虎杖蒽醌提取物對小鼠免疫功能的影響

■王 珅 畢聰明 陳 強 梁軍生 肖銀霞

(遼寧醫(yī)學院，遼寧錦州 121000)

虎杖又名酸筒桿、酸桶蘆、大接骨、斑莊根，產(chǎn)自于陜西南部、甘肅南部、華東、華中、華南等地。根狀莖供藥用，有活血、散瘀、通經(jīng)、鎮(zhèn)咳的功效，研究表明，虎杖蒽醌注射液對麻醉兔有明顯降壓作用，白藜蘆醇對口飼過氧化玉米油所致大鼠肝損害有治療作用；大黃素、7-乙?；?2-甲氧基-6-甲基-8-羥基-1，4-萘醌具有抗菌活性；虎杖可降低實驗性動物糖尿病的發(fā)生率和死亡率；虎杖煎劑對外傷出血有明顯止血作用，內(nèi)服對上消化道出血也有止血作用[1-3]。許多中藥提取物均是一種穩(wěn)定性、安全性和環(huán)保性良好的抗生素替代物，但其在畜禽飼料中的適宜用量和最佳使用時間尚未確定。本試驗研究虎杖蒽醌提取物對小鼠免疫功能的影響，以期對飼料添加劑的研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗材料

虎杖提取物，由遼寧醫(yī)學院畜牧獸醫(yī)學院藥理教研室提供，含量為67%。

1.1.2 試驗動物及設計

采用完全隨機分組試驗設計[4-7]，選用80只昆明小鼠，日齡和體重相近，試驗前基礎日糧預飼1周，隨機分為4個組，每組4個重復，每個重復5只小鼠，試驗期為28 d。試驗分組及飼料配方見表1及表2。

表1 試驗分組

表2 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平（%）

1.1.3 基礎日糧

參照美國NIH-41標準，并結合生產(chǎn)實踐配制基礎飼糧，由遼寧醫(yī)學院實驗動物中心提供，其組成及營養(yǎng)水平見表2。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗在遼寧醫(yī)學院畜牧獸醫(yī)學院實驗中心進行，在小鼠進籠前，對房舍進行全面刷洗，消毒，正試期小鼠自由采食，自動飲水器供水。

1.3 測定指標及方法

試驗第28 d，小鼠斷尾采血1 ml凝固后12 000 r/min離心1 min，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆?，用于測定血清免疫球蛋白含量。斷頸處死小鼠，剝離脾臟、胸腺、胰腺去掉筋膜及脂肪組織，置電子天平稱量，計算出各器官相對體重的比值即為免疫器官指數(shù)。

1.3.1 免疫器官指數(shù)測定

測定試驗第28 d時小鼠的免疫器官指數(shù)，即胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)，計算公式如下：

胸腺指數(shù)=胸腺濕重（mg）/活體重（g）×10；

脾臟指數(shù)=脾臟濕重（mg）/活體重（g）×10。

1.3.2 血清免疫球蛋白IgG、IgE含量測定

IgG、IgE含量采用雙抗體夾心ELISA法，完全按照試劑盒說明書操作。

1.4 數(shù)據(jù)處理

應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件中的One-way ANOVA進行單因素方差分析，LSD進行多重比較，P＜0.01為差異極顯著，P＜0.05為差異顯著，數(shù)據(jù)用“平均值±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 虎杖蒽醌提取物對免疫器官指數(shù)的影響(見表3)

表3 虎杖蒽醌提取物對小鼠免疫器官指數(shù)的影響

從表3可以看出，添加不同劑量的虎杖蒽醌提取物使脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)都有明顯提高。與對照組相比較，試驗Ⅳ組數(shù)值上升最高，脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)分別提高了23.66%和46.73%(P＜0.05)。結果顯示，與對照組相比，三個虎杖蒽醌提取物添加組小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均差異顯著(P＜0.05)；三個不同添加劑量組間比較無顯著性差異(P＞0.05)，表明虎杖蒽醌提取物可以使脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)增加，但增加劑量對免疫效果沒有明顯影響。

2.2 虎杖蒽醌提取物對小鼠免疫球蛋白含量的影響（見表4）

表4 虎杖蒽醌提取物對小鼠免疫球蛋白含量的影響(ng/ml)

從表4可以看出，血清中IgG的含量隨著飼料中虎杖蒽醌提取物的增加而升高，28 d試驗Ⅲ組較對照組提高了41.72%，但試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05）；試驗的第28 d血清中IgE含量試驗Ⅲ組較對照組提高了62.46%，但試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

本研究主要比較了不同添加劑量的虎杖蒽醌提取物對小鼠胸腺、脾臟指數(shù)的影響，以及對IgG和IgE含量的影響。胸腺及脾臟這兩種器官在免疫學中占據(jù)極其重要的位置，免疫功能的強弱與這兩個免疫器官的重量變化有著密切關系。胸腺為機體的重要免疫器官，主要介導細胞免疫反應，對T淋巴細胞的成熟至關重要，為周圍淋巴器官正常發(fā)育及機體免疫所必需，能產(chǎn)生和分泌胸腺素和激素類物質以及能儲存分泌免疫細胞和免疫分子等。脾臟是機體最大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量淋巴細胞和巨噬細胞，是T、B淋巴細胞居留增殖以及淋巴細胞接受抗原刺激、發(fā)生特異性免疫應答的場所。脾臟還產(chǎn)生免疫活性細胞而發(fā)揮免疫功能，是抗體生成的器官。

4 結論

本研究證明，虎杖蒽醌提取物對小鼠免疫器官有顯著影響，能夠改善提高機體重要免疫器官胸腺和脾臟的指數(shù)，增加免疫球蛋白IgG和IgE的含量。飼料中添加0.8%的虎杖蒽醌提取物提高小鼠的免疫功能的效果最好。

試驗結果表明,虎杖蒽醌提取物可以作為一種飼料添加劑進行開發(fā),但其確切作用機制尚需進一步研究。