兗州卷柏化學(xué)成分研究

龍紅萍， 李福雙， 徐康平， 李 靜， 趙蘭芳， 成 飛， 喻 凱， 譚桂山，2*

（1.中南大學(xué)藥學(xué)院， 湖南 長沙 410013； 2.中南大學(xué)湘雅醫(yī)院， 湖南 長沙 410008）

［成分分析］

兗州卷柏化學(xué)成分研究

龍紅萍1， 李福雙1， 徐康平1， 李 靜1， 趙蘭芳1， 成 飛1， 喻 凱1， 譚桂山1，2*

（1.中南大學(xué)藥學(xué)院， 湖南 長沙 410013； 2.中南大學(xué)湘雅醫(yī)院， 湖南 長沙 410008）

目的 研究卷柏屬植物兗州卷柏的化學(xué)成分。 方法 采用聚酰胺、 硅膠、 Sephadex LH-20 等柱層析分離方法對兗州卷柏 75%乙醇提取物進行分離純化， 根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進行結(jié)構(gòu)鑒定。 結(jié)果 從兗州卷柏提取物中分離得到 16 個單體 化 合 物， 分 別 為 橡 膠 樹 雙 黃 酮 （ 1 ） 、 apigeninyl-（ 4?， O，3 ） -kaempferol（ 2 ） 、 異 柳 杉 雙 黃 酮 （ 3 ） 、7，4'-氧-二-甲基穗花杉雙黃酮 （4）、 四甲基穗花杉雙黃酮 （5）、 6-羥基蘆薈大黃素 （6）、 大黃素-6-甲醚 （7）、 大黃素 （8）、 大黃酚 （9）、 5α-豆甾-3，6-二酮 （10）、 羽扇豆醇乙酸酯 （11）、 鄰苯二甲酸二丁酯 （12）、 胡蘿卜苷 （13）、β-谷甾醇 （14）、 β-香樹脂醇 （15）、 十七烷酸 （16）。 結(jié)論 化合物 1 ～12 首次從該植物中分離得到， 其中化合物10 ～12 為首次從卷柏屬植物中得到。

兗州卷柏；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定；波譜分析

兗州卷柏 Selaginella involven Spring 為蕨類植物門卷柏科植物兗州卷柏的全草。兗州卷柏多分布在我國西南、華南、浙江、江西、湖北等地，其在《福建民間草藥》、 《陸川本草》、 《四川中藥志》、《湖南藥物志》 等均有記載，具有清熱解毒，涼血止血，利尿消腫等功效，是我國民間使用的一種卷柏屬珍稀抗病毒藥用植物，用于對乙肝病毒的治療。為了進一步探討兗州卷柏藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)， 本實驗對其 75%乙醇提取物進行化學(xué)成分研究， 分離鑒定了16個化合物。

1 儀器與試藥

Varian-INOVA-400FT型核磁共振儀 （1H-NMR 400 MHz，13C-NMR 100 MHz， TMS 為 內(nèi) 標(biāo)， 美 國Varian 公司）； Finnigan LCQ-Advatange質(zhì)譜儀 （ 美國 Thermo公 司）； Buchi-540 熔 點 測 定 儀 （ 瑞 士Buchi公司）； Nicolet AVATAR360 FT-IR紅外光譜儀， KBr壓片 （美國 Nicolet公司）； UV Probe-2540紫外可見分光光度計 （日本 SHIMADZU公司）。

薄層色譜用硅膠 （GF254）及柱層析硅膠為青島海洋化工廠生產(chǎn)，聚酰胺購于國藥集團化學(xué)試劑有限公 司， Sephadex LH-20 購 自 Pharmacia公 司。所用試劑均為分析純。

藥材 2009 年 7 月采自廣西壯族自治區(qū)興安縣貓兒山，由廈門大學(xué)生命科學(xué)院李振基教授鑒定為卷柏科植物兗州卷柏的全草，樣品保存于中南大學(xué)藥學(xué)院藥物化學(xué)教研室。

