采收期對(duì)青皮核桃抗氧化特性及耐貯性的影響

孫 雯，宋淑亞，羅仁仙，楊曉輝，馬惠玲

（1.西北農(nóng)林科技大學(xué)林學(xué)院，陜西 楊凌 712100；2.咸陽(yáng)西秦生物科技有限公司，陜西 咸陽(yáng) 712000；3.宜君縣野生動(dòng)植物保護(hù)管理站，陜西 宜君 727200；4.宜君縣核桃產(chǎn)業(yè)開發(fā)辦公室，陜西 宜君 727200；5.西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，陜西 楊陵 712100）

采收期對(duì)青皮核桃抗氧化特性及耐貯性的影響

孫 雯1，宋淑亞2，羅仁仙3，楊曉輝4，馬惠玲5,*

（1.西北農(nóng)林科技大學(xué)林學(xué)院，陜西 楊凌 712100；2.咸陽(yáng)西秦生物科技有限公司，陜西 咸陽(yáng) 712000；3.宜君縣野生動(dòng)植物保護(hù)管理站，陜西 宜君 727200；4.宜君縣核桃產(chǎn)業(yè)開發(fā)辦公室，陜西 宜君 727200；5.西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，陜西 楊陵 712100）

以8月上、中、下旬采收的中林5號(hào)和遼寧4號(hào)青皮核桃果實(shí)為試材，于0～1 ℃，相對(duì)濕度70%～80%條件下貯藏，測(cè)定貯期核桃各抗氧化相關(guān)指標(biāo)及貯藏品質(zhì)。結(jié)果表明：8月下旬采收果實(shí)總酚和類黃酮含量在貯藏30 d后呈上升趨勢(shì)，超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、多酚氧化酶（PPO）均于貯藏30 d后持續(xù)增長(zhǎng)或出現(xiàn)活性高峰。兩品種均為8月中旬采收果實(shí)腐爛指數(shù)最高，遼寧4號(hào)果實(shí)腐爛指數(shù)總體上高于中林5號(hào)；貯藏后各采收期采收果實(shí)的碘價(jià)均下降，不飽和脂肪酸的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)均上升，以8月下旬采收果實(shí)的碘價(jià)下降幅度最小，不飽和脂肪酸的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)最大。8月下旬采收青皮核桃有助于抗氧化物質(zhì)的積累及防御酶活性的提高，果實(shí)較耐貯。

青皮核桃；品種；采收期；抗氧化性；耐貯性

核桃（Juglans regia L.）別名胡桃、羌桃，與扁桃、腰果、榛子齊名，并稱為世界著名的四大干果。因其具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保鍵價(jià)值，在市場(chǎng)上十分走俏，價(jià)格連年上升，且一直呈上升之勢(shì)。鮮核桃是核桃成熟季上市的主要產(chǎn)品，為了搶占市場(chǎng)，我國(guó)核桃多有早采現(xiàn)象，導(dǎo)致收獲果實(shí)的核仁發(fā)育不全，澀味濃、含水量高，品質(zhì)不足，易于腐爛，使采后6%的核桃直接損失[1]。另外，為了延長(zhǎng)鮮核桃上市期，核桃鮮貯的研究與實(shí)踐逐漸提上議事日程。采收期是影響貯藏壽命的主要因素之一，因?yàn)椴煌瑫r(shí)期采收的果實(shí)成熟度不同，受到溫度、濕度等環(huán)境因素的影響而具有不同的生理代謝活性，其表現(xiàn)之一就是果實(shí)內(nèi)積累的抗氧化物質(zhì)和具有的防御酶活性不同，從而抵抗采后水分脅迫和果實(shí)衰老的能力有所差異。然而，用于鮮貯的核桃何時(shí)適宜采收至今尚不清楚。針對(duì)我國(guó)各核桃產(chǎn)地主要栽植早實(shí)核桃，從8月上旬至8月下旬連續(xù)采收上市、沒有嚴(yán)格采收標(biāo)準(zhǔn)可依的情況，本實(shí)驗(yàn)選用兩個(gè)早實(shí)核桃品種為對(duì)象，不同時(shí)期采收，通過(guò)比較各批果實(shí)冷藏效果及其抗氧化物質(zhì)含量和相關(guān)酶活性的動(dòng)態(tài)變化，旨在揭示采收期對(duì)鮮貯核桃冷藏壽命和核仁品質(zhì)的影響，為核桃鮮貯實(shí)踐提供原料采摘期的選擇依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

