發(fā)酵飼料對(duì)斷奶仔豬腸道腸黏膜形態(tài)的影響

■李旋亮 李建濤 潘樹(shù)德 吳長(zhǎng)德

(1.盤(pán)錦市雙臺(tái)子區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，遼寧盤(pán)錦124000；2.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng)110866；3.沈陽(yáng)愛(ài)特杰牧業(yè)有限公司，遼寧沈陽(yáng)110165）

隨著養(yǎng)豬生產(chǎn)集約化程度的不斷提高，仔豬早期斷奶變得越來(lái)越重要。但早期斷乳易造成仔豬腸道功能紊亂，仔豬腸道絨毛高度下降，隱窩深度加深，從而使仔豬消化道消化吸收的面積減少，進(jìn)而影響仔豬生長(zhǎng)性能（徐春蘭等，2004），誘發(fā)“仔豬斷奶應(yīng)激綜合癥”（鄭秋鋒，2002）。而發(fā)酵飼料是以飼料為基礎(chǔ)物質(zhì)，添加有益微生物使其大量繁殖，先進(jìn)行體外消化，分解飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)，當(dāng)動(dòng)物采食后，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得到充分吸收，有益微生物又可定植在腸道中，從而改善仔豬的腸道結(jié)構(gòu)，彌補(bǔ)了早期斷奶帶來(lái)的缺點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

發(fā)酵用菌液成分：含有乳酸菌、枯草芽孢桿菌，總菌數(shù)5×1010CFU/g，菌液和基礎(chǔ)日糧均由沈陽(yáng)愛(ài)特杰牧業(yè)有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物和日糧配制

選用28日齡美系大白和長(zhǎng)白斷奶仔豬27頭，按體重相近原則隨機(jī)分為3個(gè)處理，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭仔豬。試驗(yàn)Ⅰ組即對(duì)照組，含有基礎(chǔ)日糧；試驗(yàn)Ⅱ組即水拌發(fā)酵組，含有基礎(chǔ)日糧+20%過(guò)夜水；試驗(yàn)Ⅲ組為菌液發(fā)酵組，含基礎(chǔ)日糧+20%過(guò)夜水+菌液?；A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。預(yù)飼期為7 d，試驗(yàn)期為15 d。仔豬采用分欄飼養(yǎng)，自由采食和飲水。豬舍溫度保持在28℃左右，仔豬由沈陽(yáng)市畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所種豬場(chǎng)提供。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

迅速截取十二指腸(端部)、空腸(膽總管入口遠(yuǎn)端10 cm)、回腸(盲腸交界處近端10 cm)各1 cm及盲腸盲端1 cm，放入10%中性福爾馬林溶液中固定，經(jīng)洗脫、透明、浸臘、包埋等處理后，在室溫下切成5 μm的十二指腸、空腸、回腸和盲腸組織結(jié)構(gòu)的切片，HE染色。在光學(xué)顯微鏡下選5個(gè)典型視野(絨毛完整，走向平直)，用目鏡測(cè)微尺測(cè)量每個(gè)視野中絨毛高度、隱窩深度、黏膜厚度，并計(jì)算絨毛高度與隱窩深度的比值。

1.4 數(shù)據(jù)分析

將試驗(yàn)所測(cè)得的各項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)整理及作圖（使用Excel2003軟件），試驗(yàn)結(jié)果用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析和鄧肯氏法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵飼料對(duì)早期斷奶仔豬腸道絨毛高度的影響(見(jiàn)表2)

表2 發(fā)酵飼料對(duì)斷奶仔豬腸絨毛高度的影響(μm)

從表2可以看出，對(duì)于十二指腸絨毛高度，各組間差異不顯著(P＞0.05)；對(duì)于空腸的絨毛高度，Ⅱ組、Ⅲ組比Ⅰ組分別增加了8.1%、14.48%，差異顯著(P＜0.05)；對(duì)于回腸的絨毛高度，Ⅲ組比Ⅰ組增加了8.6%，差異顯著(P＜0.05)；對(duì)于盲腸的絨毛高度，Ⅱ組、Ⅲ組比Ⅰ組分別增加了18.53%、47.57%，差異顯著(P＜0.05)；對(duì)于結(jié)腸的絨毛高度，Ⅱ組、Ⅲ組比Ⅰ組分別增加了36.33%、53.95%，差異顯著(P＜0.05)。

2.2 發(fā)酵飼料對(duì)早期斷奶仔豬腸道隱窩深度的影響(見(jiàn)表3)

