新橙皮苷二氫查爾酮的高效液相色譜檢測方法

鄧 虹，趙華修，代 勇，劉晉渝

（成都大帝漢克生物科技有限公司，成都 611130）

新橙皮苷二氫查爾酮的高效液相色譜檢測方法

鄧 虹，趙華修，代 勇，劉晉渝

（成都大帝漢克生物科技有限公司，成都 611130）

建立高效液相色譜法分析新橙皮苷二氫查爾酮。色譜柱為美國Zorbax Eclipse XDB-C18（4.6×150 mm，5 um），甲醇-水（60∶40，體積比）洗脫溶劑，流速1 mL·min-1，柱溫30℃，檢測波長282 nm，新橙皮苷二氫查爾酮平均回收率為99.56%，RSD=1.04%（n=5）。結果表明，該方法準確、簡單、出峰快，可作為新橙皮苷二氫查爾酮的高效液相色譜新檢測方法。

新橙皮苷二氫查爾酮；高效液相色譜法；檢測方法

新橙皮苷二氫查爾酮（NHDC）是一種從天然柑橘植物中提取得到的新橙皮苷經(jīng)氫化而成的新型甜味劑，具有甜度高、口感好、余味持久、低熱量、無毒、穩(wěn)定性好等特點，是目前最引人注目的新型甜味劑和苦味屏蔽劑，廣泛應用于食品工業(yè)及飼料工業(yè)中[1-5]。目前，飼料工業(yè)主要用高效液相色譜法檢測NHDC[6-7]。其靈敏度高，方法可靠，但所采用洗脫劑為乙腈-水，保留時間太長，本文建立了一種新的HPLC檢測方法，可以更加快速、準確的檢測NHDC的含量。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

新橙皮苷二氫查爾酮（純度＞97%）由湖南康麓生物科技有限公司提供。NHDC標準品購于迪馬科技，色譜級甲醇購于迪馬科技，重蒸水為自制。試驗儀器為分析天平（感量0.1 mg）和美國Agient1200高效液相色譜儀（具VWD檢測器）。

1.2 高效液相色譜參考條件

色譜柱為Zorbax Eclipse XDB-C18（4.6×150 mm，5 um），流動相為甲醇∶水=60∶40（體積比），流動相流速1 mL·min-1，檢測波長282 nm，進樣量20 μL，柱溫30℃。

1.3 試驗方法

1.3.1 標準品的制備

準確稱取新橙皮苷二氫查爾酮標準樣品10 mg，置于100 mL的容量瓶中，用50%甲醇稀釋到刻度，混勻。該溶液應現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.3.2 樣品溶液的制備

稱取新橙皮苷二氫查爾酮樣品5～10 mg，置于100 mL的容量瓶中，用50%甲醇稀釋，混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.3.3 回收率試驗

分別吸取1.3.2中樣品溶液10 mL于5個100 mL容量瓶中，分別加入標準品1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mg，溶解，50%甲醇定容，精密吸取20 μL進樣。

2 試驗結果

2.1 色譜結果

標準品及樣品對照的色譜圖見附圖，保留時間約為3.8 min。

2.2 回收率試驗

回收率試驗結果見附表。

由附表可知，平均回收率為99.56%，RSD= 1.04%（n=5）。

附圖標準品A與樣品B的高效液相色譜圖

附表回收率試驗結果

3 討論

本試驗檢測波長為282 nm，這是NHDC的最大吸收波長[8]。此波長與文獻報道的NHDC吸收波長一致，282 nm即為NHDC的特征吸收波長[9]。NHDC具有極佳的改善口味的功效，本品可用于食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)以及飼料工業(yè)中作甜味劑（或矯味劑），在香精香料中具有極好的用途[10-15]。動物口糧中添加該種復配甜味料產(chǎn)品，能改善飼料的風味和適口性，甜味料中的NHDC及香草的香味作用掩蓋和改善了日糧中某些成分（如某些蛋白原料、維生素、金屬離子以及一些藥物成分等）帶來的不良苦澀味，從而增進幼畜的食欲，促進生長。

試驗采用甲醇代替乙腈作為洗脫溶劑，價格便宜，毒性小，出峰也快，縮短保留時間；NHDC不能很快的溶于水，與徐國波等試驗相比，本試驗采用50%的甲醇作為溶劑，溶解樣品更快更徹底，試驗誤差也相對縮小，為高效液相色譜檢測NHDC提供了新的快速準確的檢測方法[1]。

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Determination of Neohesperidin Dihydrochalcone by HPLC

DENG Hong,ZHAO Huaxiu,DAI Yong,LIU Jinyu

（Chengdu DadHank Biotech Co.,Ltd.,Chengdu 611130,China）

To establish a method for the determination of Neohesperidin Dihydrochalcone by HPLC.The Ameri?ca Zorbax Eclipse XDB-C18 column(4.6×150 mm,5 um)was used with the mobile phase constituted of methanol wa?ter(60∶40,volume ration)at the flow rate of 1.0 mL·min-1,and the column temperature was 30℃,the UV detection wavelength was 282 nm.The average recovery was 99.56%,RSD=1.04%(n=5).The results showed that,this method is accurate,simple,rapid,andcanbe usedfornewdetectingtheNeohesperidinDihydrochalconeby HPLC.

Neohesperidin Dihydrochalcone;HPLC;detection method

O657.7；657.7+2

A

1001-0084（2014）08-0052-03

2014-03-31

鄧虹（1982-），女，四川華鎣市，工程師，主要從事飼料調(diào)味劑的液相色譜檢測工作。