2 提取與分離

取兗州卷柏干燥全草 10 kg， 用 75%乙醇回流提取 3 次， 提取液濃縮得浸膏 （1 kg）。 取0.5 kg上聚 酰 胺 柱。 依 次用 水、 30%、 50%、 70% 和95%乙醇梯度洗脫，得相應(yīng)的 5 個部位。70%乙醇部位 （100 g）經(jīng)硅膠柱層析， 三氯甲烷-丙酮梯度洗脫， 得化合物 1 （50 mg）， 化合物 2 （10 mg），化合物 3 （30 mg）， 化合物 4 （20 mg）； 95%乙醇部位 （50 g） 經(jīng)硅膠柱層析，三氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到 P1-P6 共 6 個部分。 P1 （10 g） 經(jīng)硅膠柱層析， 石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫， 得化合物 5（20 mg）， 化合物 6 （10 mg）、 化合物 7 （50 mg）、化合物8 （100 mg）、 化合物 9 （30 mg）和化合物10 （15 mg）， P3 反復(fù)用硅膠柱層析純化，甲醇重結(jié)晶得化合 物 11 （200 mg） 和化合物 12 （300 mg）， P4 反復(fù)用硅膠柱層析純化， 甲醇重結(jié)晶得化合物13 （300mg）、 化合物14 （30 mg）、 化合物15 （20 mg） 和化合物 16 （200 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合 物 1： 淺 黃 色 片 狀 物 （ 甲 醇）， mp 325.5 ～326.4 ℃。1H-NMR （ 400 MHz，DMSO-d6，TMS） δ：6.90 （1H， s， 3-H）， 6.30 （1H， d， J= 1.7 Hz， 6-H）， 6.66 （1H， d， J=1.7 Hz， 8-H），8.00 （1H， d， J=8.4 Hz， 2'-H）， 7.14 （1H， d，J=8.8 Hz，5'-H）， 7.98 （1H， dd， J=7.7 Hz，2.0 Hz， 6'-H）， 6.82 （1H， s，3″-H）， 6.60 （1H， s， 6″-H）， 7.62 （2H， d， J=9.0 Hz， 2?， 6?-H），6.87 （2H， d， J=9.0 Hz， 3?， 5?-H）， 13.17 （5-OH）， 10.34 （4'-OH）， 12.90 （5 ″-OH）， 3.78（3H， s， 7-OCH3），3.82 （ 3H，s， 7 ″-OCH3），3.74 （ 3H， s， 4?-OCH3） 。13C-NMR （ DMSO-d6，100 MHz） δ： 163.9 （ C-2）， 103.2 （ C-3 ） ， 181.9（C-4）， 161.4 （C-5）， 97.9 （C-6）， 165.0 （ C-7），92.6 （C-8）， 157.2 （ C-9）， 104.7 （ C-10）， 122.8（C-1'）， 131.3 （C-2'）， 121.0 （ C-3'）， 159.5 （ C-4'）， 116.2 （ C-5'）， 128.0 （C-6'），163.5 （C-2″）， 103.2 （ C-3 ″）， 182.3 （ C-4 ″），161.2 （ C-5″）， 95.5 （ C-6 ″）， 162.7 （ C-7 ″）， 104.9 （ C-8″）， 153.6 （C-9″） ， 104.1 （ C-10″）， 119.6 （ C-1?）， 128.0 （C-2?， C-6?）， 114.5 （C-3?， C-5?），162.3 （ C-4?）， 56.4 （ OCH3）， 55.9 （ OCH3），55.5 （OCH3）。 以上數(shù)據(jù)與文獻 ［1］ 報道基本一致，故鑒定化合物1為橡膠樹雙黃酮。

化合物 2： 淺黃色粉末 （甲醇）， mp 318.4 ～319.2 ℃。1H-NMR （400 MHz， DMSO-d6， TMS） δ：6.26 （1H， d， J=2.0 Hz， 6-H），6.55 （1H，d，J=2.0 Hz， 8-H）， 7.88 （2H， d， J=8.4 Hz， 2'，6'-H）， 6.91 （2H， d， J=8.4 Hz， 3'， 5'-H）， 6.88（1H， s， 3″ -H）， 6.21 （1H， d，J=2.0 Hz，6″-H）， 6.49 （1H，d， J=2.0 Hz， 8″-H），8.0 （2H，d， J=8.4 Hz， 2?， 6?-H）， 7.25 （2H， d， J= 8.4 Hz， 3?， 5?-H）， 12.25 （5-OH）， 10.35 （ 7-OH），10.96 （ 4'-OH）， 12.88 （ 5″-OH），10.88（4?-OH）。13C-NMR（ DMSO-d6， 100 MHz） δ： 157.1（C-2）， 131.9 （ C-3 ）， 176.3 （ C-4 ）， 161.7 （ C-5 ） ， 99.2 （ C-6 ）， 164.8 （ C-7 ）， 94.4 （ C-8 ），157.3 （C-9 ）， 104.1 （ C-10 ）， 120.0 （C-1'），130.5 （ C-2'， C-6'）， 116.0 （ C-3'， C-5'）， 161.4（ C-4'） ， 163.3 （ C-2 ″）， 104.1 （ C-3 ″） ， 182.1（ C-4″）， 161.4 （C-5″），99.2 （C-6″）， 164.6 （C-7″）， 94.5 （ C-8 ″）， 157.6 （ C-9 ″）， 104.1 （ C-10″）， 125.2 （C-1?）， 128.8 （C-2?， C-6?） ， 116.1（C-3?， C-5?）， 161.7 （ C-4?）。 以 上 數(shù) 據(jù) 與 文 獻［2］ 報道基本一致， 故鑒定化合物 2 為 apigeninyl-（4?， O， 3） -kaempferol。

