H-2)，7.37 (1H，s，H-7);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:119.1 (C-1，CH)，113.0 (C-2，CH)，146.8 (C-3，qC)，146.4 (C-4，qC)，144.0 (C-4a，qC)，164.0 (C-6，qC)，112.4 (C-7，CH)，141.8 (C-8，qC)，141.0(C-9，qC)，133.3 (C-10，CH)，112.1 (C-10a，CH)。其1H NMR 和13C NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［14］，可以確定化合物8 為3，4，8，9，10-Pentahydroxydibenzo［b，d］pyran-6-one。

化合物9 黃色針狀結(jié)晶(MeOH)，C16H18O10;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:7.03 (2H，s，H-2 和H-6)，4.26 (2H，q，J=7.2 Hz，H-1')，1.33(3H，t，J=7.2 Hz，H-2')。其1H NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［15］，可以確定化合物9 為3，4，5-三羥基苯甲酸乙酯。

化合物10 白色固體(MeOH)，C7H6O2;1H NMR (CD3OD，500 MHz)δ:9.76 (1H，s，H-7)，7.77(2H，d，J=8.5 Hz，H-2 和H-6)，6.91 (2H，d，J=8.5 Hz，H-3 和H-5)。其1H NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［16］，可以確定化合物10 為對羥基苯甲醛。

化合物11 黃色固體(MeOH)，C8H8O4;1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:7.53 (1H，s，H-2)，6.81(1H，d，J=7.9 Hz，H-5)，7.55 (1H，d，J=7.9 Hz，H-6)，3.88 (3H，s，7-OMe)。其1H NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［17］，可以確定化合物11 為3，4-二羥基苯甲酸甲酯。

化合物12 黃色油狀(CHCl3)，C6H6O3;1H NMR (CDCl3，500 MHz)δ:4.66 (2H，s，5-CH2OH)，6.48 (1H，d，J=3.4 Hz，H-4)，7.22 (1H，d，J=3.4 Hz，H-3)，9.51 (1H，s，2-CHO)。其1H NMR 數(shù)據(jù)和文獻報道相一致［18］，可以確定化合物12 為5-羥甲基糠醛。

3 討論

比較此前及本次的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，云南金錢槭各部位、云南金錢槭與同屬的金錢槭(D.sinensis)相同部位(果實)、金錢槭屬與槭樹屬(Acer)中所分離到的化合物的類型，都存在較大的差異。

云南金錢槭枝條部分所分化合物的結(jié)構(gòu)類型主要有三萜脂皂甙，木脂素等［6，7］，從云南金錢槭葉子部位所分的化合物的結(jié)構(gòu)類型主要是酚酸類和單寧類化合物［8］。本研究從云南金錢槭果實中所分的化合物結(jié)構(gòu)類型涉及酚酸類，與枝條部位所分的化合物相差甚遠，但分離到的酚酸類成分與云南金錢槭葉子中的相似。

云南金錢槭與金錢槭果實中所含的化合物類型也不同，金錢槭果實中分到的主要為三萜類，而此類型卻未從云南金錢槭果實中分到，而且也未從金錢槭果實中分到生物堿。

同科槭屬植物中主要含有二芳基庚烷衍生物類化合物和三萜皂甙類［19］，在金錢槭屬中我們分到與槭樹屬類似的齊敦果烷型三萜，卻沒有分離到二芳基庚烷衍生物類化合物。

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