核桃果實(shí)采自陜西省周至縣核桃良種示范園栽植的中林5號(hào)和遼寧4號(hào)為供試品種，分別于2012年8月上旬、8月中旬、8月下旬3 個(gè)時(shí)期，挑選大小基本一致，無(wú)機(jī)械損傷及病蟲害的果實(shí)采收。采后小心剪去果柄，裝于吸水紙襯墊的塑料筐中，當(dāng)日運(yùn)回西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)院實(shí)驗(yàn)冷庫(kù)（路途0.5 h），0～1 ℃預(yù)冷24 h，每批果實(shí)按品種分開，各選取100 個(gè)分裝于塑料筐中，每個(gè)品種重復(fù)6 筐，隨機(jī)品字形疊放，0～1 ℃、相對(duì)濕度70%～80%條件下貯藏。其中3 筐用于保鮮效果的統(tǒng)計(jì)，另外3 筐用于定期取樣測(cè)定生理生化指標(biāo)。

福林酚試劑 北京索萊寶科技有限公司；氮藍(lán)四唑（nitro blue tetrazolium，NBT） 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；愈創(chuàng)木酚、鄰苯二酚 公私合營(yíng)新中心化學(xué)廠；2,4,6-三吡啶基三秦、亞油酸 美國(guó)Aladdin Chemistry公司；抗壞血酸 成都市科龍化工試劑廠。

1.2 儀器與設(shè)備

UV-3100紫外-可見分光光度計(jì) 上海美譜達(dá)儀器有限公司；DHG-9070A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海齊欣科學(xué)儀器有限公司；TP-214電子天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；HW-SY21-KP6電熱恒溫水浴鍋 美麗伯樂科教商貿(mào)有限公司；7890A氣相色譜儀 安捷倫科技（中國(guó)）有限公司。

1.3 方法

1.3.1 核桃青皮抗氧化物質(zhì)含量

1.3.1.1 總酚含量

參考田文禮等[2]方法，以沒食子酸為標(biāo)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，總酚含量以mg/g表示。

1.3.1.2 類黃酮含量

參考Wolfe等[3]方法，以蘆丁為標(biāo)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，類黃酮含量以mg/g表示。

1.3.2 核桃青皮抗氧化酶活性測(cè)定

1.3.2.1 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性測(cè)定

參考王艷等[4]方法，在提取劑用量上有所改動(dòng)：稱取5.0 g核桃青皮樣品，加入5 mL磷酸緩沖液（0.05 mol/L Na2HPO4-NaH2PO4，pH 7.8，內(nèi)含1%聚乙烯吡咯烷酮），冰浴研磨成勻漿，于4 ℃、10 000 r/min離心10 min，收集上清液，低溫保存?zhèn)溆?。以抑制NBT光化還原50%為一個(gè)SOD活性單位（U）。

1.3.2.2 過(guò)氧化物酶（peroxidase，POD）活性測(cè)定

用SOD提取液，參考Fang 等[5]方法測(cè)定POD活性。在反應(yīng)液用量上略有變動(dòng)：3.0 mL 0.1%愈創(chuàng)木酚溶液與0.5 mL酶提取液混合，加200 μL 0.5 mol/L H2O2溶液?jiǎn)?dòng)反應(yīng)。以每克核桃青皮樣品（鮮質(zhì)量）在30 s內(nèi)引起反應(yīng)體系吸光度增加0.001定義為一個(gè)酶活力單位（U）。

1.3.2.3 過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）活性測(cè)定

仍用SOD提取液，參考張福平等[6]的方法測(cè)定CAT活性，反應(yīng)液用量稍有變動(dòng)：2.9 mL 20 mmol/L H2O2溶液、100 μL酶提取液。以每克核桃青皮樣品（鮮質(zhì)量）每分鐘使反應(yīng)液吸光度減少0.01定義為1個(gè)酶活性單位（U）。

1.3.2.4 多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO）活性測(cè)定

參考李成華等[7]所采用的方法，稱取5.0 g核桃青皮樣品，反應(yīng)液用量有所改動(dòng)：4.0 mL 50 mmol/L pH 5.5乙酸-乙酸鈉緩沖液、1.0 mL 50 mmol/L鄰苯二酚溶液，25 ℃水浴保溫10 min，加入100 μL酶液。以測(cè)定條件下每克核桃青皮每分鐘引起吸光度改變0.01定義為1個(gè)酶活力單位（U）。