表3 發(fā)酵飼料對(duì)斷奶仔豬腸隱窩深度的影響(μm)

從表3中可以看出，對(duì)于十二指腸的隱窩深度，Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組間差異顯著(P＜0.05)；對(duì)于空腸的隱窩深度，Ⅲ組比Ⅰ組、Ⅱ組分別低12.4%、18.18%，差異顯著(P＜0.05)；回腸的隱窩深度各組間差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 絨毛高度與隱窩深度比值的比較(見(jiàn)表4)

表4 絨毛高度與隱窩深度比值的比較

從表4可以看出，對(duì)于十二指腸的V/C值，各組間差異顯著(P＜0.05)；對(duì)于空腸的V/C值，Ⅲ組比Ⅰ組、Ⅱ組分別提高了31.84%、28.64%，差異顯著(P＜0.05)；回腸的V/C值各組間差異不顯著(P＞0.05)。

2.4 發(fā)酵飼料對(duì)早期斷奶仔豬腸道黏膜厚度的影響(見(jiàn)表5)

表5 發(fā)酵飼料對(duì)斷奶仔豬腸黏膜厚度的影響(μm)

從表5中可以看出，對(duì)于十二指腸的黏膜厚度，各組間差異不顯著(P＞0.05)；對(duì)于空腸的黏膜厚度，Ⅱ組和Ⅲ組比Ⅰ組分別提高了50.18%、53.64%，差異顯著(P＜0.05)；對(duì)于回腸的黏膜厚度，Ⅱ組和Ⅲ組比Ⅰ組分別提高了18.30%、15.01%，差異顯著(P＜0.05)；對(duì)于盲腸的黏膜厚度，各組間差異不顯著(P＞0.05)；對(duì)于結(jié)腸的黏膜厚度，Ⅱ組和Ⅲ組比I組分別提高了12.73%、14.59%，差異顯著(P＜0.05)。

3 討論

3.1 發(fā)酵飼料對(duì)早期斷奶仔豬小腸絨毛高度的影響

小腸絨毛是斷奶仔豬養(yǎng)分吸收的主要部位，絨毛形態(tài)的變化可導(dǎo)致絨毛表面積的改變，影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。Caspary(1992)報(bào)道，絨毛高度增加后會(huì)使小腸接觸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的面積增大，從而增強(qiáng)小腸對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，所以腸絨毛的形態(tài)直接和機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育有關(guān)。腸黏膜表面有無(wú)數(shù)絨毛(長(zhǎng)度約為300～500 μm)，因而極大地增加了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收面積。Hampson(1986)、顧憲紅等(1999)報(bào)道，仔豬斷奶后腸道黏膜萎縮、上皮絨毛變短、隱窩變深。R.H.Scholten等（2002）在斷奶仔豬飼料中添加發(fā)酵小麥，結(jié)果表明，飼喂一部分發(fā)酵液，可以防止斷奶后黏膜結(jié)構(gòu)的不良變化，明顯增加小腸的絨毛高度。Cera(1988a)的研究發(fā)現(xiàn)，斷奶日齡越早，對(duì)腸絨毛高度的影響越大，恢復(fù)其高度需要的時(shí)間就越長(zhǎng)。楊全明（1999）的試驗(yàn)結(jié)果證明，斷奶后雖然小腸絨毛沒(méi)有明顯變短，但是小腸發(fā)生了明顯的變化，表現(xiàn)為變形、萎縮和表面粗糙，這可能導(dǎo)致小腸的吸收不良。而在本試驗(yàn)條件下，仔豬日糧經(jīng)過(guò)發(fā)酵，仔豬空腸、回腸、盲腸和結(jié)腸絨毛長(zhǎng)度有增加的趨勢(shì)，說(shuō)明飼料經(jīng)過(guò)發(fā)酵后有助于仔豬腸絨毛的增長(zhǎng)。

