補(bǔ)腎通督膠囊對(duì)RA患者Th17/Treg平衡影響的研究

朱陽(yáng)春王英旭林 琳侯麗萍

（1北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京，100029；2太原市類風(fēng)濕病醫(yī)院，山西，030060）

臨床研究

補(bǔ)腎通督膠囊對(duì)RA患者Th17/Treg平衡影響的研究

朱陽(yáng)春1王英旭2林 琳1侯麗萍1

（1北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京，100029；2太原市類風(fēng)濕病醫(yī)院，山西，030060）

目的：觀察補(bǔ)腎通督膠囊對(duì)腎虛寒凝型類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者外周血Th17/Treg細(xì)胞及血清白細(xì)胞介素17A（IL-17A）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）、IL-10的影響。方法：入選類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者隨機(jī)雙盲分為治療組（36例）和對(duì)照組（35例），治療組口服補(bǔ)腎通督膠囊，對(duì)照組口服雷公藤多苷片，均服藥12周，采用流式細(xì)胞術(shù)觀察比較治療前后兩組患者外周血Th17/Treg及采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）觀察血清IL-17A、TGF-β1、IL-10的變化。結(jié)果：治療后兩組與各自治療前相比，Th17及Th17/Treg顯著降低（P＜0.01），Treg顯著升高（P＜0.01）；治療后兩組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后兩組與各自組治療前相比，IL-17A顯著降低（P＜0.01），TGF-β1、IL-10顯著升高（P＜0.01）；治療后兩組間比較，治療組TGF-β1與IL-10升高更加明顯（P＜0.01），IL-17A無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：補(bǔ)腎通督膠囊可以明顯降低腎虛寒凝型類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者外周血Th17/Treg水平，降低血清IL-17A含量，而使血清TGF-β1、IL-10含量升高。

補(bǔ)腎通督膠囊；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；Th17/Treg；IL-17A；TGF-β1；IL-10

