分子生物學(xué)和組織工程學(xué)在皮膚潰瘍治療中的應(yīng)用

熊 浩 蘭海梅

分子生物學(xué)和組織工程學(xué)在皮膚潰瘍治療中的應(yīng)用

熊 浩 蘭海梅?

本文對(duì)近10年來(lái)分子生物學(xué)和組織工程學(xué)在皮膚潰瘍治療中的應(yīng)用做一綜述。

皮膚潰瘍； 治療

1 前列腺素制劑

前列腺素具有很好的抗炎及改善循環(huán)作用，不過(guò)直接應(yīng)用前列腺素有很多缺點(diǎn)，例如快速失活、需要很大劑量、需要藥物控制釋放系統(tǒng)等。1前列地爾脂微球制劑(Lipo－PGE1)作為一種新型前列腺素制劑，則可以避免上述缺點(diǎn)。Hirogki等將10μg/2 m L的Lipo－PGE1注射液通過(guò)靜脈內(nèi)注射治療皮膚潰瘍患者，每天1次，治療2周后，治療組的潰瘍面積明顯比對(duì)照組縮小，同時(shí)血液中的炎性介質(zhì)例如IL－6、CRP等均有明顯的下降。全身運(yùn)用前列腺素的脂微球制劑能夠有效的控制潰瘍的進(jìn)展，并促進(jìn)潰瘍愈合。

2 生長(zhǎng)因子類藥物

生長(zhǎng)因子是一類通過(guò)與特異的、高親和的細(xì)胞膜受體結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)與其他細(xì)胞功能等多效應(yīng)的多肽類物質(zhì)，存在于血小板和各種成體與胚胎組織及大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞中，對(duì)不同種類細(xì)胞具有一定的專一性。

2.1 重組人表皮生長(zhǎng)因子(Recombinant Human Epidermal Growth Factor，rhEGF) 能促進(jìn)表皮細(xì)胞的分化、增殖、分泌和移行，促進(jìn)新生血管的形成，加速潰瘍面肉芽組織的增生和表皮細(xì)胞的增殖，從而縮短潰瘍面的愈合時(shí)間。陳杰翔等2運(yùn)用重組人表皮生長(zhǎng)因子聯(lián)合前列地爾作用于糖尿病潰瘍創(chuàng)面，潰瘍面積減小、愈合時(shí)間縮短、創(chuàng)面動(dòng)態(tài)愈合率上升(P＜0.01)，且兩者聯(lián)合治療的效果優(yōu)于重組人表皮生長(zhǎng)因子和前列地爾單獨(dú)治療(P＜0.01)。

2.2 神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nerve growth factor，NGF) 是一種內(nèi)源性的生長(zhǎng)因子，它不僅對(duì)神經(jīng)細(xì)胞有調(diào)節(jié)作用，對(duì)皮膚組織同樣也具有調(diào)節(jié)作用，作用的機(jī)制可能是促進(jìn)角化細(xì)胞的增殖和血管的再生。3NGF用于治療皮膚潰瘍，已有很多相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。Aloe等4分析了近10年的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，證實(shí)了NGF能夠促進(jìn)理化損傷、外科損傷和自身免疫性疾病等因素引起的潰瘍的愈合，且無(wú)副作用。

2.3 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF) 能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和血管的再生，加強(qiáng)vEGF的表達(dá)，同時(shí)也是血管再生中最重要的生長(zhǎng)因子。Tanigawa等5應(yīng)用中心載有bFGF的靜電絲治療皮膚潰瘍，發(fā)現(xiàn)其對(duì)皮膚的重建和再生有促進(jìn)作用。Ohura等6運(yùn)用bFGF治療壓力性潰瘍，23組對(duì)照實(shí)驗(yàn)分別在分泌物量、潰瘍的深度和潰瘍的邊緣情況等六方面進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果提示bFGF治療的實(shí)驗(yàn)組潰瘍愈合速率快于對(duì)照組。Nakada等7聯(lián)合高壓氧和堿性纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子，每天給患者90 min的2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓的高壓氧療，再給潰瘍面每天3次局部應(yīng)用bFGF，平均2.6個(gè)月后，7例患者中5例潰瘍?nèi)?例潰瘍面積明顯縮小，并降低了各項(xiàng)單獨(dú)應(yīng)用的副作用。

3 自體移植

自體移植因取材容易，排斥反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)，成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。在皮膚潰瘍治療方面，自體移植血漿及各類細(xì)胞治療皮膚潰瘍彰顯了良好的效果。

3.1 富含血小板的血漿(platelet rich plasma，PRP) PRP中含有大量的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子，它們能夠促進(jìn)真皮成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化，而且血漿中含有大量的抗炎介質(zhì)。Kim等8應(yīng)用PRP治療1例足背部皮膚潰瘍患者，取患者的自體外周血，經(jīng)過(guò)抗凝和離心后得到PRP。將PRP涂在患處，表面覆蓋無(wú)菌劑，在治療的過(guò)程中，潰瘍明顯出現(xiàn)血管化，長(zhǎng)出新生肉芽組織。7次治療后，潰瘍充滿了新生肉芽組織，并且有一塊新生上皮組織。2個(gè)月后，整個(gè)潰瘍愈合。Cervelli等9應(yīng)用PRP治療下肢難治性皮膚潰瘍，在膠原蛋白治療的基礎(chǔ)上每天給予2次的PRP治療，實(shí)驗(yàn)組潰瘍上皮發(fā)生率明顯快于對(duì)照組。