3.2 發(fā)酵飼料對(duì)早期斷奶仔豬隱窩深度的影響

隱窩即為小腸腺（黃奕生，1990），是小腸上皮在絨毛根部下陷到固有膜而形成的單管狀腺，與絨毛上皮相連接，并開(kāi)口于絨毛之間，隱窩內(nèi)的未分化細(xì)胞是腸腺和絨毛上皮細(xì)胞的再生來(lái)源，即未分化細(xì)胞自隱窩向絨毛頂端不斷移動(dòng)，逐漸成熟，從而使絨毛頂端不斷脫落的細(xì)胞得以增生補(bǔ)充。隱窩內(nèi)未分化細(xì)胞的數(shù)量及所處位置的深淺對(duì)于其自身以及保持腸絨毛的完整形態(tài)和正常機(jī)能有重要的作用。因此，隱窩增生表明細(xì)胞增殖率增加，細(xì)胞成熟度下降。顧憲紅等（1999）的試驗(yàn)結(jié)果表明,腸道黏膜上皮絨毛長(zhǎng)度變短，隱窩深度增高意味著絨毛吸收細(xì)胞減少，分泌細(xì)胞增多，腸道黏膜萎縮，造成吸收能力下降；未被消化吸收的物質(zhì)不僅使腸道中滲透壓升高，引起滲透性腹瀉，而且使腸道中大腸桿菌等腐敗菌大量繁殖。本試驗(yàn)條件下，菌液發(fā)酵組十二指腸和空腸隱窩深度明顯低于對(duì)照組，說(shuō)明飼喂發(fā)酵飼料后，可以使仔豬腸絨毛隱窩深度變淺，表明細(xì)胞成熟率上升，分泌功能增強(qiáng)（王子旭等，2003；韓正康，1991）。

3.3 發(fā)酵飼料對(duì)早期斷奶仔豬絨毛高度和隱窩深度比值的影響

絨毛高度/隱窩深度的值可綜合反映小腸的功能狀況。比值下降，表示黏膜損傷，消化吸收能力降低，發(fā)生腹瀉，生長(zhǎng)緩慢等現(xiàn)象；比值上升，則黏膜改善，消化吸收功能增強(qiáng)，腹瀉率下降，生長(zhǎng)加快。斷奶后由于應(yīng)激和飼料抗原引發(fā)的過(guò)敏反應(yīng)，可引起不同程度的絨毛變短、隱窩加深以及絨毛高度與隱窩深度的比值下降（陳代文等，1996）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，菌液發(fā)酵組的十二指腸和空腸的V/C值明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明飼喂發(fā)酵飼料可以增加V/C的值，使腸道成熟細(xì)胞增多，細(xì)胞的成熟率升高，養(yǎng)分得到充分吸收。

3.4 發(fā)酵飼料對(duì)早期斷奶仔豬腸道黏膜厚度的影響

腸道的屏障功能主要由腸黏膜屏障來(lái)實(shí)現(xiàn)。腸黏膜屏障包括機(jī)械屏障、生物屏障、化學(xué)屏障、免疫學(xué)屏障和腸黏膜固有層分子篩等部分。其中，腸黏膜機(jī)械屏障由腸黏膜上皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞側(cè)面的細(xì)胞連接、上皮基膜和上皮表面的細(xì)胞衣組成，它們構(gòu)成了機(jī)體免疫系統(tǒng)的第一道防線（Reynolds J V，1996；Swank G M等，1996；Yin Y J等，2002）。因此，腸黏膜上皮結(jié)構(gòu)的完整性與腸黏膜機(jī)械屏障功能，乃至機(jī)體的免疫功能有密切關(guān)系。本試驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)酵飼料可以顯著地提高空腸、回腸、結(jié)腸的黏膜厚度，從而起到保護(hù)作用。

4 結(jié)論

綜上可知，枯草芽孢桿菌作為一種好氧有益菌，可與腸道需氧菌競(jìng)爭(zhēng)氧氣，抑制需氧菌的生長(zhǎng)。而乳酸桿菌在其生長(zhǎng)過(guò)程中，產(chǎn)生許多對(duì)需氧菌有害的物質(zhì)，如揮發(fā)性脂肪酸(甲酸、乙酸、丙酸及丁酸)和乳酸，降低其微生物環(huán)境內(nèi)的pH值，阻止對(duì)酸敏感的細(xì)菌大量繁殖;乳酸菌還可以產(chǎn)生天然的抗生素，如乳鏈球菌可產(chǎn)生乳鏈球菌肽(nisin)多種抗菌蛋白物質(zhì)，且不同抗菌物質(zhì)的成分和抗菌范圍不同。另外，乳酸菌還產(chǎn)生類似細(xì)菌素的抑菌物質(zhì)，可降低消化道內(nèi)病原菌的數(shù)量，使腹瀉率明顯降低，從而保護(hù)了腸黏膜的形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整，因而有助于增強(qiáng)仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力。

（參考文獻(xiàn)15篇，刊略，需者可函索）