老年系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清干擾素調(diào)節(jié)因子的檢測(cè)及意義

韓學(xué)衛(wèi)

(寧夏人民醫(yī)院腎內(nèi)科，寧夏 銀川 750021)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的主要特征為大量自身抗體出現(xiàn)于血清中，激活補(bǔ)體和沉淀免疫復(fù)合物，造成多個(gè)器官和系統(tǒng)受損，特別是累及腎臟，屬于自身免疫性的一種疾病〔1〕。干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)家族為對(duì)干擾素表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄的一類因子。據(jù)相關(guān)研究顯示，SLE發(fā)病期間，IRFs起作用，如IRF5、IRF7、IRF3、IRF1〔2〕。IRF4作為轉(zhuǎn)錄因子比較獨(dú)特，免疫反應(yīng)過程中表現(xiàn)出了各種各樣的調(diào)節(jié)功能〔3〕，本研究旨在探討SLE患者血清IRF4水平及發(fā)病機(jī)制。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象 2011年1月至2013年1月我院老年SLE患者82例，年齡(68.1±7.7)歲、男6例、女76例、體質(zhì)指數(shù)(BMI)(22.0±3.2)kg/m2、空腹血糖(6.6±2.5)mmol/L、病程(3.6±2.1)年、SLE疾病活動(dòng)性指數(shù)(DAI)≥6 56例、<6 26例、狼瘡性腎炎(LN) 43例。依據(jù)美國風(fēng)濕病學(xué)院1997年修訂的SLE分類(ACR)標(biāo)準(zhǔn)。正常對(duì)照組68人為健康志愿者，性別、年齡與病例各自匹配。納入標(biāo)準(zhǔn)：①無自身免疫性疾病史(包括直系親屬)；②近1個(gè)月內(nèi)未服用免疫抑制劑或激素等的藥物；③未有任何特征符合診斷SLE的標(biāo)準(zhǔn)，均知情同意。

1.2研究方法 參照SLEDAI量表自行設(shè)計(jì)調(diào)查問卷，內(nèi)容主要為：SLE患者的關(guān)節(jié)痛、發(fā)熱等的臨床特征、實(shí)驗(yàn)室C-反應(yīng)蛋白(CRP)、補(bǔ)體、抗體等的化驗(yàn)結(jié)果作為檢測(cè)SLE患者的指標(biāo)。抽取空腹時(shí)5 ml的靜脈血放于非抗凝管內(nèi)，于實(shí)驗(yàn)室中以1 500 r/min的速度離心血清5 min，保存于-80℃的冰箱內(nèi)，從而避免凍融反復(fù)發(fā)生。在收集樣本時(shí)，根據(jù)患者的主訴，臨床醫(yī)師參照實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)，SLEDAI評(píng)分≥6者為活動(dòng)期，<6者為穩(wěn)定期。調(diào)查員經(jīng)統(tǒng)一培訓(xùn)按要求填寫調(diào)查問卷。劃分非LN組與LN組：依據(jù)ACR標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于診斷SLE的標(biāo)準(zhǔn)，LN組只要符合下列其中一項(xiàng)：(1)檢查活組織證實(shí)；(2)細(xì)胞管型、膿尿或血尿長(zhǎng)期存在；(3)蛋白尿持續(xù)不小于0.5 g/d。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，使用由卡爾文生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒檢測(cè)IRF4。采用美國Biotek Instruments有限公司生產(chǎn)的ELX-800酶標(biāo)儀，三洋公司生產(chǎn)的-80℃的冰箱，上海一恒科技有限公司生產(chǎn)的DHP-9052電熱恒溫培養(yǎng)箱以及長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司生產(chǎn)的DD-5離心機(jī)等。比較SLE組與正常組、SLEDAI≥6與SLEDAI<6組、LN組與非LN組IRF4水平差異，分析IRF4水平與SLE患者的炎性相關(guān)指標(biāo)〔包括SLEDAI、CRP、血細(xì)胞沉降率(ESR)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)〕、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)(包括ANA滴度、抗ds-DNA、抗SM抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體)的相關(guān)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1不同組別IRF4比較 SLEDAI≥6的SLE患者的IRF4水平〔n=56,(6.19±0.98)ng/ml〕顯著低于SLEDAI<6的患者〔n=26,(6.79±0.60)ng/ml〕(t=2.793，P<0.01)。SLE組〔(6.56±1.21)ng/ml〕與正常組〔(6.87±1.12)ng/ml〕無差異(t=1.615,P=0.11),LN組〔n=43,(6.69±0.58)ng/ml〕與非LN組〔n=39，(6.40±1.01)ng/ml〕無差異(t=1.613，P=0.11)。