解析：分析已知反應(yīng)物和產(chǎn)物,結(jié)合題意“調(diào)節(jié)pH≈3”可知缺項(xiàng)是 H+,Ce3+→Ce(OH)4,失1 e-,H2O2→Ce(OH)4,得2 e-,根據(jù)得失電子守恒,Ce3+前的化學(xué)計(jì)量數(shù)為2,H2O2前的化學(xué)計(jì)量數(shù)為1,再根據(jù)電荷守恒,H+前的化學(xué)計(jì)量數(shù)為6,最后觀察可知H2O2前的化學(xué)計(jì)量數(shù)為6,配平的方程式為2Ce3++H2O2+6H2O==2Ce(OH)4↓+6H+。

3.2 自體單核細(xì)胞移植(auto－mononuclear cells transplantation，auto－MCT) Sugihara等10從患者外周血中提取單核細(xì)胞，然后將含單核細(xì)胞的溶液肌注到潰瘍周圍，每處0.3～0.5 mL，1個(gè)月后潰瘍面積明顯減少，2個(gè)月后潰瘍愈合。Huang等11運(yùn)用單核細(xì)胞治療皮膚潰瘍，實(shí)驗(yàn)組的17例患者15例痊愈，1例顯效，1例無(wú)效，對(duì)照組10例患者7例痊愈，3例無(wú)效，在治療時(shí)間上，實(shí)驗(yàn)組遠(yuǎn)遠(yuǎn)短于對(duì)照組。

3.3 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mononuclear cells，BMMNCs) 骨髓間充質(zhì)細(xì)胞是近些年來(lái)的研究熱點(diǎn)。它具有分化為多種細(xì)胞的潛能，容易獲得，在體外能夠快速增殖等優(yōu)點(diǎn)。12Dash等13在血栓性閉塞性脈管炎和糖尿病引起的皮膚潰瘍的治療中，運(yùn)用骨髓間充質(zhì)細(xì)胞移植治療12周后，潰瘍面積分別從5.04±0.7 cm2減為1.48±0.56 cm2和7.26±1.41 cm2減為2±0.98 cm2。Lu等14應(yīng)用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療糖尿病性下肢皮膚潰瘍，6周后潰瘍明顯愈合，最后實(shí)現(xiàn)痊愈。

4 人工皮膚

人工皮膚是一種皮膚修復(fù)材料和替代品，已經(jīng)在臨床應(yīng)用多年。隨著分子生物學(xué)和組織工程學(xué)的發(fā)展，人工皮膚的研究已從原來(lái)單純的創(chuàng)傷敷料和人工皮膚向活性人工皮膚的方向發(fā)展，雙層復(fù)合人組織工程皮膚是目前的研究熱點(diǎn)。Yao等15運(yùn)用Integra人工復(fù)合皮膚治療糖尿病性下肢潰瘍，12周后，10例患者中潰瘍面積平均縮小了95%，其中7例潰瘍完全愈合，并且沒(méi)有新發(fā)的潰瘍。Coto－Segura等16運(yùn)用組織工程皮膚治療成功治愈1例難治性下肢靜脈潰瘍。

5 小結(jié)

從上世紀(jì)90年代以來(lái)，分子生物學(xué)和組織工程學(xué)飛速發(fā)展，對(duì)皮膚潰瘍的治療做出了巨大的貢獻(xiàn)。治療方法從宏觀深入到微觀，治療效果大大提高，縮短了病程，降低了副作用。不過(guò)與傳統(tǒng)方法相比，新型的治療方法價(jià)格昂貴，而且對(duì)醫(yī)療水平要求很高，難以普及，如何降低成本及進(jìn)一步普及是對(duì)新療法的一個(gè)挑戰(zhàn)。

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2陳杰翔，安宏元.重組人表皮生長(zhǎng)因子聯(lián)合前列地爾作用于糖尿病潰瘍創(chuàng)面.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2011，15 (50):9393－9396.

3 TuveriMA，Triaca V，Aloe L.The nerve growth factor induces cutaneous ulcer healing in"non－responder"tranplanted skin. Ann Ist Super Sanita，2006，42(1):94－96.

4Aloe L，Tirassa P，Lambiase A.The topical application of nerve growth factor as a pharmacological tool for human corneal and skin ulcers.Pharmacol Res，2008，57(4):253－258.

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16Coto－Segura P，Vazquez－Lopez F，Garcia－Perez E，etal.Potentanalgesic effectof tissue－engineered skin in a terminal patientwith severe leg ulcer pain.Dermatol Surg，2008，34(10): 1414－1416.

(收稿:2013－09－26)

M olecular biology and tissue engineering in the treatment of skin ulcer

XIONG Hao，LAN Hai-mei.Department of Dermatology，Nanfang Hospital，Southern Medical University，Guangzhou，510515

skin ulcer；therapy

]This paper aims to summarize themolecular biology and tissue engineering in the treatment of skin ulcer in the latest 10 years.

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):2010B030700053)

南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院皮膚科，廣州，510515

?通信作者

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