丹參與丹皮配伍后的化學成分及藥理作用變化研究進展

張燕麗，孟凡佳，左冬冬

(1．黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040;2．黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

復方是中醫(yī)遣方用藥的主要形式，配伍是復方精華之所在。如何更科學更有效的闡明復方配伍機理是中藥現(xiàn)代化的主要內(nèi)容之一。但是，復方配伍后的復雜物質(zhì)變化是現(xiàn)代中藥研究的瓶頸之一。藥對作為復方配伍的最小單位，是個可以作為復方配伍研究的很好的切入點。丹參與丹皮作為雙丹配伍，史載與《施今墨對藥》，現(xiàn)已被收錄至2010版中國藥典［1］。兩者功效相須為用，是清熱活血的經(jīng)典配伍。用來治療心血瘀阻所引起的胸痹心痛等癥狀，臨床上多用于冠心病和心絞痛的治療［2］。除此之外，雙丹配伍還可以治療過敏性紫癜、糖尿病、子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔炎、風濕熱等疾病，是臨床當中使用非常廣泛的藥對之一。目前市面上常見的劑型為雙丹膠囊、雙丹口服液和雙丹顆粒。

1 丹參和丹皮的化學成分和藥理作用

1．1 丹參的化學成分和藥理作用

迄今為止，丹參中已得到50多種化學成分，主要是脂溶性成分和水溶性成分兩大類。脂溶性成分多數(shù)是二萜類化合物，包括多種菲醌衍生物(Phenanthraquinone)，如丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、丹參酮ⅡB、隱丹參酮、二氫丹參酮Ⅰ、異丹參酮、異丹參酮Ⅱ、異隱丹參酮、丹參新酮等。水溶性成分多為原兒茶醛(Protocatechuicaldehyde)及丹參素(Danshensu)［β－(3、4－二羥基苯基)乳酸］等。此外，尚含有β－谷甾醇等化學成分［3］。

中醫(yī)學理論認為，丹參具有活血化瘀、清熱解毒、除煩、鎮(zhèn)痛、通經(jīng)、鎮(zhèn)靜安神、涼血消腫等功效［1］?，F(xiàn)代藥理研究認為，丹參具有擴張冠脈、增加冠脈流量、防止心肌缺血和心肌梗塞、改善微循環(huán)、保護心臟的作用，能抑制凝血、激活纖溶、穩(wěn)定紅細胞膜、提高機體耐缺氧能力、抗脂質(zhì)過氧化和清除自由基，增加肝臟血流量、保護肝損傷細胞、抗肌纖維化、抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)及消炎抗菌等作用［4］。

1．2 丹皮的化學成分和藥理作用

牡丹根及根皮中含有丹皮酚(Paeonol)、丹皮酚苷(Paeonoside)、丹皮酚原苷丹皮酚新苷(Apiopaeonoside)、芍藥苷(Paeoniflorin)、苯甲酰芍藥苷(Benzoylpaeoniflorin)、氧化芍藥苷(Oxypaeoniflorin)、2，3－二羥基－4－甲氧基苯乙酮、2，5－二羥基－4－甲氧基苯乙酮、3－羥基－4－甲氧基苯乙酮、Paeonilide、揮發(fā)油及植物甾醇等［5］。此外，牡丹皮還含有豐富的微量元素。

中醫(yī)學理論認為，丹皮具有清熱涼血和活血化瘀等功效?，F(xiàn)代臨床研究證實，牡丹皮具有抗病原微生物作用、抗心肌缺血作用［6］。另外，還具有抗炎作用、保護肝臟及降血糖、增強機體免疫力的作用［7］。

2 雙丹配伍后的化學成分及含量變化

胡興江［8］等建立了一種HPLC－MS分析方法，將丹參和丹皮配伍，用水煎液提取，進行主要化學成分的鑒定和歸屬，并且對配伍前后化學成分的含量變化也做了初步的總結(jié)和歸納。實驗數(shù)據(jù)表明，雙丹配伍的水煎液中共有19中成分，其中有11個是來自中藥丹參的化學成分，8種來自丹皮的化學成分。兩者配伍后化學成分的含量高于單煎，其中鞣質(zhì)類化合物的含量有所降低。

張會亮［9］等利用新興的活性指導藥物成分篩選的方法對雙丹配伍后的活性成分進行了篩選，實驗選擇LDH(LDH是細胞內(nèi)源性酶)作為檢測指標，對丹參和丹皮共51個組分進行篩選。結(jié)果顯示，丹參中有2個脂溶性成分，1個水溶性成分，丹皮有4個脂溶性成分2個水溶性成分對乳鼠心肌細胞缺氧復氧損傷有保護作用。后經(jīng)LC/MS/MS/MS進一步分析鑒定。帶到的這些成分是丹參醛類、丹參酮類、丹參醇類以及醌類物質(zhì)，如丹參醛、丹參酮醇B、二氫丹參新酮、二氫新隱丹參酮等。

3 雙丹配伍后的藥理作用研究

袁穎［10］對雙丹配伍后的清熱活血作用進行了實驗研究。以大腸桿菌內(nèi)毒素所致熱毒血瘀證模型家兔為研究對象，選用發(fā)熱效應、血液黏度、紅細胞壓積、血沉以及血液凝集作為觀察指標，對單味藥組、配伍組分別進行了觀察。結(jié)果表明，雙丹合煎可以抑制家兔模型的體溫上升，能明顯抑制紅細胞壓積減少及抑制血沉增快，對全血黏度、血漿黏度的有改善作用，對KPTT、PT的縮短均有對抗作用，能明顯抑制Fg的增加。實驗說明雙丹合煎具有優(yōu)于單味藥的清熱活血作用。

