類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清超氧化物歧化酶和血管性血友病因子水平變化及意義

劉 蓮，蔣紅梅，費 櫻，胡昌維

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)，是一種臨床上常見的全身性自身免疫性疾病，主要表現(xiàn)為對稱性的、涉及多個關(guān)節(jié)的、慢性的關(guān)節(jié)疾病和滑膜關(guān)節(jié)炎，其基本病理改變是關(guān)節(jié)滑膜炎癥和血管翳的形成[1]，但其具體發(fā)病機制現(xiàn)仍尚未完全明確[2]。在我國RA患者較多，發(fā)病率為0.32%～0.36%[3-4]。黃健等[5]研究表明，超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是機體清除含氧自由基的主要酶系之一，其活力反映機體清除氧自由基的能力。多數(shù)RA患者病變過程中在關(guān)節(jié)腔內(nèi)出現(xiàn)一種特征性的病理產(chǎn)物-血管翳，從而引起血管內(nèi)皮損傷。血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷時，會釋放其獨特內(nèi)容物-血管性血友病因子(von willebrand factor，vWF)，其血清濃度升高可視為內(nèi)皮細(xì)胞損傷的標(biāo)志[6]，C反應(yīng)蛋白(CRP)、血清類風(fēng)濕因子(RF)是臨床常用的判斷RA疾病活動與否的重要指標(biāo)[7]。本研究旨在探討RA患者血清SOD與vWF的水平變化，并結(jié)合RF和CRP進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年10月—2013年2月貴陽醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院門診和住院病房確診為RA的患者55例作為RA組，其中男17例，女38例；年齡24～76歲，平均(51.3±14.0)歲?；颊呔?009年美國風(fēng)濕病學(xué)會(ACR)和歐洲抗風(fēng)濕聯(lián)盟(EULAR)共同發(fā)布的RA分類標(biāo)準(zhǔn)[8]。另選取同期在本院體檢健康者30例作為對照組，其中男10例，女20例；年齡23～71歲，平均(49.1±13.7)歲。兩組受試者性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.053，t=0.698，P>0.05)。

1.2 主要試劑和儀器 SOD檢測試劑盒，由上海裕平生物科技有限公司提供；vWF檢測試劑盒，由上海裕平生物科技有限公司提供；RF檢測試劑盒，由美國貝克曼庫爾特商貿(mào)(中國)有限公司提供；CRP檢測試劑盒，由上?？迫A生物工程股份有限公司提供；BIO-RAD XMark全波長酶標(biāo)儀，由上海創(chuàng)萌生物科技有限公司提供；臺式低速離心機，由上海醫(yī)療器械廠提供。

1.3 方法 于清晨空腹、安靜狀態(tài)下，采集兩組受試者靜脈血5 ml，以3 000 r/min離心5 min，離心半徑為10 cm，置于-20 ℃冰箱中保存。血清RF檢測采用免疫散射比濁法，CRP檢測采用免疫速率散射比濁法，血清SOD和vWF檢測均采用生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，均嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清SOD和vWF比較 對照組血清SOD高于RA組，vWF低于RA組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表1)。

Table1 Comparison of serum SOD and vWF between the two groups

組別例數(shù)SOD(μg/L)vWF(ng/L)對照組30169.8±53.1691.4±246.4RA組55129.6±27.61134.1±490.7t值3.8685.532P值<0.05<0.05

注：SOD=超氧化物歧化酶，vWF=血管性血友病因子

2.2 RA組血清RF和CRP檢測結(jié)果 RA組患者中RF陽性42例(76.4%)，陰性13例(23.6%)；CRP陽性32例(58.2%)，陰性23例(41.8%)。

2.3 RF陽性與陰性者血清SOD和vWF比較 RF陽性與陰性者血清SOD和vWF比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表2)。

Table2 Comparison of serum SOD and vWF between the RF positive and RF negative RA patients

例數(shù)SOD(μg/L)vWF(ng/L)RF陽性42126.0±28.31179.4±518.1RF陰性13134.4±14.1987.8±368.9t值1.4291.475P值>0.05>0.05

注：RF=血清類風(fēng)濕因子

2.4 CRP陽性與陰性者血清SOD和vWF比較 CRP陽性與陰性者血清SOD比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；CRP陽性者血清vWF高于CRP陰性者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表3)。

2.5 相關(guān)性分析 RA患者血清SOD與vWF、RF、CRP均無直線相關(guān)關(guān)系(r=0.090、-0.072、-0.032，P>0.05)；血清vWF與SOD、RF均無直線相關(guān)關(guān)系(r=-0.064、0.040，P>0.05)，與CRP呈正相關(guān)(r=0.529，P<0.05)。

