競爭性透射免疫比濁法和高效液相色譜法分別測定糖尿病者糖化血紅蛋白的結(jié)果分析

周保衛(wèi)（陜西省寶雞市第二人民醫(yī)院檢驗科，陜西 寶雞 721000）

糖化血紅蛋白（HbA1c）是和機體血液內(nèi)葡萄糖相結(jié)合的血紅蛋白，在血液內(nèi)葡萄糖濃度達到很高值時，人體內(nèi)HbA1c含量隨之上升。HbA1c檢測方法一般為色譜法、電泳法、免疫法和化學法。色譜法主要包括離子交換層析法、高效液相色譜法（HPLC）和親和法、免疫比濁法、RIA、EIA、膠乳免疫凝集法（LIAA）等[1-3]。選擇1800例糖尿病患者，應用免疫比濁法與HPLC法對HbA1c進行檢測，并對其結(jié)果予以對比，分析免疫比濁法測定HbA1c結(jié)果是否具有較高準確性及可靠性，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇我院2011年1月～2013年1月1800例糖尿病患者，男910例，女890例，年齡28～79歲。同時選擇1800例健康體檢者作為對照組。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法：所有患者均應用競爭性透射免疫比濁法和HPLC法檢測HbA1c值，EDTA抗凝劑下以一次性毛細血管進行全血采集，參照儀器說明進行檢測處理。每批標本在進行檢測時需同時對兩個質(zhì)控品予以檢測。對兩種檢測方法學予以對比并測定其偏差。分析精密度，批內(nèi)精密度測定時可任意選取對照組和糖尿病組患者標本各1例，在1 d內(nèi)同時間檢測20次。批間精密度：上述所用兩份標本均應用冰凍方式保存，每天檢測3次，持續(xù)20 d，分別計算均值（M）和變異系數(shù)（CV）。

1.3 統(tǒng)計學處理：所有數(shù)據(jù)均應用SPSS 18.0軟件進行統(tǒng)計處理，兩種檢測法差異以CV表示；組間HbA1C值以t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

將免疫比濁法測定值設為y，且將HPLC法所測定值設定為x，所得到的直線回歸方程式為y=0.9898 x+0.06，r=0.9994，兩者有著較明顯相關(guān)性，見圖1。選擇分析范圍中醫(yī)學決定水平端點，低值為4.0%，中值為6.5%，高值為16.0%，低值、中值、高值預期偏差分別為2.36%、3.04%、3.28%，總誤差為7.5%，在能夠接受范圍之內(nèi)。精密度均值（M）與變異系數(shù)（CV）計算結(jié)果見表1。應用HPLC檢測對照組和糖尿病組患者HbA1C，對照組M±SD檢測為（5.13±0.21）%，糖尿病組為（11.86±1.24）%，t=11.428，糖尿病者明顯上升，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。HbA1C水平和并發(fā)癥出現(xiàn)幾率存在較為密切關(guān)系，HbA1C＜6.5者糖尿病并發(fā)癥發(fā)生率為16.67%（36/96），6.5～9.0者45.00%（324/720），＞9.0者為68.75%（594/864），伴隨HbA1C水平上升，糖尿病并發(fā)癥出現(xiàn)幾率增加（P＜0.01）。

圖1 免疫比濁法與 HPLC法檢測HbA1C線性回歸分析

表1 重復性試驗結(jié)果對比

3 討論

糖化血紅蛋白（HbA1C）因為是人體血液內(nèi)紅細胞血紅蛋白和血糖相結(jié)合而出現(xiàn)產(chǎn)物，水平和血糖濃度具有正比關(guān)系，而且可以持續(xù)保存在120 d，所以臨床中一般將其作為患者8～12周血糖控制指標。因為HbA1C和血糖具有平行性，其生成較為緩慢，而且性質(zhì)具有較高穩(wěn)定性，不會在短期內(nèi)由于血糖波動而發(fā)生變化，所以目前HbA1C≥6.5%已成為糖尿病的一種診斷標準。但是也有很多研究者認為HbA1C水平在測定時存在較多問題，所以需根據(jù)患者實際情況進行確定，而且有資料顯示，糖尿病HbA1C所具有的臨界值水平因為患者的年齡或種族不同而受到一定的影響[4-5]。

HbA1C目前在臨床中對糖尿病患者進行篩查及監(jiān)測是較為有效的方法。而對其進行測定所應用的方法較為公認的是高效液相色譜（HPLC），此方法所得到的結(jié)果具有較高的穩(wěn)定性、準確性，而且能夠進行溯源和比對，通過標準化后對批內(nèi)CV檢測能夠達到2%，而批間CV則為3.3%。

經(jīng)本文研究發(fā)現(xiàn)，免疫比濁法對同一批標本進行檢測，其結(jié)果批內(nèi)CV 3.9%，批間CV 44.6%，和HPLC法存在較為明顯的相關(guān)性（r=0.9994），此種方法在檢測中并無法得到較為精確的數(shù)據(jù)結(jié)果，但是并不存在較大的相對預期偏差，和近幾年研究報道保持一致性。此方法操作簡便，無繁復步驟少，能夠極快得到結(jié)果，臨床應用價值較高。

[1] 居 漪.糖化血紅蛋白檢測技術(shù)和質(zhì)量控制[J].檢驗醫(yī)學,2010,25(11):914.

[2] 何英武.糖化血紅蛋白測定的研究新進展[J].當代醫(yī)學,2008,24(1):58.

[3] 鄒 偉.免疫透射比濁法檢測糖化血紅蛋白的方法評價[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志,2010,9(7):527.

[4] 胡應秀,張紅梅.免疫透射比濁法測定HbA1c的可靠性研究[J].吉林醫(yī)學,2011,32(24):4969.

[5] 林紅霞,區(qū)洪炎,陳文娟.指導規(guī)范自我監(jiān)測血糖對血糖的干預[J].吉林醫(yī)學,2010,31(5):6558.