化合物 3： 淺黃色粉末 （三氯甲烷 -甲醇混合溶媒）， mp 310.0 ～311.4 ℃。1H-NMR （400 MHz，DMSO-d6， TMS ） δ： 6.95 （ 1H， s， 3-H）， 6.87（1H， s， 8-H）， 8.01 （2H， dd， J=8.4， 3.6 Hz， 2'，6'-H）， 6.96 （ 2H，d， J=8.4 Hz， 3'， 5'-H），7.13 （1H， s， 3″-H）， 6.20 （1H， d， J=2.0 Hz，6″-H） ， 6.49 （ 1H， d， J=2.0 Hz， 8″-H）， 8.02（2H， d，J=8.4 Hz， 2″'， 6″'-H）， 7.03 （2H， d，J=8.4 Hz， 3″'，5″'-H）， 13.11 （1H， s， 5-OH），10.45 （1H， s， 4'-OH）， 12.89 （ 1H， s， 5″-OH），10.86 （ 1H， s， 7 ″-OH）， 3.89 （ 3H， s， 7-OCH3）。13C-NMR（ DMSO-d6，100 MHz） δ： 164.2（C-2）， 103.7 （ C-3 ）， 181.7 （ C-4 ）， 161.4 （ C-5）， 98.8 （ C-6 ）， 164.3 （ C-7 ） ， 93.9 （ C-8 ），157.3 （ C-9 ）， 103.7 （ C-10 ）， 124.3 （ C-1'），128.4 （ C-2'， C-6'）， 115.1 （ C-3'， C-5'），160.5（C-4'）， 163.0 （C-2″）， 102.8 （ C-3″）， 182.1 （ C-4″）， 152.4 （ C-5″）， 124.7 （ C-6″）， 158.0 （ C-7″）， 92.0 （ C-8″）， 154.0 （ C-9″）， 103.9 （C-10″）， 120.9 （ C-1″'）， 128.6 （ C-2″'， C-6″'），115.9 （ C-3″'， C-5″'） ， 161.4 （ C-4″'） ， 56.7（OCH3）。 以上數(shù)據(jù)與文獻 ［3］ 報道基本一致，故鑒定化合物3為異柳杉黃酮。

化合物 4： 淺黃色粉末 （三氯甲烷 -甲醇混合溶媒）， mp 310.0 ～311.4 ℃。1H-NMR （400 MHz，DMSO-d6，TMS ） δ： 7.02 （ 1H， s， 3-H）， 6.34（1H， s， 6-H）， 6.82 （1H， d， J=2.0 Hz， 8-H），8.11 （1H， d，J=2.0 Hz， 2'-H）， 7.37 （1H， d，J=8.4 Hz，5'-H）， 8.23 （1H，dd， J=8.4， 2.0 Hz， 6'-H）， 6.83 （1H， s， 3″-H）， 6.41 （1H， s，6″-H） ， 7.50 （ 2H， d， J=8.4 Hz， 2?， 6?-H），6.72 （ 2H， dd， J=8.4， 2.0 Hz， 3?，5?-H），13.11 （1H， s， 5-OH）， 12.93 （1H， s， 5″ -OH），10.86 （ 1H， s， 7 ″-OH）， 10.34 （ 1H， s， 4?-OH）， 3.80 （3H，s，7-OCH3），3.84 （3H， s， 4'-OCH3）。13C-NMR （ DMSO-d6， 100 MHz） δ： 164.1（C-2）， 103.0 （ C-3 ）， 182.4 （ C-4 ）， 161.5 （ C-5 ）， 98.6 （ C-6 ） ， 164.0 （ C-7 ） ， 93.2 （ C-8 ），157.8 （C-9 ）， 104.1 （ C-10 ）， 121.7 （C-1'），131.4 （ C-2'） ， 122.8 （ C-3'）， 161.1 （ C-4''），112.2 （ C-5'）， 128.8 （ C-6'）， 165.7 （ C-2 ″），103.0 （ C-3 ″）， 182.5 （ C-4 ″）， 161.6 （ C-5 ″），99.0 （C-6 ″）， 162.2 （ C-7 ″）， 105.2 （ C-8 ″），154.8 （ C-9 ″） ， 104.0 （ C-10 ″）， 122.1 （ C-1?），128.5 （ C-2?， C-6?）， 116.3 （ C-3?， C-5?）， 161.1（C-4?）， 56.5 （OCH3）， 56.4 （OCH3）。 以上數(shù)據(jù)與文獻 ［4］ 報道基本一致， 故鑒定化合物 4 為 7，4'-氧 -二 -甲基穗花杉雙黃酮。