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是一種慢性、進(jìn)行性、系統(tǒng)性自身免疫病，以對(duì)稱性的外周關(guān)節(jié)持續(xù)性滑膜炎為主要特征，我國(guó)初步調(diào)查該病發(fā)病率約為0.32%～0.36%[1]。RA的發(fā)病機(jī)制尚未全完清晰，其癥狀與病情的進(jìn)展與免疫失衡密切相關(guān)，主要表現(xiàn)為T(mén)h1/Th2比例失衡。隨著對(duì)RA發(fā)病機(jī)制的不斷深入研究發(fā)現(xiàn)Th17/Treg免疫失衡導(dǎo)致了持續(xù)的局部關(guān)節(jié)炎癥，造成對(duì)骨及軟骨的侵襲破壞，最后導(dǎo)致關(guān)節(jié)強(qiáng)直、畸形、功能喪失[2]。輔助性T細(xì)胞17（T help cell 17，Th17）主要功能為介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，通過(guò)釋放白細(xì)胞介素17（IL-17）、白介素22（IL-22）等細(xì)胞因子，吸引炎性趨化因子和致炎因子聚集在正常細(xì)胞周?chē)鶾3]，IL-17還可以與其他致炎信號(hào)分子協(xié)同作用，增強(qiáng)致炎效應(yīng)[4]。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Regulatory Tcell，Treg）是一類特意性表達(dá)叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子家族蛋白3（Forkhead box protein 3，F(xiàn)oxp3），包括天然的T調(diào)節(jié)細(xì)胞和可誘導(dǎo)的T調(diào)節(jié)細(xì)胞。天然Treg的抑制機(jī)制主要是細(xì)胞接觸依賴性及細(xì)胞因子非依賴性，而獲得性Treg的抑制機(jī)制不依賴于細(xì)胞間接觸而是依賴細(xì)胞因子的作用[5]，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）、IL-10等途徑發(fā)揮抑炎和維持自身免疫耐受的作用[6]。CD4+CD25+Treg屬于天然調(diào)節(jié)T細(xì)胞，而Tr1和Th3屬于獲得性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞[7]。與正常人相比，RA患者外周血CD4+T細(xì)胞中，Th17比率上升，而Foxp3+CD+CD25+Treg細(xì)胞比率降低，Th17/Treg細(xì)胞免疫失衡，向Th17方向偏移[8]。本文從分子水平出發(fā)，探討了補(bǔ)腎通督膠囊對(duì)中醫(yī)辨證屬腎虛寒凝型的RA患者外周血Th17/Treg細(xì)胞及分泌的細(xì)胞因子的影響。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集2012年11月至2013年9月太原類風(fēng)濕病醫(yī)院符合納入標(biāo)準(zhǔn)的RA患者。根據(jù)隨機(jī)數(shù)表，按1∶1比例隨機(jī)雙盲分為補(bǔ)腎通督膠囊治療組和雷公藤多苷片對(duì)照組，共收入患者74例，脫落3例，最終完成71例。治療組36例，男性8例，女性28例；年齡28～65歲，平均（54.08±8.25）歲；病程18～335個(gè)月，平均（106.00±83.44）個(gè)月。對(duì)照組35例，男性8例，女性27例；年齡24～63歲，平均（51.23±9.83）歲；病程24～300個(gè)月，平均（119.47±88.43）個(gè)月。兩組性別、年齡、病程經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)及歐洲抗風(fēng)濕聯(lián)盟2010年共同制定的《類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷及治療指南》[9]，中醫(yī)診斷及辨證分型標(biāo)準(zhǔn)參照2008年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)《中醫(yī)內(nèi)科常見(jiàn)病診療指南·中醫(yī)病證部分》[10]及參照1994年國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[11]中尪痹的腎虛寒凝型。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) 年齡在18～65周歲之間，符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)及歐洲抗風(fēng)濕聯(lián)盟2010年RA診斷標(biāo)準(zhǔn)，X線分期處于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期，中醫(yī)辨證為腎虛寒凝型。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) 1）目前正在參加或在本研究前1個(gè)月內(nèi)參加過(guò)其他治療RA臨床研究。2）近期準(zhǔn)備生育，或處于孕期或哺乳期女性。3）長(zhǎng)期服用糖皮質(zhì)激素治療RA，且在本研究前至少1個(gè)月內(nèi)未停用藥物。4）合并有心血管、肺部、肝臟、腎臟、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病。5）重疊其他風(fēng)濕病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、嚴(yán)重的膝骨關(guān)節(jié)炎等。6）合并嚴(yán)重關(guān)節(jié)外表現(xiàn)如高熱不退、間質(zhì)性肺炎、腎臟淀粉樣變、縮窄性心包炎、中樞神經(jīng)系統(tǒng)血管炎等，需要使用糖皮質(zhì)激素治療。7）伴有活動(dòng)性胃腸道疾病，或本項(xiàng)研究前30 d內(nèi)有食物或消化道潰瘍。

1.5 脫落標(biāo)準(zhǔn) 1）患者依從性差，中途停止治療者；2）發(fā)生嚴(yán)重并發(fā)癥，研究無(wú)法繼續(xù)者；3）病情嚴(yán)重惡化，必須采用其他治療者；4）受試者不能堅(jiān)持治療者。

2 方法

2.1 治療方法 治療組口服補(bǔ)腎通督膠囊（太原市類風(fēng)濕病醫(yī)院院內(nèi)制劑，藥物組成：熟地黃、鹿角、肉桂、芥子、制馬錢(qián)子、麻黃），3次/d，3粒/次，飯后溫水送服；對(duì)照組口服雷公藤多苷片，3次/d，1片/次，飯后溫水送服。兩組療程均為12周。

2.2 檢測(cè)方法 兩組患者在用藥前及用藥12周后，于清晨空腹抽取外周血15 mL，其中10 mL加入肝素鈉抗凝管中，使用淋巴細(xì)胞分離液分離外周血淋巴細(xì)胞后，置于1 640培養(yǎng)液、胎牛血清和刺激劑中培養(yǎng)4 h，平均分成2份，分別按試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行破膜和固定，一份過(guò)程中加入PerCP-Cy5.5-CD4抗體、PE-IL-17A抗體；另一份過(guò)程中加入FITC-CD4抗體、APC-CD25抗體、PE-FoxP3抗體。之后分別使用BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀檢測(cè)其熒光反應(yīng)，采用BD Cell Quest軟件分析測(cè)定Th17/Treg的比值；另5 m L加入2%乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝，離心后收集血清，-80℃保存。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)IL-17A、TGF-β1、IL-10含量。

