楊梅種質(zhì)資源對(duì)凋萎病抗性評(píng)價(jià)

張振蘭，朱瀟婷，任海英，戚行江*，鄭錫良，梁森苗，顏麗菊

（1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所，浙江杭州 310021；2.臨海市特產(chǎn)技術(shù)推廣總站，浙江臨海 317000）

楊梅種質(zhì)資源對(duì)凋萎病抗性評(píng)價(jià)

張振蘭1，朱瀟婷2，任海英1，戚行江1*，鄭錫良1，梁森苗1，顏麗菊2

（1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所，浙江杭州 310021；2.臨海市特產(chǎn)技術(shù)推廣總站，浙江臨海 317000）

為了解部分楊梅種質(zhì)資源對(duì)凋萎病的抗性情況，利用2個(gè)不同種的凋萎病菌株，對(duì)32份楊梅種質(zhì)資源進(jìn)行枝條離體接種鑒定。結(jié)果表明，接種后不同種質(zhì)資源的發(fā)病率和嚴(yán)重度均表現(xiàn)出豐富的多樣性。62.5%的紅梅類(lèi)和28.57%的烏梅類(lèi)種質(zhì)材料具有高抗病性。楊梅種質(zhì)材料對(duì)病菌越敏感，一般潛伏期越短，發(fā)病率越高。高感品種3～8 d就表現(xiàn)出嚴(yán)重病癥，高抗品種大多數(shù)超過(guò)10 d才有輕微癥狀出現(xiàn)。綜合評(píng)價(jià)臨海苗圃?xún)?nèi)的種質(zhì)材料，高抗凋萎病的有紅梅類(lèi)的深紅種、安海變種、桃紅、松山大野、松山水梅、大葉早、涌泉1號(hào)、涌泉3號(hào)等8個(gè)，烏梅類(lèi)的硬絲安海變、黑瑞林等2個(gè)，上虞水晶楊梅以及1個(gè)開(kāi)紅花的雄株。

楊梅種質(zhì)資源；凋萎??；抗性評(píng)價(jià)

楊梅凋萎病是浙江省楊梅果園近幾年大面積發(fā)生的病害，發(fā)病后2～3年就引起樹(shù)體死亡，對(duì)楊梅產(chǎn)業(yè)造成較大威脅［1］。鑒定結(jié)果表明，楊梅凋萎病的病原菌是異色擬盤(pán)多毛孢（Pestalotiopsis versicolor）和小孢擬盤(pán)多毛孢（P.microspora）［1］，該病菌對(duì)環(huán)境及營(yíng)養(yǎng)元素的適應(yīng)性較廣［2-3］，雖然室內(nèi)篩選到的農(nóng)藥毒力效果較好，但果園內(nèi)應(yīng)用的防效卻并不理想［4］。目前浙江省主栽品種東魁較易感病，荸薺種則較抗?。?］，更有效的防治技術(shù)及果實(shí)品質(zhì)優(yōu)的抗病品種有待推廣。

抗病育種一直是果樹(shù)科學(xué)研究中的重要內(nèi)容［6-10］。蘋(píng)果［11-12］、梨［13］和葡萄［14］等的抗病性評(píng)價(jià)為抗病育種提供了指導(dǎo)。本研究就農(nóng)業(yè)部在浙江臨海楊梅種質(zhì)資源圃?xún)?nèi)樹(shù)體較大的32個(gè)種質(zhì)資源進(jìn)行了凋萎病的抗性評(píng)價(jià)，旨在對(duì)楊梅抗性育種提供指導(dǎo)。

1 材料和方法

接種用的楊梅凋萎病病原菌為強(qiáng)致病力菌株XJ27和YS26［1］。將分生孢子用滅菌清水配成2× 105個(gè)·m L-1的分生孢子懸浮液［4］。供試楊梅種質(zhì)資源共32份，來(lái)源于浙江臨海楊梅種質(zhì)資源圃。2013年4月末取上述種質(zhì)資源直徑為0.6～0.9 cm的1年生枝條，去掉基端后截成長(zhǎng)度為30 cm的枝段。每份資源以1根枝段為1個(gè)處理，重復(fù)9次。每根枝段在離頂端5 cm處小心去除葉片1枚，在葉痕位置接種分生孢子懸浮液20μL，以滅菌的清水接種作為對(duì)照，棉花吸水保濕，保鮮膜輕輕纏繞。接種后的枝段放250 m L三角瓶?jī)?nèi)用自來(lái)水培養(yǎng)，然后套塑料袋保濕48 h。置于25℃培養(yǎng)箱內(nèi)飽和濕度下恒溫培養(yǎng)。從接種當(dāng)日起，每日調(diào)查枝段上葉片干枯或掉落占總?cè)~片的數(shù)量，調(diào)查15 d。