化合物 5： 黃色針晶 （甲醇）， mp 302.7 ～ 303.2 ℃。1H-NMR （ 400 MHz， CDCl3， TMS ） δ：6.64 （1H， s， H-3）， 6.44 （1H， d， J=1.6 Hz， 6-H）， 6.36 （1H，d， J=1.6 Hz， 8-H），7.88 （1H，d，J=2.4 Hz， 2'-H）， 7.47 （1H，d， J=8.8 Hz，5'-H） ， 7.97 （1H， dd， J=8.8， 2.4 Hz， 6'-H），6.60 （1H， s， 3″-H）， 6.54 （1H， s， 6″-H） ， 7.47（2H， d， J=8.8 Hz， 2?，6?-H）， 6.83 （2H，d，J=8.8 Hz， 3?， 5?-H）， 13.12 （ 1H， s， 5-OH），12.78 （1H， s， 5″-OH） ， 3.79 （3H， s， 7-OCH3），3.84 （ 3H， s， 4'-OCH3）， 3.81 （ 3H， s， 7 ″-OCH3），3.87 （ 3H， s，4?-O CH3）。13C-NMR（100 MHz， CDCl3） δ： 164.0 （ C-2 ）， 102.9 （ C-3）， 182.4 （ C-4 ），162.1 （ C-5 ）， 98.7 （ C-6 ），163.8 （ C-7 ）， 92.6 （C-8 ），157.7 （ C-9 ），104.6（C-10）， 123.4 （ C-1'） ， 127.7 （ C-2'）， 122.0 （ C-3'）， 160.6 （ C-4'）， 114.5 （ C-5'） ， 131.1 （ C-6'），165.4 （C-2″）， 103.6 （ C-3″）， 182.9 （C-4″），160.7 （ C-5″）， 98.1 （ C-6″）， 162.3 （ C-7″）， 105.1（C-8″）， 154.1 （C-9″）， 105.1 （ C-10″）， 122.0 （ C-1″'），127.7 （ C-2″'， -6″'）， 114.4 （ C-3″'， 5″'），162.7 （ C-4″'）， 56.3 （-OCH3）， 55.9 （-OCH3），55.7 （-OCH3）， 55.5 （ -OCH3）。 以上數(shù)據(jù)與文獻［1］ 報道基本一致， 故鑒定化合物 5 為 7， 4'，7″，4?-氧-四-甲基穗花杉雙黃酮。

化合物 6： 橘黃色針晶 （甲醇）， mp 257.0 ～258.1 ℃。1H-NMR （ 400 MHz， CDCl3， TMS ） δ：7.25 （1H， d，J=1.0 Hz， 2-H）， 7.64 （1H， d，J=1.0 Hz， 4-H）， 7.13 （1H， d， J=2.4 Hz， 5-H）， 6.59 （1H， d， J=2.4 Hz， 7-H）， 12.05（1H， s， 1-OH）， 11.45 （ 1H， s， 3-OH） ， 12.11（1H， s， 8-OH） ， 4.61 （ 2H， s， 6-CH2OH）。13CNMR （100 MHz， CDCl3） δ： 161.4 （ C-1）， 120.7（C-2）， 152.8 （ C-3 ）， 117.0 （ C-4 ）， 108.9 （ C-5）， 165.6 （ C-6 ）， 107.8 （C-7）， 164.4 （ C-8 ），189.6 （ C-9 ） ， 181.3 （ C-10 ）， 114.0 （ C-1α），132.8 （ C-4α）， 135.1 （ C-5α）， 108.9 （ C-8α），61.9 （6-CH2OH）。 以上數(shù)據(jù)與文獻 ［5］ 報道基本一致， 故鑒定化合物 6 為 1，3，8-三羥基-6-羥甲基蒽醌， 即 6-羥基蘆薈大黃素。