1.3.3 核桃青皮總抗氧化能力（ferric reducingantioxidant power，F(xiàn)RAP）的測(cè)定

參考趙文恩等[8]改進(jìn)的方法測(cè)定。樣品用量及提取方法為：稱取5.0 g核桃青皮樣品，加入10 mL 50%乙醇溶液研磨成勻漿，10 000 r/min離心20 min，取上清液低溫保存?zhèn)溆谩？偪寡趸芰Φ臏y(cè)定同郭長(zhǎng)江等[9]方法。

1.3.4 腐爛指數(shù)

對(duì)青皮核桃進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，統(tǒng)計(jì)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)及方法同馬惠玲等[10]。

1.3.5 核仁品質(zhì)測(cè)定

碘價(jià)測(cè)定：參照GB/T 5538—2005《動(dòng)植物油脂：過(guò)氧化值測(cè)定》[11]；游離脂肪酸（free fatty acids，F(xiàn)FA）含量：采用氣相色譜法測(cè)定，參照馬艷萍等[12]的方法進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 采收期對(duì)核桃青皮抗氧化物質(zhì)含量的影響

2.1.1 總酚含量的變化

圖1 遼寧4號(hào)（A）和中林5號(hào)（B）青皮核桃不同采收期總酚含量的變化Fig.1 Changes in total phenolic content in green husks of walnut fruits from different cultivars and harvest stages

由圖1可看出，兩個(gè)品種不同時(shí)期采收果實(shí)采收時(shí)的總酚含量均沒有顯著差異，貯藏期間動(dòng)態(tài)變化水平卻有不同。對(duì)圖1A的遼寧4號(hào)而言，8月上旬和中旬采收果實(shí)的總酚含量整體上高于下旬采收果實(shí)，分別于30、42 d出現(xiàn)一高峰；8月下旬采收的在30 d后才持續(xù)上升，到第48天時(shí)顯著高于另外兩個(gè)采收期果實(shí)（P＜0.05）。對(duì)圖1B的中林5號(hào)而言，不同時(shí)期采收果實(shí)的總酚含量在前24 d均保持較小波動(dòng)的平穩(wěn)趨勢(shì)。24 d后，8月上旬和中旬采收果實(shí)依然保持平穩(wěn)變化趨勢(shì)，8月下旬采收果實(shí)的于第30天起迅速上升至最大值，然后維持在較高水平?？梢?，8月上旬前采收遼寧4號(hào)促進(jìn)了果實(shí)采后酚類物質(zhì)的合成，對(duì)中林5號(hào)則無(wú)作用；8月下旬采收對(duì)兩個(gè)品種均促進(jìn)了果實(shí)貯藏后期酚類物質(zhì)的合成。

2.1.2 類黃酮含量的變化

由圖2可以看出，類黃酮含量變化趨勢(shì)和總酚含量變化趨勢(shì)大致相同。8月上旬或中旬采收的遼寧4號(hào)果實(shí)先升高后下降，出現(xiàn)兩個(gè)高峰；8月下旬采收的則一直保持在低水平，30 d后逐漸上升。8月上旬或中旬采收的中林5號(hào)果實(shí)類黃酮含量均變化較平緩，8月下旬采收果實(shí)自30 d后升高并保持在高水平，說(shuō)明8月下旬采收有利于果實(shí)貯藏后期類黃酮的積累。類黃酮物質(zhì)與植物抗性具有密切的關(guān)系[13]，植物在受到某些傷害時(shí)，會(huì)刺激體內(nèi)類黃酮類物質(zhì)的大量積累[14-15]?？梢姡颂仪嗥ぶ蓄慄S酮物質(zhì)含量較高，有利于果實(shí)貯期抵抗微生物的侵染，采收早（8月上旬）和晚（8月下旬）的果實(shí)分別在貯前30 d和貯30 d后表現(xiàn)為類黃酮積累的優(yōu)勢(shì)，奠定了果實(shí)耐貯的物質(zhì)基礎(chǔ)。