2.2IRF4與SLE患者炎性相關(guān)指標(biāo)相關(guān)性分析 IRF4水平與SLEDAI、CRP、ESR、WBC均無明顯相關(guān)性(r=-0.172、P=0.12;r=-0.253、P=0.09；r=-0.032、P=0.80；r=-0.092、P=0.25)。

2.3IRF4與SLE患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)相關(guān)性 抗ds-DNA增加的SLE患者IRF4水平〔n=30,(6.19±0.98)ng/ml〕顯著低于抗ds-DNA未增加患者〔n=52,(6.79±0.60)ng/ml〕(t=3.443，P<0.01)；抗SSA陽性患者的IRF4水平〔n=53,(6.68±0.91)ng/ml〕顯著高于陰性患者〔n=29,(6.20±1.12)ng/ml〕(t=2.012，P=0.039)。ANA滴度+〔n=80,(6.56±1.21)ng/ml〕與ANA滴度-〔n=2,(6.87±1.12)ng/ml〕無顯著差異(t=0.358,P=0.72)?？筍SA抗體+〔n=53,(6.68±0.91)ng/ml〕與抗體-〔n=29,(6.20±1.12)ng/ml〕有顯著差異(t=2.012，P=0.039)?？筍SB抗體+〔n=30,(6.58±0.90)ng/ml〕與抗體-〔n=52,(6.55±1.11)ng/ml〕無差異(t=0.126,P=0.90)。抗SM抗體+〔n=43,(6.69±0.58)ng/ml〕與抗體-〔n=39,(6.40±1.01)ng/ml〕無差異(t=0.320,P=0.75)。

3 討 論

IRFs參與了SLE發(fā)病過程。如IRF1可以激活缺血后細(xì)胞促炎性因子在免疫細(xì)胞上的顯現(xiàn)及上皮細(xì)胞在腎小管內(nèi)的表達(dá)，MRL-(Fas)lpr鼠有LN時(shí)，促炎性因子在腎小球膜上的水平也有所上升。樹突細(xì)胞(DCs)內(nèi)，IRF7和IRF3免疫識(shí)別內(nèi)源性核酸和病毒時(shí)，能將干擾素Ⅰ型產(chǎn)物介導(dǎo)出來(包括TLR7信號(hào)途徑)〔4〕。如IRF4需要Th17 T細(xì)胞誘導(dǎo)，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞對(duì)Th2應(yīng)答能力的抑制，免疫球轉(zhuǎn)換蛋白類型以及漿細(xì)胞和B/T細(xì)胞的成熟。對(duì)體液免疫，IRF4同樣起調(diào)節(jié)作用，參與巨噬細(xì)胞M2的極化過程〔5〕。通過結(jié)合，IRF4還能到MyD88上充當(dāng)信號(hào)TLR抑制體，MyD88實(shí)際上可以將其與IRF5交互作用減弱(包括其他下游區(qū)元件信號(hào)的交互作用)〔6〕。對(duì)體液免疫，IRF4可以起一定的抑制作用，亦能幫助適應(yīng)性免疫的發(fā)生。IRF4與CD68、SPI1、IL-17/21等在SLE患者中發(fā)揮細(xì)胞因子互相關(guān)系的作用已經(jīng)得到證實(shí)，說明可能IRF4與SLE的發(fā)生有著一定的關(guān)聯(lián)性〔7〕。

SLEDAI評(píng)分和IRF4間無相關(guān)性〔8〕。SLE患者體內(nèi)血管等位置有免疫復(fù)合物大量存在，幫助活體向有活性的物質(zhì)轉(zhuǎn)化，同時(shí)有連鎖反應(yīng)發(fā)生。在此期間，補(bǔ)體大量被消耗，其本身能摧毀自身組織，使SLE患者處于一種疾病狀態(tài)〔9〕。SLE患者主要的一個(gè)嚴(yán)重并發(fā)癥為L(zhǎng)N(40%～60%)〔10〕。本研究還未明確我國漢族人群的IRF4基因是否與SLE相關(guān)，考慮原因可能是人口結(jié)構(gòu)、偏倚等因素造成。未來的研究中可以對(duì)IRF4與SLE發(fā)病有關(guān)的其他可能相關(guān)位點(diǎn)進(jìn)行研究，在條件允許的情況下可以進(jìn)一步將樣本含量擴(kuò)大〔11〕。

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