Table3 Comparison of serum SOD and vWF between the CRP positive and CRP negative RA patients

例數(shù)SOD(μg/L)vWF(ng/L)CRP陽性32128.2±22.71288.3±500.6CRP陰性23131.6±29.9934.9±406.2t值0.0802.961P值>0.05<0.05

3 討論

RA是一種常見的系統(tǒng)性、慢性自身免疫性疾病，通常以滑膜炎癥、血管翳形成及關(guān)節(jié)損傷為主要病理特征，其病因至今尚不完全清楚?？讘c勝等[9]研究顯示，RA患者的發(fā)病機制與氧化應(yīng)激密切相關(guān)。正常生理情況下，體內(nèi)存在有效的抗氧化防御體系，使氧化物質(zhì)的產(chǎn)生與清除保持動態(tài)平衡[10]，一旦平衡被打破，就會使細(xì)胞內(nèi)蓄積氧化性物質(zhì)而引發(fā)氧化反應(yīng)[11]。SOD是一種抗氧化類物質(zhì)，可清除人體內(nèi)含氧自由基，其活性高低反映機體清除自由基能力的強弱，是機體清除氧自由基、發(fā)揮抗氧化作用及自由基破壞的敏感指標(biāo)[12]。本研究結(jié)果顯示，與對照組相比，RA組血清SOD降低，與陳晗等[13]研究結(jié)果相符，提示RA患者體內(nèi)抗氧化能力減弱。氧化應(yīng)激可以促進(jìn)活性氧簇和活性氮簇的產(chǎn)生，其可作為信使分子參與調(diào)節(jié)基因表達(dá)等生理病理過程，進(jìn)而促進(jìn)對內(nèi)皮細(xì)胞的損傷[14]。內(nèi)皮受損可釋放大量的活性物質(zhì)，如vWF、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素1(ET-1)等，其中vWF是反映血管內(nèi)皮受損的重要指標(biāo)[7]。vWF主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成，具有內(nèi)皮特異性及良好穩(wěn)定性，因此其變化可反映內(nèi)皮細(xì)胞損傷、異?；罨蚬δ苷系K[15]。王艷嬌等[16]研究結(jié)果顯示，當(dāng)血管內(nèi)皮損傷時，vWF合成釋放增多。本研究結(jié)果顯示，RA組血清vWF高于對照組，提示RA在發(fā)生發(fā)展過程中可能存在血管內(nèi)皮損傷。

CRP、RF是臨床常用的判斷RA疾病活動與否的重要指標(biāo)，RF在RA患者中的檢出率很高，RF陽性支持早期RA的傾向性診斷。Rojas-Villarraga等[17]報道，無論任何時期發(fā)病的RA患者均發(fā)現(xiàn)有內(nèi)皮功能紊亂，并且其證明血清RF陽性與內(nèi)皮功能紊亂有明顯的關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，RF陽性與陰性RA患者相比，血清vWF、SOD無差異，可能與RF陰性樣本量過少有關(guān)，可進(jìn)一步增大樣本量進(jìn)行探究。CRP是一種急性時相反應(yīng)蛋白，其在炎癥開始數(shù)小時即可升高，能較好地反映RA疾病活動與否。CRP陽性與陰性RA患者相比，血清SOD間無差異，而vWF顯著升高。且RA患者血清SOD與vWF、RF、CRP及 vWF與SOD、RF均無直線相關(guān)關(guān)系，僅vWF與CRP呈正相關(guān)，與王昌富等[18]研究相符，提示vWF水平與病情的急性期反應(yīng)有關(guān)。

蘇敏等[7]研究發(fā)現(xiàn)，RA患者均存在血管內(nèi)皮功能失調(diào)，與機體氧化應(yīng)激水平有關(guān)，氧化應(yīng)激水平升高，活性氧在體內(nèi)蓄積，可直接由于內(nèi)皮細(xì)胞毒性作用造成血管內(nèi)皮功能障礙并啟動動脈粥樣硬化進(jìn)程。同時，活化的內(nèi)皮細(xì)胞也產(chǎn)生大量活性氧，加重氧化應(yīng)激狀態(tài)，最終導(dǎo)致內(nèi)皮損傷和內(nèi)皮障礙[19]。綜上所述，RA患者體內(nèi)抗氧化能力減弱，且可能存在血管內(nèi)皮損傷。而RA患者氧化應(yīng)激反應(yīng)、血管內(nèi)皮功能及二者之間的關(guān)系，仍需在本研究基礎(chǔ)上結(jié)合RA患者的病情、病程、并發(fā)癥及臨床治療方案等因素，擴大樣本量、增加檢測指標(biāo)作進(jìn)一步研究。

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