圖2 遼寧4號(hào)（A）和中林5號(hào)（B）青皮核桃不同采收期類黃酮含量的變化Fig.2 Changes in flavonoids content in green husks of walnut fruits from different cultivars and harvest stages

2.2 采收期對(duì)相關(guān)酶活性的影響

2.2.1 SOD活性變化

圖3 遼寧4號(hào)（A）和中林5號(hào)（B）青皮核桃不同采收期SOD活性的變化Fig.3 Changes in SOD activity in green husks of walnut fruits from different cultivars and harvest stages

如圖3所示，3 個(gè)采收期間以8月下旬采收果實(shí)的SOD活性顯著高于另外兩個(gè)采收期（P＜0.05）。圖3A中遼寧4號(hào)果實(shí)的SOD活性在貯期變化較?。合缺３址€(wěn)定，36 d后下降；圖3B中林5號(hào)果實(shí)的SOD活性變化較大：在前18 d穩(wěn)定，以后逐漸上升，36 d達(dá)到最大值后復(fù)又下降。不同采收期果實(shí)貯期SOD活性變化趨勢(shì)在兩個(gè)品種上極其相似，均表現(xiàn)為36 d后，采收期越晚果實(shí)的酶活性越高，8月下旬的果實(shí)與另外兩個(gè)采收期果實(shí)差異顯著（P＜0.05）。

2.2.2 POD活性變化

圖4 遼寧4號(hào)（A）和中林5號(hào)（B）青皮核桃不同采收期POD活性的變化Fig.4 Changes in POD activity in green husks of walnut fruits from different cultivars and harvest stages

如圖4所示，貯期遼寧4號(hào)和中林5號(hào)果實(shí)的POD活性變化均表現(xiàn)為：8月下旬采收果實(shí)在貯藏前期低于另外兩個(gè)采收期果實(shí)，然后逐漸增大，至42 d后反超另外兩批果實(shí)而達(dá)到最高水平，48 d時(shí)8月下旬采收的遼寧4號(hào)和中林5號(hào)果實(shí)的POD活性都極顯著高于另外兩個(gè)批次采收果實(shí)（P＜0.01），8月上旬和中旬采收果的POD活性間差異則不顯著。由于POD有提高果實(shí)對(duì)活性氧的抵抗能力，延緩果實(shí)衰老的作用[16]。青皮核桃于冷藏30 d左右發(fā)生乙烯釋放高峰，果實(shí)進(jìn)入全面衰老[17]，說(shuō)明8月下旬采收的兩品種的果實(shí)在貯藏前期氧化還原代謝活性較低，后期響應(yīng)果實(shí)衰老，出現(xiàn)POD活性增大，對(duì)活性氧清除能力增強(qiáng)的反應(yīng)較另兩個(gè)采收期果實(shí)靈敏，有利于抵抗衰老。

2.2.3 CAT活性變化

圖5 遼寧4號(hào)（A）和中林5號(hào)（B）青皮核桃不同采收期CAT活性的變化Fig.5 Changes in CAT activity in green husks of walnut fruits from different cultivars and harvest stages

由圖5A所示，遼寧4號(hào)果實(shí)3個(gè)采收期的CAT活性在貯藏前30 d均呈高峰型變化，30 d后逐漸增大，至48 d時(shí)8月下旬采收果極顯著（P＜0.01）高于8月上旬采收果，8月上旬采收果極顯著（P＜0.01）高于8月中旬采收果。由圖5B可知，中林5號(hào)各批采收果實(shí)貯藏前30 d CAT活性變化較小，30 d后逐漸增大，8月上旬采收果實(shí)還出現(xiàn)一高峰，至48 d時(shí)8月下旬采收果極顯著（P＜0.01）高于8月上旬和下旬采收果，8月上旬和下旬采收果實(shí)間的CAT活性差異不顯著。說(shuō)明青皮核桃果實(shí)貯藏前期的CAT活性變化趨勢(shì)主要受品種的影響：遼寧4號(hào)果實(shí)的高峰較中林5號(hào)明顯，同時(shí)早采果的峰值顯著高于其他兩個(gè)采收期果；后期（30 d后）主要受到采收期的影響：8月下旬采果實(shí)上升較快，是其響應(yīng)果實(shí)衰老，增強(qiáng)活性氧清除能力和保持耐貯性的標(biāo)志。