根據(jù)所記錄的發(fā)病日期和每日的病情級(jí)數(shù)，分別計(jì)算潛伏期（枝條接種病菌到病癥出現(xiàn)的天數(shù)）和病情指數(shù)。病情指數(shù)（DI）=∑（病級(jí)枝數(shù)×該級(jí)代表數(shù)值）×100/（調(diào)查總枝數(shù)×發(fā)病最高1級(jí)代表數(shù)值）。

楊梅種質(zhì)凋萎病抗病性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。0級(jí)沒(méi)有葉片干枯或者掉落，1級(jí)枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)≤10%，3級(jí)枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)＞10%～25%，5級(jí)枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)＞25%～50%，7級(jí)枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)＞50%～75%，9級(jí)枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)＞75%～100%。

病情級(jí)數(shù)調(diào)查按分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)劃分等級(jí)。依據(jù)接種15 d后的病情指數(shù)評(píng)價(jià)不同種質(zhì)資源的抗性。高抗（HR），0≤DI≤15；抗病（R），15＜DI≤35；中抗（MR），35＜DI≤55；感?。⊿），55＜DI≤75；高感（HS），75＜DI≤100。

2 結(jié)果與分析

2.1 果實(shí)顏色不同的種質(zhì)資源的抗病性差異

圖1 紅梅類(lèi)和烏梅類(lèi)楊梅種質(zhì)的抗性比例

圖1 顯示，綜合分析XJ27和YS26菌株的抗性情況，紅梅類(lèi)的種質(zhì)材料為62.5%高抗；高感材料占12.5%；抗病、中抗和感病材料比例接近，為6%～10%。與紅梅類(lèi)相比，烏梅類(lèi)的種質(zhì)材料抗性分布較均勻，中抗材料最多，占39.29%，高抗和抗病材料分別占28.57%和21.43%，感病和高感材料占3.5%～7.5%。

2.2 不同種質(zhì)資源對(duì)不同菌株的抗病性差異

從圖2結(jié)果顯示，62.5%的紅梅類(lèi)材料對(duì)2個(gè)菌株都是高抗病性，6.25%的紅梅類(lèi)材料對(duì)2個(gè)菌株都是感病性。紅梅類(lèi)種質(zhì)材料對(duì)XJ27的抗病和中抗的數(shù)量顯著少于對(duì)YS26的抗病和中抗材料，減少6.25個(gè)百分點(diǎn)，對(duì)XJ27的高感材料數(shù)量顯著多于對(duì)YS26的高感材料，增加12.5個(gè)百分點(diǎn)。28.57%烏梅類(lèi)種質(zhì)材料對(duì)2個(gè)菌株表現(xiàn)高抗，21.43%的烏梅類(lèi)種質(zhì)材料對(duì)2個(gè)菌株表現(xiàn)抗病。50%的烏梅類(lèi)材料對(duì)XJ27表現(xiàn)中抗，但沒(méi)有感病和高感材料，28.57%的烏梅類(lèi)材料對(duì)YS26表現(xiàn)中抗，感病和高感材料分別占7.14%和14.29%。

圖2 對(duì)2種凋萎病菌株抗性不同楊梅比例

從表1結(jié)果可以看出，16個(gè)紅梅類(lèi)材料有12個(gè)材料對(duì)異色擬盤(pán)多毛孢菌株XJ27和小孢擬盤(pán)多毛孢菌株YS26的抗性表現(xiàn)完全一致，占總材料數(shù)的75%。14個(gè)烏梅類(lèi)材料中，6個(gè)材料對(duì)2個(gè)菌株的抗性表現(xiàn)完全一致，占材料總數(shù)的42.9%。

2.3 不同抗性材料潛伏期差異

一般楊梅種質(zhì)材料對(duì)病菌越敏感，則潛伏期越短。表1表明，高感品種3～8 d就表現(xiàn)出嚴(yán)重病癥，敏感品種3～10 d表現(xiàn)出嚴(yán)重病癥，中抗品種4～10 d表現(xiàn)出較嚴(yán)重病癥，個(gè)別12 d才表現(xiàn)出較重病癥，抗性品種3～8 d表現(xiàn)出較輕的病癥，高抗品種多數(shù)都超過(guò)10 d才有輕微癥狀表現(xiàn)出來(lái)。上虞水晶在7 d時(shí)表現(xiàn)輕微癥狀。

2.4 不同抗性材料發(fā)病率差異

一般楊梅種質(zhì)材料對(duì)病菌越敏感，則發(fā)病率越高。表1表明，高感品種發(fā)病率均為100%，敏感品種發(fā)病率66.7%～100%，中抗品種發(fā)病率33.3%～66.7%，其中早大梅對(duì)YS26菌株是中抗，但發(fā)病率100%；抗性品種發(fā)病率25%～66.7%，高抗品種少數(shù)發(fā)病率在33.3%～66.7%，多數(shù)無(wú)病癥表現(xiàn)。其中三門(mén)桐子梅和上虞水晶雖是高抗材料，但發(fā)病率均為100%，說(shuō)明這2個(gè)材料是高度抗病菌擴(kuò)展材料。