化合物 7： 黃色針晶 （甲醇）， mp 203.2 ～204.6 ℃。1H-NMR （ 400 MHz，CDCl3， TMS ） δ：7.00 （1H， d， J=1.0 Hz， H-2）， 7.54 （1H， d，J=1.0 Hz， H-4）， 7.27 （1H， d， J=2.5 Hz， H-5）， 6.60 （1H，d， J=2.5 Hz， H-7）， 12.04 （1H，s， 1-OH）， 12.23 （1H， s， 8-OH）， 3.86 （3H， s，6-OCH3）， 1.59 （ 3H， s， 3-CH3） 。13C-NMR（100 MHz， CDCl3） δ： 162.4 （ C-1 ），124.6 （ C-2）， 148.8 （ C-3 ）， 121.0 （ C-4 ）， 108.4 （ C-5 ），166.2 （ C-6 ） ， 106.9 （ C-7 ）， 165.4 （ C-8 ），190.4 （C-9 ），182.2 （ C-10 ）， 113.8 （ C-1α），133.4 （ C-4α）， 135.2 （ C-5α）， 109.9 （ C-8α），56.1 （6-OCH3）， 22.1 （3-CH3）。 以上數(shù)據(jù) 與 文獻 ［6］ 報道基本一致，故鑒定化合物 7 為 1，8-二羥基-3-甲基-6-甲氧基蒽醌， 即大黃素-6-甲醚。

化合 物 8： 橙 色 針 狀 結(jié) 晶 （ 甲 醇）， mp 258.8 ～ 260.0 ℃；1H-NMR （ 400 MHz， CDCl3，TMS） δ：7.15 （1H， d， J=1.0 Hz，H-2）， 7.48（1H， d， J=1.0 Hz， H-4） ， 7.11 （1H， d， J=2.5 Hz，H-5 ）， 6.52 （ 1H，d， J=2.5 Hz， H-7 ），12.01 （1H， s， 1-OH）， 10.88 （1H， s， 3-OH），12.07 （1H， s， 8-OH） ， 2.39 （3H， s， 6-CH3）。13CNMR （100 MHz，CDCl3） δ： 161.8 （C-1）， 124.4（C-2）， 148.5 （ C-3 ）， 120.8 （ C-4 ）， 108.9 （ C-5）， 166.0 （ C-6 ）， 107.9 （ C-7 ）， 164.4 （ C-8 ），190.0 （ C-9 ） ， 181.2 （ C-10 ）， 113.5 （ C-1α），132.4 （ C-4α），135.1 （ C-5α）， 108.9 （ C-8α），21.5 （6-CH3）。 以上數(shù)據(jù)與文獻 ［7］ 報道基本一致， 故鑒定化合物 8 為 1，3，8-三羥基-6-甲基蒽醌，即大黃素。

化合物 9： 橘 黃 色 針 狀 結(jié)晶 （甲醇）， mp 195.1 ～197.0 ℃；1H-NMR （ 400 MHz， CDCl3，TMS） δ：7.07 （1H， d， J=1.0 Hz，H-2）， 7.61（1H， d， J=1.5 Hz， H-4 ）， 7.79 （ 1H， dd， J= 8.0， 1.0 Hz， H-5）， 7.65 （1H， dd， J=8.0， 1.0 Hz，H-6 ），7.26 （1H， dd， J=8.0， 1.0 Hz， H-7）， 12.01 （1H， s， 1-OH）， 12.03 （ 1H， s， 8-OH）， 2.44 （3H， s， 3-CH3）。13C-NMR （100 MHz，CDCl3） δ： 162.4 （ C-1 ）， 124.5 （ C-2 ）， 149.5（C-3）， 119.8 （ C-4 ）， 121.3 （ C-5 ）， 136.9 （ C-6）， 124.3 （ C-7 ）， 162.4 （ C-8 ）， 192.0 （ C-9 ），181.8 （ C-10 ）， 113.5 （ C-1α），133.4 （C-4α），134.1 （C-5α）， 115.9 （C-8α）， 22.3 （3-CH3）。 以上數(shù)據(jù)與文獻 ［8］ 報道基本一致， 故鑒定化合物9 為 1，8-二羥基-3-甲基蒽醌，即大黃酚。

化合物 10：無色針晶 （石油醚 -丙酮）， mp 178 ～180 ℃；1H-NMR （400 MHz， CDCl3， TMS ）δ： 0.96 （3H，s， 19-CH3）， 0.93 （3H， d， J= 6.4 Hz， 21-CH3）， 0.80 ～0.87 （9H， m， 26， 27， 29-3CH3）， 0.69 （ 3H， s， 18-CH3）。13C-NMR（100 MHz， CDCl3） δ： 38.0 （ C-1） ， 39.3 （ C-2），209.2 （C-3 ），37.0 （ C-4 ），57.5 （ C-5 ）， 211.4（C-6）， 46.6 （ C-7 ） ， 37.4 （ C-8 ） ， 53.4 （ C-9 ），41.2 （C-10）， 21.6 （ C-11 ）， 38.0 （ C-12 ）， 42.9（C-13）， 55.9 （ C-14 ）， 24.0 （ C-15 ） ， 28.0 （ C-16），56.5 （C-17）， 12.5 （ C-18），12.0 （ C-19），36.0 （C-20）， 18.6 （ C-21 ）， 33.7 （ C-22 ）， 26.0（C-23）， 45.7 （ C-24 ）， 29.0 （ C-25 ）， 19.8 （ C-26），18.9 （C-27）， 23.0 （ C-28），11.9 （ C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［9］ 報道基本一致，故鑒定化合物 10 為 5α-豆甾-3，6-二酮。