2.2.4 PPO活性變化

圖6 遼寧4號(hào)（A）和中林5號(hào)（B）青皮核桃不同采收期PPO活性的變化Fig.6 Changes of PPO activity in green husk of walnut fruits from different cultivars and harvest stages

如圖6A所示，遼寧4號(hào)3 個(gè)采收期果實(shí)在貯藏前30 d內(nèi)PPO活性緩慢增加，30 d后8月下旬采收的果實(shí)逐漸加快增長(zhǎng)，另外兩個(gè)采收期果趨于平穩(wěn)，到第48天時(shí)，8月下旬采收果的PPO活性最高，且與8月中旬采收果實(shí)差異顯著（P＜0.05）。由圖6B可知，8月上旬與中旬采收中林5號(hào)果實(shí)PPO活性在貯期30 d內(nèi)保持平穩(wěn)，8月下旬采收果在采收時(shí)顯著高于其他兩采收期，貯24 d后又開始增大，30 d后另外兩采收期果也增加到與8月下旬采收果相同的水平。30 d后各采收期果PPO活性的變化與其總酚含量同步增加。由于PPO催化酚類氧化形成對(duì)病原菌有毒的醌類物質(zhì)[18]，所以兩品種在8月下旬采收果實(shí)后期響應(yīng)衰老，增強(qiáng)酚類氧化，提高抗病性的潛力強(qiáng)于另外兩個(gè)采收期果實(shí)。

2.3 FRAP值的變化

圖7 遼寧4號(hào)（A）和中林5號(hào)（B）青皮核桃不同采收期FRAP值的變化Fig.7 Changes in FRAP value in green husks of walnut fruits from different cultivars and harvest stages

由圖7可以看出，兩個(gè)品種果實(shí)貯期總抗氧化能力變化規(guī)律不同，遼寧4號(hào)（圖7A）3 個(gè)采收期果實(shí)于前30 d變化均較少，30 d后出現(xiàn)一高峰；中林5號(hào)（圖7B）3 個(gè)采收期采收的果實(shí)貯期全程均逐漸增大，至末期42 d后有所下降。圖7A中，8月上旬采收的果實(shí)的高峰值極顯著（P＜0.01）高于8月下旬采收的，8月下旬采收的極顯著（P＜0.01）高于8月中旬采收的，到48 d貯藏結(jié)束時(shí)，3個(gè)采收期采收果間的FRAP值差異卻不顯著；圖7B中，中林5號(hào)多數(shù)觀測(cè)點(diǎn)的FRAP值均以8月上旬采收果顯著高于另外兩個(gè)采收期果實(shí)，至48 d時(shí)，隨采收批次的延遲，果實(shí)的FRAP值依次減小，且彼此間差異極顯著（P＜0.01）。綜上所述，貯期品種間FRAP值變化雖存在差異，但兩品種上都表現(xiàn)出了最早批次采收果實(shí)的抗氧化能力最大，即8月上旬采收有利于青皮核桃貯期保持較高總抗氧化能力。

2.4 采收期對(duì)果實(shí)耐貯性的影響

2.4.1 果實(shí)腐爛指數(shù)的變化

表1 果實(shí)貯藏期腐爛指數(shù)的變化Table1 Decay index changes of green walnut fruits during storage

由表1可以看出，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，兩個(gè)品種果實(shí)的腐爛指數(shù)均增加，貯后8月中旬采收的果實(shí)腐爛指數(shù)最高，之前和之后采收的則相對(duì)較低。貯藏期前35 d，8月上旬與下旬采收的果實(shí)的腐爛指數(shù)間差異不顯著，之后到貯藏66 d時(shí)，8月下旬采收果實(shí)的腐爛指數(shù)上升加快，且3 個(gè)采收期采收果的腐爛指數(shù)之間差異極顯著（P＜0.01），說(shuō)明貯藏后期的果實(shí)腐爛指數(shù)與采收期關(guān)系密切?？傮w上8月上旬采收果小于下旬采收果，又依次小于8月中旬采收果。此外，遼寧4號(hào)各采收期采收果實(shí)的腐爛指數(shù)均高于同批采收的中林5號(hào)果實(shí)，遼寧4號(hào)8月上旬采果實(shí)貯藏至66 d時(shí)的腐爛指數(shù)較下旬采果48 d時(shí)高19.78%，中林5號(hào)8月上旬采收果實(shí)貯藏66 d時(shí)的腐爛指數(shù)較下旬采果48 d時(shí)高9.11%，反映了無(wú)論同期采收果實(shí)比較，還是采收期腐爛指增長(zhǎng)速率比較，中林5號(hào)都較遼寧4號(hào)耐貯，但是，二者的8月上旬采收果與下旬采收果同日出庫(kù)時(shí)，腐爛指數(shù)便以下旬采收果更低。