2.5 抗病性綜合評(píng)價(jià)

表1顯示，綜合評(píng)價(jià)臨海苗圃?xún)?nèi)種質(zhì)材料的抗性，紅梅類(lèi)種質(zhì)高抗材料有深紅種、安海變種、桃紅、松山大野、松山水梅、大葉早、涌泉1號(hào)、涌泉3號(hào)等8個(gè)品種，抗病品種有蕭山早色種，中抗品種有蕭山遲色，高感材料有東魁，敏感品種有荔枝梅種。烏梅類(lèi)的種質(zhì)高抗材料有硬絲安海變和黑瑞林2個(gè)品種，抗病品種有余杭金錢(qián)炭梅，中抗品種有荸薺種、晚稻楊梅、小葉細(xì)蒂等3個(gè)品種，沒(méi)有對(duì)2個(gè)菌株都敏感或高度敏感的品種。上虞水晶楊梅對(duì)2個(gè)菌株都表現(xiàn)高度抗性，1個(gè)開(kāi)紅花的雄株對(duì)2個(gè)菌株也表現(xiàn)高抗。

表1 楊梅種質(zhì)資源凋萎病抗性綜合評(píng)價(jià)

3 小結(jié)和討論

試驗(yàn)表明，紅梅類(lèi)和烏梅類(lèi)都有高抗品種，在未來(lái)育種工作中可考慮加以利用。高感而品質(zhì)優(yōu)良的品種可考慮與高抗品種搭配種植，利用生物多樣性進(jìn)行病害預(yù)防。

浙江臨海苗圃的紅梅類(lèi)和烏梅類(lèi)楊梅種質(zhì)對(duì)2個(gè)病原菌菌株的抗性類(lèi)型數(shù)量差異較大，紅梅類(lèi)高抗和高感的比例大約是烏梅類(lèi)的2倍，而烏梅類(lèi)抗和中抗的材料較多。江蘇東山楊梅苗圃由于多數(shù)植株較小，且未提供足夠的鑒定材料，而福建提供的種質(zhì)沒(méi)有完善的保存苗圃，材料也有限，兩地種質(zhì)材料的鑒定結(jié)果不能保證足夠的重復(fù)性，所以本文予以省略。完善的楊梅種質(zhì)資源的記錄和保存工作有待加強(qiáng)，以后研究者將繼續(xù)收集和補(bǔ)充其他一些楊梅種質(zhì)的凋萎病抗性鑒定結(jié)果。

當(dāng)前果樹(shù)抗性研究的熱點(diǎn)有篩選抗性基因［7］，利用與抗性基因緊密連鎖的分子標(biāo)記進(jìn)行分子育種的抗性材料快速篩選［9-10］，利用抗病基因同源序列分析種質(zhì)資源的抗病性［8］，轉(zhuǎn)化防衛(wèi)基因至植物內(nèi)提高其抗病性［6］。楊梅的抗病育種研究也有著廣闊的空間，在收集寶貴的抗性資源的基礎(chǔ)上，篩選和利用抗性基因，利用抗性基因連鎖的分子標(biāo)記進(jìn)行抗性材料的快速篩選都值得深入研究。

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（責(zé)任編輯：張瑞麟）

S 667.6

：A

：0528-9017（2014）10-1567-03

文獻(xiàn)著錄格式：張振蘭，朱瀟婷，任海英，等.楊梅種質(zhì)資源對(duì)凋萎病抗性評(píng)價(jià)［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（10）：1567-1569，1571.

2014-05-07

浙江省重大科技專(zhuān)項(xiàng)重點(diǎn)農(nóng)業(yè)項(xiàng)目（2012C12009-5）；國(guó)家公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目（201203038）；院市（臺(tái)州）政府科技合作項(xiàng)目（TZ20140009）；院市（溫州）政府科技合作項(xiàng)目（WZ20130005）

張振蘭，女，寧夏固原人，助理研究員，本科，研究方向果樹(shù)學(xué)。E-mail：renhy@mail.zaas.ac.cn。

戚行江，男，研究員，主要從事果樹(shù)育種、栽培及病理學(xué)研究工作。E-mail：qixj@mail.zaas.ac.cn。

注：感謝福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹(shù)研究所張澤煌副研究員和江蘇蘇州市園藝站徐春明研究員給予了無(wú)私的實(shí)驗(yàn)材料的支持。

文獻(xiàn)著錄格式：葉春福，陳銀方.5種茶尺蠖誘芯的誘捕效果試驗(yàn)［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（10）：1570-1571.