4 雙丹方入血成分分析及藥代動力學影響

潘堅揚［11］等以灌服雙丹顆粒的大鼠血漿樣品作為分析對象，采用液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用方法進行分析，鑒定出了雙丹顆粒入血后的16中成分。并且通過實驗證實了其中5中代謝產(chǎn)物來自丹皮酚，并且推測和驗證了他們的化學結(jié)構(gòu)。

付志玲［12］等使用反相高效液相色譜法，4－羥基苯甲酸為內(nèi)標，對從血漿中提取的丹參素的血藥濃度進行檢測。結(jié)果表明，雙丹配伍后給藥使得丹參中的丹參素藥動學參數(shù)T1/2α、AUC(0～∞)、Cmax比單獨使用丹參給藥時明顯增大，得到了雙丹配伍可以促進丹參素的吸收利用，使作用時間延長，生物利用度提高。

劉春芝等［13］采用GC分析法，以正常家兔為對象，研究雙丹配伍后家兔體內(nèi)丹參對丹皮藥代動力學影響。實驗數(shù)據(jù)表明，配伍后，丹皮酚吸收入血速度加快，消除基本不變，作用時間也有所延長。同時檢測和推測了血漿中產(chǎn)生代謝的新物質(zhì)，為丹皮酚的代謝物3，4－二羥基苯乙酮。

5 分析與展望

“藥有個性之所長，方有合群之妙用”。復方配伍是中醫(yī)潛方用藥的靈魂之所在。藥對作為復方的最小單位在復方配伍研究中有其獨特的地位和優(yōu)勢。丹參和丹皮作為藥對相須使用的經(jīng)典配伍，在單方與配伍的研究過程中，通過藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理作用的變化比較，可以有利的闡明丹參與丹皮配伍后其化學成分的含量高于單煎，其清熱活血的功效也會增強。這樣的實驗結(jié)論可以有力的佐證方劑配伍理論的增效機制。除此之外，丹參與丹皮配伍后，通過藥代動力學的研究，丹參素和丹皮酚的生物利用度都有所提高，充分證明了復方配伍使有效成分增溶，助溶的相互作用的發(fā)生。

在丹參與丹皮的配伍研究中，為了更好的反應兩者配伍后的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理學作用變化，應該從合理的處理樣品開始，定量的控制處理條件，減少偶然誤差，以使配伍前后的變化更具具有可比性。另外，對分析方法而言，丹參和丹皮配伍后，同一類型成分的變化，微量成分的變化，這些都需要一個高分離強度、高分離容量、高靈敏度和強定性能力的方法和技術(shù)。液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)應用在雙丹配伍的分析中，有其獨特的優(yōu)勢。

“中醫(yī)秘而不傳在劑量”。復方配伍的研究除了定性還要定量。丹參和丹皮的配伍比例變化對藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和體內(nèi)活性成分代謝的影響也是研究雙丹配伍機理的不可或缺的研究內(nèi)容，這需要依靠更多更科學的內(nèi)容和數(shù)據(jù)的積累，是雙丹配伍今后的研究方向。

［1］ 中華人民共和國藥典委員會．中華人民共和國藥典(一部)［S］．北京:化學工業(yè)出版社，2000．

［2］ 高風英，王洪慧．雙丹顆粒治療冠心病心絞痛102例臨床觀察［J］．黑龍江醫(yī)學，2005，29(9):722．

［3］ 康永．中藥藥理學［M］．北京:科學出版社，2001．

［4］ Lam FF，Yeung JH，Cheung JH，et al．Pharmacological evidence for calcium channel Inhibition by danshen(Salvia miltiorrhiza)on rat isolated fermoral aetery［J］．J Cardiovasc Phrmacol，2006，47(1):139－145．

［5］ 陳惠黎，李茂深，朱運松．生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能［M］．上海:上海醫(yī)科大學出版社，1999:307－312．

［6］ Pegram MD，Slam on DJ，Dennis JS，et al．Combination therapy with trastuzumab(herceptin)and cisplat in for chemoresistintant metastatic breast cancer:evidence for receptor－enhanced chemosensitive［J］．Semin Oncol，1999，26:82－89．

［7］ Shon YH，Nma KS．Protective effct of Moustan Cortex extract on acetatminoPhen－induced hePatotoxicity in mice［J］．J Ethnopharmacol，2004，90(2－3):415－419．

［8］ 胡興江．HPLC－MS研究丹參與丹皮配伍的化學成分［J］．藥物分析雜志，2007，27(5):621－624．

［9］ 張會亮．復方雙丹活性組分篩選及骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)研究［D］．濟南:山東師范大學，2006．

［10］ 袁穎．丹皮、丹參藥對清熱活血作用的實驗研究［J］．上海中醫(yī)藥雜志，2005，39(1):54－55．

［11］ 潘堅揚．雙丹方入血成分分析及藥物動力學研究［D］．杭州:浙江大學，2006．

［12］ 付志玲，劉春芝，房敏峰，等．雙丹方中丹皮對丹參藥代動力學的影響［J］．中成藥，2010，32(1):62－64．

［13］ 劉春芝．雙丹方中丹參對丹皮藥代動力學影響研究［D］．西安:西北大學，2009．