2.4.2 核仁碘價(jià)和游離脂肪酸含量變化

表2 貯期核仁碘價(jià)和游離脂肪酸含量的變化Table2 Changes in iodine value and relative content of fatty acids in the kernel before and after storage

碘價(jià)是油脂不飽和程度的特征指標(biāo)，碘價(jià)越高，不飽和程度越大，反之，則小。表2顯示，隨著采收期的推遲，兩個(gè)品種核仁的碘價(jià)均增大，其中8月下旬采收果與之前兩個(gè)采收期的果實(shí)差異顯著（P＜0.05），表明對(duì)供試兩個(gè)品種而言，8月中旬到下旬核仁脂肪酸的不飽和度增加較前一個(gè)旬期加快。由于植物多不飽和脂肪酸的形成主要是以油?；拿擄柡蜑榛A(chǔ)，因此，脫飽和作用是植物不飽和脂肪酸生物合成的第一步[19]，即植物生長(zhǎng)過(guò)程一般是先積累飽和脂肪酸，再轉(zhuǎn)化形成不飽和脂肪酸。由此可知，8月中旬到下旬是核仁加速成熟的時(shí)期。貯藏后3 個(gè)采收期果實(shí)核仁的碘值全部極顯著下降（P＜0.01），并基本保持了采前的大小順序和差異水平，以8月中旬采收果實(shí)的降幅最大，8月下旬采收果實(shí)降幅最小，表明采收早的果實(shí)采后與采收較晚的一樣不飽和脂肪酸酸的損失大于合成，在其采收時(shí)碘值較低水平上，貯藏后變得更低。故而從提高保鮮核桃品質(zhì)的角度考慮，應(yīng)該適當(dāng)延遲果實(shí)采收期。

不飽和脂肪酸是核桃所含的最重要功能性成分，是核桃具有保健及藥用價(jià)值的主要原因[20-21]。從而不飽和脂肪酸含量是評(píng)價(jià)核仁品質(zhì)好壞的有效指標(biāo)。由表2可以看出，采收期從8月上旬延續(xù)到8月下旬，中林5號(hào)果實(shí)核仁中飽和與不飽和脂肪酸占油脂的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別下降與升高，下旬的質(zhì)量分?jǐn)?shù)與前兩個(gè)采收期的差異顯著，與碘值反映的脂肪酸不飽和度變化規(guī)律一致；遼寧4號(hào)核仁中飽和與不飽和脂肪酸占油脂的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別升高與下降，亦表現(xiàn)為下旬質(zhì)量分?jǐn)?shù)與前兩個(gè)采收期的差異顯著，與碘值反映的脂肪酸不飽和度變化規(guī)律并不一致。貯后，兩個(gè)品種一致表現(xiàn)為，飽和脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)有所下降，不飽和脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)有所上升，表面上看與碘值反映的脂肪酸不飽和度變化規(guī)律相反，實(shí)際上，這是由于鮮核桃貯藏期油脂含量總體下降[12]，即使不飽和脂肪酸在油脂中的相對(duì)分?jǐn)?shù)增大，其絕對(duì)量卻減少所致。

3 討 論

核桃的主要食用部分為核仁，但本實(shí)驗(yàn)對(duì)采后青皮生理、青皮核桃保鮮效果、核仁品質(zhì)指標(biāo)3部分內(nèi)容均進(jìn)行了研究，因?yàn)樵趲嗥す麑?shí)中，只要青皮完好，核仁則一定新鮮如初。因此，研究不同因素對(duì)青皮核桃保鮮的作用與其他水果一樣，首先需考察青皮（果肉）的保鮮效果。其次分析青皮果實(shí)及青皮采后生理變化，再同步觀測(cè)核仁品質(zhì)，這樣才能完整闡明各因素通過(guò)作用于青皮而對(duì)青皮核桃保鮮的效應(yīng)及其生理基礎(chǔ)，并且說(shuō)明所選取的有效措施是建立在保持良好核仁品質(zhì)的前提之下的，具有實(shí)際意義。