2.3 主要試劑及實(shí)驗(yàn)儀器 BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀（BD，美國(guó)）；酶標(biāo)儀DENLEY DRAGON Wellscan MK 2（Thermo，芬蘭）使用Ascent software for Multiskan軟件進(jìn)行分析；洗板機(jī)為Wellwash 4 MK2（Thermo，芬蘭）。

牛的II型膠原（Sigma，美國(guó)）；人淋巴細(xì)胞分離液（天津市灝洋生物制品科技有限責(zé)任公司）；PerCPCy5.5-CD4抗體（BD，美國(guó)）；PE-IL-17A抗體（BD，美國(guó)）；FITC-CD4抗體（BD，美國(guó)）；APC-CD25抗體（BD，美國(guó)）；PE-FoxP3抗體（BD，美國(guó)）；IL-17A、TGF-β1、IL-10酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒（山西普興生化有限公司）。

2.4 統(tǒng)計(jì)方法 應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有結(jié)果均以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血Th17/Treg 治療后兩組與各自治療前相比，Th17及Th17/Treg顯著降低（P＜0.01），Treg顯著升高（P＜0.01）；治療后兩組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 兩組治療前后Th17/Treg細(xì)胞在CD4+T細(xì)胞中的表達(dá)情況（±s）

表1 兩組治療前后Th17/Treg細(xì)胞在CD4+T細(xì)胞中的表達(dá)情況（±s）

注：與本組治療前比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

組別例數(shù)例時(shí)間Th17（CD4+ IL-17A+，%）Treg（CD4+CD25 +FoxP3+，%）Th17/Treg治療組36治療前3.74±1.521.21±1.605.13±2.68治療后2.07±1.76**4.47±2.81**0.89±0.99**對(duì)照組35治療前3.81±1.801.16±1.595.40±3.83治療后2.49±2.00**3.68±2.86**1.38±2.25**

圖1 兩組治療前后Th17/Treg在CD4+T細(xì)胞中的表達(dá)情況

圖2 治療組Th17/Treg的典型圖例

3.2 ELISA檢測(cè)血清IL-17A、TGF-β1、IL-10 治療后兩組與各自組治療前相比，IL-17A顯著降低（P＜0.01），TGF-β1、IL-10顯著升高（P＜0.01）；治療后兩組間比較，治療組TGF-β1與IL-10升高更加明顯（P＜0.01），IL-17A無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 兩組治療前后血清IL-17A、TGF-β1、IL-10含量（±s）

表2 兩組治療前后血清IL-17A、TGF-β1、IL-10含量（±s）

注：與本組治療前比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與對(duì)照組治療后比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

組別例數(shù)時(shí)間IL-17A（pg/mL）TGF-β1（pg/mL）IL-10（pg/mL）治療組36治療前34.78±3.8117.94±1.2417.15±2.51治療后20.14±3.80**28.15±4.70**△△24.69±4.00**△△對(duì)照組35治療前34.94±2.9618.35±1.1217.62±4.05治療后21.61±2.71**25.15±2.21**21.49±2.47**