化合物 11： 無色晶體 （乙酸乙酯）； mp 217.5～ 218.4 ℃； EI-MS m/z 468 ［ M］+，1H-NMR（400 MHz， CDCl3， TMS） δ： 4.45 （1H， dd， J= 6.2， 8.5 Hz， H-3）， 0.84 （3H， s， 23-CH3）， 0.83（3H， s， 24-CH3），0.85 （3H， s， 25-CH3）， 1.67（3H， s， 26-CH3）， 0.93 （3H， s， 27-CH3） ， 0.79（3H， s，28-CH3）， 1.67 （3H， s， 30-CH3），4.67（ 1H， brs， H-29α）， 4.55 （1H， brs， H-29b ），2.04 （ 3H， s， OAc）。13C-NMR （ 100 MHz，CDCl3） δ： 38.2 （ C-1 ）， 23.9 （ C-2 ）， 81.2 （ C-3）， 38.2 （C-4）， 55.5 （C-5）， 18.2 （C-6），34.2（C-7）， 41.2 （ C-8）， 50.2 （ C-9） ， 38.2 （ C-10），20.9 （C-11 ） ， 25.2 （ C-12）， 38.0 （ C-13 ）， 42.9（C-14）， 27.7 （ C-15 ）， 35.7 （ C-16 ） ， 43.2 （ C-17），48.2 （C-18）， 48.4 （C-19）， 151.1 （ C-20），29.9 （C-21 ） ， 40.1 （ C-22）， 28.0 （ C-23 ）， 16.6（C-24）， 16.3 （ C-25 ）， 16.1 （ C-26 ） ， 14.7 （ C-27），18.1 （C-28）， 109.4 （C-29）， 19.4 （ C-30），21.5 （CH3CO）， 171.2 （CH3CO）。 以上數(shù)據(jù)與文獻 ［10］ 報道一致， 故鑒定化合物 11 為羽扇豆醇乙酸酯。

化 合 物 12： 淡 黃 色 油 狀 物，1H-NMR（400 MHz， DMSO-d6， TMS） δ： 4.24 （4H， t， J= 6.4， 6.4 Hz， H-3， 3'）， 1.65 （ 4H， m， H-4，4'）， 1.39 （4H， m，H-5， 5'），0.93 （6H， m， H-6， 6'）， 7.73 （2H， dd， J=4.8， 2.6 Hz， H-2″，5″）， 7.70 （ 2H， dd， J=4.8， 3.0 Hz， H-3″，4″），。13C-NMR （ 100 MHz，DMSO-d6） δ： 167.2（ C-1， 1'）， 65.3 （ C-3，3'）， 30.3 （ C-4，4'），18.9 （ C-5， 5'）， 13.8 （ C-6， 6'）， 128.9 （ C-2″，5″）， 132.0 （ C-3″， 4″） 。 以 上數(shù) 據(jù) 與 文獻 ［ 11 ］報道一致，故鑒定化合物12為鄰苯二甲酸二丁酯。

化合物 13： 白色粉末 （三氯甲烷 -甲醇），mp 296.6 ～298.1 ℃。1H-NMR（400 MHz， CDCl3）δ： 5.28 （1H，s，H-6 ），4.39 （ 1H， m，H-3 ），4.20 （1H， d，J=11.4 Hz，H-1'）。13C-NMR（100 MHz， CDCl3） δ： 36.7 （ C-1 ）， 29.2 （ C-2 ），76.9 （C-3） ， 39.1 （C-4）， 140.4 （ C-5）， 121.0 （C-6）， 31.3 （ C-7），31.3 （ C-8）， 49.5 （ C-9）， 36.1（C-10）， 20.5 （ C-11 ）， 38.3 （ C-12 ）， 41.8 （ C-13）， 56.1 （ C-14 ） ， 23.7 （ C-15 ）， 27.6 （ C-16 ），55.4 （ C-17 ）， 11.5 （C-18）， 19.0 （ C-19）， 35.3（C-20） ， 18.5 （ C-21 ）， 33.3 （ C-22 ）， 25.5 （ C-23）， 45.1 （ C-24）， 28.7 （ C-25）， 19.5 （ C-26），18.8 （ C-27）， 22.6 （ C-28）， 11.7 （ C-29）， 100.8（C-1'）， 73.4 （C-2'），76.7 （C-3'）， 70.1 （C-4'），76.6 （ C-5'）， 61.1 （C-6'）。 以上數(shù)據(jù)與文獻 ［12］報道一致， 故鑒定化合物13為胡蘿卜苷。