多方研究表明，不同果蔬中多種生物活性成分共同協(xié)同作用可引起抗氧化能力的變化[22]，因此，不同材料的酚類物質(zhì)含量與抗氧化活性的關(guān)系不盡相同：如陸廣念等[23]測(cè)得蔬菜總酚和抗氧化能力呈一定的正相關(guān)性，楊冬梅等[24]又得出這種相關(guān)性不一定總是呈正相關(guān)性出現(xiàn)，與抗氧化能力的測(cè)定方法有關(guān)。本研究中的總酚或類黃酮含量與抗氧化能力未呈現(xiàn)相關(guān)性，說(shuō)明核桃青皮的酚類物質(zhì)不是引起抗氧化能力的最主要成分。常成等[18]研究表明，抗壞血酸在果蔬抗氧化方面起到重要作用。因此，有必要測(cè)定核桃青皮中抗壞血酸等其他抗氧化物質(zhì)的含量來(lái)進(jìn)一步闡明核桃青皮抗氧化的機(jī)理。

SOD、POD、CAT普遍存在于植物體內(nèi)，它們協(xié)同作用徹底清除各種來(lái)源的活性氧，它們活性的升高標(biāo)志著機(jī)體內(nèi)自我防御系統(tǒng)的啟動(dòng)，三者均在青皮核桃貯藏30 d后活性增大，有的還出現(xiàn)高峰，標(biāo)志著青皮核桃果實(shí)進(jìn)入衰老期后，可能出現(xiàn)活性氧產(chǎn)生的增多，并誘導(dǎo)了防御體系，是該果實(shí)具有一定耐貯性的理論基礎(chǔ)；中林5號(hào)和遼寧4號(hào)果實(shí)貯藏末期3 種酶表現(xiàn)了最晚批次采收果實(shí)最高的總體趨勢(shì)，但中林5號(hào)的CAT活性表現(xiàn)為8月上旬采收的末期活性高峰更明顯，這表明不同品種間此酶活性變化存在差異，這與宋燁等[25]研究結(jié)果相一致。周亞鳳等[26]得出，適當(dāng)延緩南果梨采收期，果實(shí)的PPO活性將會(huì)降低。王趙改等[27]研究雙胞菇表明隨著采收期的延遲，PPO活性迅速增加，這表明采收期對(duì)PPO活性的影響會(huì)因果蔬種類的不同而有所差異。本實(shí)驗(yàn)研究的兩個(gè)品種PPO活性變化大體相同，活性變化規(guī)律與王趙改等[27]研究的結(jié)果基本一致。卞生珍等[28]解釋雙胞菇PPO活性的上升可能是由于后期的衰老脅迫了底物，使得潛伏態(tài)的酶被誘導(dǎo)激發(fā)使得活性有所上升，本實(shí)驗(yàn)中青皮核桃果實(shí)后期PPO活性的增強(qiáng)與總酚含量增加幾乎同步。推測(cè)也是由底物的增加誘導(dǎo)了PPO活性，是核桃果實(shí)具有一定抗衰老能力的特征。

核仁碘價(jià)和不飽和脂肪酸含量是評(píng)價(jià)核仁品質(zhì)的重要指標(biāo)。本研究表明晚采的中林5號(hào)核桃果實(shí)在貯后碘價(jià)較高時(shí)，不飽和脂肪酸含量也較高，即碘價(jià)的高低與脂肪酸的不飽和度呈正比，這與郝利平等[29]的研究結(jié)果相一致，也說(shuō)明適當(dāng)晚采有利于延長(zhǎng)該品種鮮核桃市場(chǎng)供應(yīng)期，還可提高貯后產(chǎn)品的品質(zhì)。然而，遼寧4號(hào)核仁中飽和與不飽和脂肪酸占油脂相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨采收期延遲分別上升與下降，其碘價(jià)卻增大，預(yù)示著從8月上旬至8月下旬，該品種核仁處于脂肪酸活躍合成階段，以飽和脂肪酸的合成速度大于不飽和脂肪酸，前人在這方面尚無(wú)報(bào)道，所以需要有待下一步測(cè)定各類脂肪酸和油脂總量的變化來(lái)確定。