4 討論

RA是一種以慢性的自身免疫性疾病，其主要病理改變?yōu)殛P(guān)節(jié)滑膜的慢性炎性反應(yīng)，造成骨、軟骨及關(guān)節(jié)周?chē)M織的破壞。RA發(fā)病率居自身免疫性疾病的首位[12]，未經(jīng)治療的RA患者2年致殘率達(dá)50%，3年致殘率達(dá)70%，大約有一半的RA患者最終因致殘喪失勞動(dòng)能力[13]。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)RA的發(fā)病機(jī)制尚未明確，一般認(rèn)為是感染引起的遺傳易感個(gè)體的自身免疫反應(yīng)。Th17細(xì)胞亞群是介導(dǎo)自身免疫性疾病的中藥群體。Th17細(xì)胞分化并且產(chǎn)生的IL-17是一種強(qiáng)大的前炎性細(xì)胞因子，可以誘導(dǎo)RA患者核因子κB受體活化因子配體（RANKL）表達(dá)，誘導(dǎo)破骨細(xì)胞祖細(xì)胞向成熟破骨細(xì)胞分化，使破骨增加而成骨減少，造成對(duì)關(guān)節(jié)骨與軟骨的侵蝕破壞[14]；還可以產(chǎn)生IL-17F/IL-17A蛋白異二聚體，從而促使T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答[15]。可誘導(dǎo)的T調(diào)節(jié)細(xì)胞一種在TGF-β1的誘導(dǎo)下，分化為表達(dá)Foxp3的Treg，另一種不表達(dá)Foxp3，形成以IL-10高表達(dá)為標(biāo)志的Treg細(xì)胞[16]。IL-10能夠抑制促炎性細(xì)胞因子如TNF-α、IL-6、IFN-γ的生成，可以明顯延緩滑膜炎性反應(yīng)的進(jìn)展[17]。TGF-β1在低濃度時(shí)與IL-6協(xié)同作用，促進(jìn)Th17的分化[18]；在高濃度狀態(tài)下上調(diào)Foxp3的表達(dá)，促進(jìn)Treg細(xì)胞的產(chǎn)生，抑制炎性反應(yīng)形成并防止自身免疫性疾病的產(chǎn)生[19]。有研究表明，在RA發(fā)病時(shí)，血液中的TGF-β1可以游離至組織中，使血液中TGF-β1降低[20]?？梢?jiàn)Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞在分化上具有相互排斥的信號(hào)通路，在功能上相互抑制，Th17/Treg細(xì)胞比率的平衡對(duì)維持正常免疫應(yīng)答及防止自身免疫具有重要意義。

補(bǔ)腎通督膠囊是由陽(yáng)和湯化裁而來(lái)，主要成分為熟地黃、鹿角膠、肉桂、芥子、制馬錢(qián)子、麻黃等。全方辛散滋補(bǔ)同伍，通中有補(bǔ)，扶正與祛邪兼顧，以達(dá)到補(bǔ)腎通督、化瘀散結(jié)消腫的作用。從藥理學(xué)方面分析，本方具有較好的消炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)和改善骨破壞的作用。方中熟地黃可以提高免疫器官的增長(zhǎng)指數(shù)，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力[21]；鹿角膠可以顯著增加成骨細(xì)胞數(shù)量，降低骨轉(zhuǎn)化，提高骨質(zhì)量[22]；馬錢(qián)子具有顯著的鎮(zhèn)痛消炎作用，還可以對(duì)免疫功能進(jìn)行雙向調(diào)節(jié)[23]。前期的研究顯示補(bǔ)腎通督膠囊對(duì)于中醫(yī)辨證屬于腎虛寒凝型的RA有著確切的臨床療效[24]。腎虛寒凝型RA為臨床常見(jiàn)證型，主要表現(xiàn)為關(guān)節(jié)疼痛腫脹，晨僵，活動(dòng)不利，畏寒怕冷，神倦懶動(dòng)，腰背酸痛，俯仰不利，天氣寒冷加重，舌淡胖，苔白滑，脈沉細(xì)。

本研究表明，補(bǔ)腎通督膠囊可以明顯降低RA患者外周血Th17細(xì)胞比率（P＜0.01），而使Treg細(xì)胞升高（P＜0.01），使Th17/Treg向Treg方向偏移，糾正RA患者的免疫偏移。在Th17/Treg的調(diào)節(jié)上，與對(duì)照組雷公藤多苷片相比較，沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在細(xì)胞因子調(diào)節(jié)方面，可以使血清中的IL-17A濃度顯著降低，而TGF-β和IL-10顯著升高（P＜0.01）；與對(duì)照組相比，使TGF-β和IL-10升高的作用要明顯優(yōu)于雷公藤多苷片（P＜0.01），而IL-17A的調(diào)節(jié)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究的對(duì)照組藥物雷公藤多苷片是緩解RA病情的有效藥物，其主要成分為雷公藤甲素，具有抗炎、免疫抑制、糖皮質(zhì)激素樣作用作用[25]，可以改善RA患者的病情。但是雷公藤多苷片的有效成分，也是它的毒性成分，容易發(fā)生不良反應(yīng)。2012年4月國(guó)家藥品不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)中心公布了2004年至2011年9月雷公藤片不良反應(yīng)病例報(bào)告201例，其中嚴(yán)重者19例（9.5%），主要表現(xiàn)為藥物性肝炎、肝腎功能異常、腎衰竭、胃出血、白細(xì)胞減少、血小板減少、閉經(jīng)等[26]。雷公藤多苷片，對(duì)于RA病情的控制療效確切，但不宜耐受且不能長(zhǎng)期應(yīng)用，在應(yīng)用上有明顯的局限性。