化合 物 14： 白 色 針 晶 （ 醋 酸 乙 酯），mp 139.0 ～141.2 ℃。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）； δ：5.34 （ 1H， s， H-6 ）， 3.54 （1H， m， H-3 ）， 0.99（3H， s， 19-CH3）， 0.91 （3H， d， J=6.4 Hz， 21-CH3），0.83 （3H， t， J=7.6 Hz， 29-CH3）， 0.82（3H， d， J=7.2 Hz， 26-CH3）， 0.79 （3H， d， J= 7.2 Hz， 27-CH3）， 0.68 （ 3H， s， 18-CH3）。13C-NMR （100 MHz， CDCl3） δ： 37.5 （C-1）， 31.9（C-2）， 72.0 （ C-3）， 42.6 （ C-4）， 141.0 （ C-5 ），121.9 （C-6）， 32.2 （C-7） ， 32.1 （ C-8）， 50.4 （ C-9）， 36.8 （ C-10）， 21.3 （ C-11）， 39.9 （ C-12 ），42.5 （ C-13 ）， 57.0 （ C-14 ）， 24.5 （ C-15 ）， 28.5（C-16）， 56.2 （ C-17 ）， 12.1 （ C-18 ）， 20.0 （ C-19）， 37.4 （ C-20 ） ， 19.0 （ C-21 ）， 34.2 （ C-22 ），26.4 （ C-23 ）， 46.1 （C-24）， 29.4 （ C-25）， 19.2（ C-26 ） ， 19.3 （ C-27）， 23.3 （ C-28 ）， 12.2 （ C-29）。 以上數(shù)據(jù)與文獻 ［13］ 報道一致， 故鑒定化合物 14 為 β-谷甾醇。

化合 物 15： 白 色 針 晶 （ 乙 醇）， mp 197 ～198 ℃。1H-NMR（400 MHz， CDCl3） δ： 0.79 （3H，s， 24-CH3） ， 0.83 （3H， s， 28-CH3）， 0.86 （3H， s，29-CH3）， 0.86 （3H，s， 30-CH3）， 0.94 （3H， s，25-CH3）， 0.98 （3H， s， 26-CH3） ， 1.02 （3H， s，23-CH3）， 1.10 （3H， s， 27-CH3）， 3.43 （1H，dd，J=12.2，4.2 Hz， H-3 ）， 5.26 （ 1H，brs， J= 3.9 Hz， H-12 ）。13C-NMR （ 100 MHz， CDCl3） δ：38.6 （ C-1）， 27.3 （ C-2）， 79.1 （ C-3）， 39.9 （ C-4）， 55.3 （ C-5），18.5 （C-6）， 32.6 （ C-7），39.6（C-8） ， 47.7 （C-9） ， 36.9 （ C-10） ， 23.6 （ C-11） ，121.8 （C-12） ， 145.3 （ C-13） ， 41.8 （ C-14） ， 26.1（C-15） ， 26.9 （ C-16 ） ， 32.4 （ C-17 ） ， 47.1 （C-18） ，46.7 （C-19 ），31.1 （ C-20） ， 34.8 （C-21） ，37.3 （ C-22 ） ， 28.2 （ C-23 ） ， 15.4 （ C-24 ） ， 15.7（C-25） ， 16.9 （ C-26 ） ， 25.9 （ C-27 ） ， 28.5 （ C-28） ，33.4 （C-29）， 23.7 （ C-30） 。 上 述 數(shù) 據(jù) 與 文獻 ［14］報道基本一致， 故鑒定化合物 15 為 β-香樹脂醇。

化 合 物 16： 白 色 片 狀 結(jié) 晶 （ 甲 醇 ） ， mp 61.0 ～62.3 ℃ ， 碘 熏 黃 色 。 IR（ cm-1） ：3 434，3 118， 2 917，2 849，1 702。 該 化 合 物 與十七烷酸對照品混合后熔點不變，薄層層析顯示該化合物與十七烷酸對照品 Rf值一致， 混合點樣后展開為單點， 故鑒定化合物16為十七烷酸。

［ 1 ］ Lin R C， Skaltsounis A， Seguin E， etal.Phenolic constituents of Selaginella doederleinii［ J］ .Planta Med， 1994， 60 （ 2 ）：168-170.

［ 2］ 徐嘉成.細葉卷柏的化學(xué)成分研究 ［D］.武漢： 湖北中醫(yī)學(xué)院， 2007.