雖然中林5號(hào)表現(xiàn)了較遼寧4號(hào)耐貯的特性，而且根據(jù)碘值變化可知其不飽和脂肪酸與遼寧4號(hào)一樣，均在8月中旬到下旬間加速形成，顯示了如果將該品種8月下旬采收果實(shí)用于鮮貯，既可取得保鮮率高的結(jié)果，又可得到品質(zhì)較好的鮮核仁?？墒?，實(shí)驗(yàn)中觀察到至8月下旬時(shí)中林5號(hào)會(huì)產(chǎn)生大量落果，是由于其成熟期較早，易招致鳥害的緣故，此現(xiàn)象既說(shuō)明中林5號(hào)不宜留作晚采鮮貯材料，也反映出生產(chǎn)上以核仁含水量和可食性粗略認(rèn)定的核桃成熟標(biāo)準(zhǔn)與油脂積累的高峰值并不一致，用于鮮食和干制核桃的確切采收指標(biāo)有待深入系統(tǒng)研究。

4 結(jié) 論

中林5號(hào)和遼寧4號(hào)果實(shí)的耐貯性并沒有隨采收期的提前或延期表現(xiàn)規(guī)律性變化，而是均以8月上旬果最耐貯，中旬果最不耐貯，下旬果居中。8月中旬果實(shí)采后貯藏過(guò)程中總酚和類黃酮含量、SOD、POD、CAT和PPO活性持續(xù)較低，這些指標(biāo)在8月上旬采收果實(shí)上表現(xiàn)為貯藏前30 d較高，在8月下旬果上表現(xiàn)為后期漸升或快速增大。果實(shí)酚類物質(zhì)合成增強(qiáng)和自由基防御酶活性增大與果實(shí)抵抗腐爛能力增強(qiáng)，貯后不飽和脂肪酸降解少具有一致性。從果實(shí)材料可得，盡可能延長(zhǎng)市場(chǎng)供應(yīng)期和提高貯后核仁品質(zhì)等方面綜合考慮，選擇遼寧4號(hào)于8月下旬采收較中林5號(hào)更可行，冷藏48 d，腐爛指數(shù)35.78%時(shí)宜于中止。

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Effect of Harvest Stage on Antioxidant Property and Storability of Green Walnut Fruits

SUN Wen1, SONG Shu-ya2, LUO Ren-xian3, YANG Xiao-hui4, MA Hui-ling5,*
(1. College of Forestry, Northwest A & F University, Yangling 712100, China; 2. Xianyang Xiqin Biotechnology Co. Ltd., Xianyang 712000, China; 3. Wildlife Protection Station of Yijun County, Yijun 727200, China; 4. Walnut Industry Office of Yijun County, Yijun 727200, China; 5. College of Life Science, Northwest A & F University, Yangling 712100, China)

Green walnut fruits from two cultivars, Zhonglin 5 and Liaoning 4 were harvested in early, middle and late August, and stored at 0–1 ℃ and a relative humidity (RH) 70%–80%. Physiological indices of green husk and quality traits of kernel during the storage were evaluated. The results showed that total phenolic and flavonoid contents present an increasing trend after the 30th day of storage in fruits harvested in late August, and the activities of SOD, POD, CAT and PPO increased continuously or reached a peak after the 30thday of storage. For both cultivars, middle August provided the highest fruit decay index among three harvest stages, and Liaoning 4 showed an overall higher fruit decay index than Zhonglin 5. After storage, green walnut fruits harvested at each stage presented a decrease in iodine values and an increase in the relative contents of unsaturated fatty acids. Moreover, the smallest reduction in iodine values and the highest relative contents of unsaturated fatty acids were observed for fruits harvested in late August. This harvest stage was beneficial for the accumulation of antioxidant substances and the induction of defensive enzyme activities and resulted in enhanced disease resistance in green walnut fruits.

green walnut fruit; variety; harvest stage; antioxidant property; storability

S609.3

A

1002-6630（2014）10-0290-07

10.7506/spkx1002-6630-201410054

2013-07-13

陜西省農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目（2012K01-29）；陜西省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2011JQ3002）

孫雯（1988—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)楣麑?shí)采后生理。E-mail：gold123456789@163.com

*通信作者：馬惠玲（1965—），女，教授，博士，研究方向?yàn)楣麑?shí)采后生理與保鮮技術(shù)。E-mail：ma_huiling65@hotmail.com