以Th17/Treg為靶點(diǎn)研究RA越來(lái)越受到人們的關(guān)注，但目前此類研究大多圍繞動(dòng)物模型展開(kāi)。而本項(xiàng)研究表明，補(bǔ)腎通督膠囊在調(diào)節(jié)Th17/Treg方面與雷公藤多苷片沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，對(duì)于個(gè)別相關(guān)細(xì)胞因子的作用甚至更有優(yōu)勢(shì)，而且安全性更高，在治療腎虛寒凝型RA上有一定的優(yōu)勢(shì)，有著更廣闊的開(kāi)發(fā)空間，是中醫(yī)藥在治療RA方面的重要應(yīng)用，但其作用機(jī)制與有效靶點(diǎn)有待于進(jìn)一步深入研究。

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì).類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診治指南（草案）[S].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2003，7（4）：250.

[2]Mai J，Wang H，Yang XF.Th 17 cells interplay with Foxp3+Tregs in regulation of inflammation and autoimmunity[J].Front Biosci（Landmark Ed），2010 Jun 1，（15）：986-1006.

[3]Figueroa-Vega N，Alfonso-Pérez M，et al.Increased circulating proinflammatory cytokines and Th17 lymphocytes in Hashimoto＇s thyroiditis[J].JClin Endocrinol Metab，2010 Feb，95（2）：953-62.

[4]Kolls JK，Lindén A.Interleukin-17 family members and inflammation[J].Immunity，2004 Oct，21（4）：467-76.

[5]Lawson C A，Brown A K，Bejarano V，et al.Early rheumatoid arthritis is associated with a deficit in the CD4+CD25high regulatory T cell population in peripheral blood[J].Rheumatology，2006，45（10）：1210-1217.

[6]Lawson C A，Brown A K，Bejarano V，et al.Early rheumatoid arthritis is associated with a deficit in the CD4+CD25high regulatory T cell population in peripheral blood[J].Rheumatology，2006，45（10）：1210-1217.

[7]Lawson C A，Brown A K，Bejarano V，et al.Early rheumatoid arthritis is associated with a deficit in the CD4+CD25high regulatory T cell population in peripheral blood[J].Rheumatology，2006，45（10）：1210-1217.

[8]牛倩，黃卓春，蔡蓓，等.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者外周血Th17/Treg細(xì)胞比率失衡的研究[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2010（003）：267-269.

[9]Daniel Aletaha，Tuhina Neogi，et，al.2010 Rheumatoid Arthritis Classification Criteria[J].Arthritis＆Rheumatism，2010，62：2569-2581.

[10]中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì).中醫(yī)內(nèi)科常見(jiàn)病診療指南·中醫(yī)病證部分[S].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2008，129-131.

[11]國(guó)家中醫(yī)藥管理局.中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)[S].北京：1994，47.

[12]張品南，陳艷梅.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2008，2（11）：59-61.

[13]Rugiene R，DadonieneJ，Venalis A，et al.Comparison of health-related quality of life between patients with rheumatic diseases and a control group[J].Medicina，2005，41（7）：561-565.

[14]秦霞，劉鐘濱.白細(xì)胞介素17家族[J].同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2003，24（6）：519-522.

[15]Wright JF，Guo Y，Quazi A，et al.Identification of an interleukin 17F/17A heterodimer in activated human CD4+T cells[J].Journal of Biological Chemistry，2007，282（18）：13447-13455.