［3］ 鄭曉柯，史社坡， 畢躍峰，等.卷柏中黃酮類成分研究［J］.中草藥， 2004， 35 （7）： 742-743

［ 4 ］ Zhang Y P， ShiSY， Wang Y X， et al.Target-guidedi isolation and purification of antioxidants from Selaginella sinensis by offline coupling of DPPH-HPLC and HSCCC experiments［ J］ .J Chromatogr B， 2011， 879（2） ： 191-196.

［ 5 ］ Lee C H， Kim S L， Lee K B， et al.Neuraminidase inhibitors from reynoutria elliptica［ J］ .Arch Pharm Res， 2003， 126（5）：367-374.

［6］ 楊新洲，唐春萍，柯昌強，等.蔓生百部的化學(xué)成分研究［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)， 2008， 20（3）： 399-402.

［ 7 ］ 呂泰省， 易楊華， 毛士龍， 等.鐵刀木的蒽醌類成分［J］.藥學(xué)學(xué)報， 2001， 36（7）： 547-548.

［8］ 蘇躍增，高黎明，鄭旭東，等.巴天酸模中的蒽醌類化合物［J］.西北師范大學(xué)學(xué)報： 自然科學(xué)版， 2000， 36（3）：47-49.

［9］ 馬 卓，李瓊埡.范文乾，等.空心蓮子草化學(xué)成分研究［J］.中草藥， 2008， 39（4）： 499-502.

［10］ 孫 奕， 呂阿麗， 魏 嵐， 等.石莼的化學(xué)成分研究 （Ⅱ）［J］.中國藥物化學(xué)雜志， 2008， 18（2）： 135-141.

［11 ］ Argay G， Kalman A， Kapor A， et al.Crystal structure of a mixture of lupeolacetate tautomers isolated from Hieracium plumlosum A.Kerner Asteraceae［ J］ .JMol Stuct， 1997， 435： 169-179.

［12 ］ Yu B C， Yang M C， Lee K H， et al.Norsesquiterpene and teroid constituents of Humulus japonicus［ J］ .Nat Prod Sci，2007， 13（4）： 332-336.

［13］ 楊先會， 陳尚文， 鄧世明.藥用植物雞谷香的化學(xué)成分研究［J］.時珍國醫(yī)國藥， 2009， 20（3）： 515-517.

［14］ 孟正木， 何立文.夏枯草化學(xué)成分研究［J］.中國藥科大學(xué)學(xué)報， 1995， 26（6）： 329-331.

Chem ical constituents from Selaginella involven Spring

LONG Hong-ping1， LIFu-shuang1， XU Kang-ping1， LIJing， ZHAO Lan-fang1， CHENG Fei1，YU Kai1， TAN Gui-shan1，2*
（1.School of Pharmaceutical Sciences， Central South University， Changsha 410013， China； 2.Xiangya Hospital of Central South University，Changsha 410008 ， China）

AIM To study the chemical constituents from Selaginella involven Spring.M ETHODS The chemical constituents were isolated and purified by polyamide，macroporous resin and Sephadex LH-20 column chromatography， and their structures were elucidated by chemical and spectroscopic methods.RESULTS Sixteen compounds were respectively identified as heveaflavone（1） ， apigeninyl-（4?，O，3） -kaempferol（2） ， isocryptomerin （3） ， 7 ，4'-di-O-methyl-amentoflavone（4） ， 7 ，4'， 7″，4 ?-tetra-O-methyl-amentoflavone（5 ） ， 1，3，8-trihydroxy-6-hydroxylmethyl anthraxquinone（6），1，8-dihydroxy-3-methoxy-6-methylanthraquinone（7）， emodin （8）， chrysophanol（9）， 5α-stigmast-3，6-dione（10）， lupeol acetate（11），dibutylphthalate（12）， daucosterol（ 13 ）， β-sitosterol（ 14 ）， β-amyrin （ 15 ）， heptadecanoic（ 16 ）.COUCLUSION Compound（1） - （12） are isolated from this plant for the first time.Among them compound （10）， （11） and （12） are isolated from genus Selaginella for the first time.

Selaginella involven Spring； chemical constituents； structure identification； spectroscopy

R284.1

： A

： 1001-1528（2014）05-0995-06

10.3969/j.issn.1001-1528.2014.05.024

2013-06-28

國家自然科學(xué)基金 （31370370）， 教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點專項科研基金 （20100162110057）

龍紅萍 （1984—） ， 女， 博士生。 E-mail： longhongping84@163.com

*通信作者： 譚桂山， 男， 教授， 博士生導(dǎo)師， 從事天然產(chǎn)物活性成分與新藥開發(fā)研 究， Tel： （0731） 82650395， E-mail： tgs395@ aliyun.com