[16]牛磊，蔣瑾瑾.Th1/Th2，Th17/Treg平衡與幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎[J].臨床兒科雜志，2010，28（011）：1095-1098.

[17]Jiang JL，Peng Y P，Qiu Y H，et al.Adrenoreceptor-coupled signaltransduction mechanismsmediating lymphocyte apoptosis induced by endogenous catecholamines[J].Journal of neuroimmunology，2009，213（1）：100-111.

[18]Laurence A，Tato CM，Davidson T S，et al.Interleukin-2 signaling via STAT5 constrains T helper 17 cell generation[J].Immunity，2007，26（3）：371-381.

[19]Weaver C T，Hatton R D.Interplay between the TH17 and TReg cell lineages：a（co-）evolutionary perspective[J].Nature Reviews Immunology，2009，9（12）：883-889.

[20]萬(wàn)磊，劉健，黃傳兵，等.新風(fēng)膠囊對(duì)佐劑關(guān)節(jié)炎大鼠肺功能及Treg，F(xiàn)oxp3，TGF-β1/Smads的作用[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2013，42（4）：418-425.

[21]李佳，程井軍，劉洋洋.原花青素與熟地對(duì)小鼠免疫功能的影響[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥雜志，2010，19（11）：26-27.

[22]蒙海燕，曲曉波，李娜，等.鹿茸及鹿角膠對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥的影響[J].中藥材，2009，2（2）：179-182.

[23]王立杰，蔡寶昌，陳軍，等.馬錢(qián)子堿對(duì)小鼠免疫功能的影響[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2008，22（6）：42-44.

[24]周曉莉，劉秀峰，王英旭，等.補(bǔ)腎通督膠囊治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎42例療效觀察[J].山西中醫(yī)，2012，28（2）：21-23.

[25]李德平，翟華強(qiáng)，曹煒，等.雷公藤的藥性文獻(xiàn)回顧及其作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（13）：299-303.

[26]肖廷超，朱必越.雷公藤片的臨床應(yīng)用及不良反應(yīng)文獻(xiàn)分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2013，42（9）：1007-1009.

（2013-11-27收稿 責(zé)任編輯：曹柏）

Study on Effect of Bushen Tongdu capsule on Peripheral Th17/Treg Ratio of Patients with Rheumatoid A rthritis

Zhu Yangchun1，Wang Yingxu2，Lin Lin1，Hou Liping1
（Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China；2 Taiyuan city class rheumatism hospital，Shanxi030060，China）

Objective：To investigate the effectof Bushen Tongdu capsule on peripheral Th17/Treg ratio and serum IL-17A，TGF-β1 and IL-10 of patients with rheumatoid arthritis（RA）.Methods：RA patients were divided randomly and double-blinded into treatment group（n＝36）that were treated with Bushen Tongdu capsules and control group（n＝35）that were treated with Tripterygium glycosides tablets.Patients in both groups were treated for12 weeks.The changes of peripheral blood Th17/Treg ratio and serum IL-17A，TGF-β1 and IL-10 were observed by flow cytometry and ELISA in patients of both teams before and after the treatments.Results：After treatments，Peripheral Th 17%，Th17/Treg ratio significantly decreased and Treg%significantly evaluated（P＜0.01）in both groups，and there was no statistically significant difference between the two groups after the treatments（P＞0.05）.After treatments，the level of serum IL-17A significantly decreased，and TGF-β1 and IL-10 significantly evaluated in both groups（P＜0.01）.Comparing the two groups，TGF-β1 and IL-10 evaluated more in treatment group（P＜0.01），while there was no statistically significant difference between the two groups on the changes of IL-17A（P＞0.05）.Conclusion：Bushen Tongdu capsule can reduce RA patients｀peripheral Th17/Treg ratio and serum IL-17A content，and it also can evaluate serum TGF-β1 and IL-10 content.

Bushen Tongdu capsule；Rheumatoid arthritis；Th17/Treg；IL-17A；TGF-β1；IL-10

R255.9；R259

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2014.04.013

山西省科技攻關(guān)項(xiàng)目（編號(hào)：20120313025-8）

侯麗萍，Tel：13681214238，E-mail：houli＿ping＠163.com